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CRECIMIENTO MICROBIANO

Crecimiento: aumento del número de células.

Crecimiento Síntesis de macromoléculas


FISION BINARIA
microbiano
Formación de estructuras celulares

Formación del septo o gemación

División celular

Tiempo de generación (tg) = tiempo de acumulación (ta) + tiempo de duplicación (td)


Esquema de
duplicación de un
bacilo de
Escherichia coli
Aspectos cuantitativos del crecimiento microbiano
Crecimiento exponencial: el número
de células se duplica a intervalos
constantes de tiempo.

Velocidad de crecimiento de un cultivo


microbiano.
a) Datos de una población que se
duplica cada 30 min.
b) Datos representados en escalas
aritmética (ordenada izquierda) y
logarítmica (ordenada derecha).
Las matemáticas del crecimiento
El aumento del número de células en un cultivo bacteriano de crecimiento
exponencial se puede expresar con matemáticas sencillas basadas en la progresión
geométrica del número 2.

N0 = número inicial de células


N = N02n N = número final de células
n = número de generaciones

g = tiempo de generación
g = t/n
t = duración del crecimiento exponencial
Curva de crecimiento

Un recuento de viables mide el número de células del cultivo que son capaces de reproducirse. La densidad
óptica (turbidez), una medida cuantitativa de la dispersión de la luz por un medio de cultivo, aumenta con
el aumento del número de células.
Cultivo continuo

La densidad de la población está


controlada por la concentración de
nutriente limitante en el
reservorio, y la velocidad de
crecimiento, por la velocidad de
flujo. Ambos parámetros pueden
ser establecidos al realizar el
experimento.
Factores que afectan el crecimiento microbiano

➢ TEMPERATURA

➢ pH

➢ DISPONIBILIDAD DE AGUA

➢ DISPONIBILIDAD DE OXÍGENO
Temperaturas cardinales

Temperatura mínima: por debajo de la cual el


microorganismo no puede crecer.

Temperatura óptima: estado en el que todos o la


mayoría de los componentes celulares funcionan a
su velocidad máxima.

Temperatura máxima: por encima de la cual el


microorganismo no puede crecer.
Clases de organismos según la temperatura

Relación entre la temperatura y la velocidad de crecimiento de las diferentes clases de


microorganismos. En la gráfica se indica la temperatura óptima de cada organismo
representativo.
Efecto del pH en el crecimiento microbiano
Aunque algunos microorganismos pueden vivir a pH muy altos o
muy bajos, el pH interno de la célula se mantiene cerca de la
neutralidad.

➢ Neutrófilos: organismos que crecen de manera óptima a un


valor de pH en el intervalo neutro (pH de 5,5 a 7,9)
➢ Acidófilos: organismos que crecen por debajo de 5,5.

➢ Alcalófilos: organismos con pH óptimo de crecimiento


alrededor de 8.
Osmolaridad y crecimiento microbiano

Efecto de la concentración de NaCl


en el crecimiento de
microorganismos con diferentes
tolerancias o requerimientos salinos.
La concentración óptima de NaCl
para los microorganismos marinos
como Aliivibrio fischeri es del 3 %
aproximadamente; para los halófilos
extremos está entre el 15 % y el
30 %, según el organismo.
Oxígeno y crecimiento microbiano

Tipos de microorganismos con relación al oxígeno

Grupo Requerimiento de O2 Metabolismo


Aerobios
Estrictos Sí Respiración aeróbica

Facultativos No Respiración aeróbica y anaeróbica. Fermentación


Microaerófilos Sí, baja tensión Respiración aeróbica
Anaerobios
Aerotolerantes No Fermentación
Estrictos Letal Fermentación. Respiración anaeróbica
Control del crecimiento microbiano
Algunos conceptos:

Esterilización: proceso a través del cual se puede lograr la eliminación o


destrucción total de microorganismos viables.

Desinfección: destrucción de microorganismos perjudiciales, es decir


patógenos, en objetos inanimados, sin que se asegure la eliminación de
esporas bacterianas.

Antisepsia: el un proceso de desinfección en tejidos vivos.

Asepsia: ausencia de infección o contaminación, es decir la falta absoluta de


gérmenes.
Aplicaciones de los métodos de control de
crecimiento microbiano
➢ En las instituciones de salud se emplean principalmente para eliminar
agentes patógenos de los instrumentos quirúrgicos reutilizables.

➢ En la industria alimentaria se emplean para aumentar la vida útil de los


alimentos. Por otra parte, los alimentos alterados pueden resultar muy
perjudiciales para la salud del consumidor.

➢ En los laboratorios de investigación científica se emplean para eliminar


microorganismos de los elementos de trabajo, evitando así la
contaminación de la muestra, recipientes y material de trabajo.
Factores que influyen en la eficacia de los
tratamientos antimicrobianos
➢ Cantidad de microorganismos: mientras más gérmenes estén presentes al
inicio del proceso, más tiempo será necesario para eliminarlos o más
agresivo deberá ser el tratamiento.
➢ Factores ambientales: la presencia de materia orgánica a menudo inhibe la
acción de sustancias químicas antimicrobianas. Dado que su actividad se
debe a reacciones químicas dependientes de la temperatura, los
desinfectantes actúan un poco mejor en condiciones templadas.
➢ Tiempo de exposición: los antimicrobianos químicos a menudo requieren
exposiciones prolongadas para afectar a los gérmenes más resistentes o a las
endosporas.
➢ Características microbianas: composición de la pared celular.
Esquema de susceptibilidad de los microorganismos
a los procesos de esterilización
1. Priones
2. Esporas bacterianas
3. Micobacterias (M. tuberculosis)

RESISTENCIA
4. Protozoos (quistes de Giardia)
5. Virus pequeños sin envoltura (Poliovirus, Parvovirus, Hepatitis A)
6. Virus grandes sin envoltura (Adenovirus)
7. Esporas fúngicas (Aspergillus)
8. Formas vegetativas bacterianas y fúngicas
9. Virus grandes con envoltura lipídica (VIH, VHC, VHB, Herpes,
Varicela, Rubeola, Coronavirus: COVID-19)
Acciones de los agentes utilizados
para el control de microorganismos
➢ Alteración de la permeabilidad de la membrana. La membrana regula
activamente el paso de nutrientes a la célula y la eliminación de desechos de la
misma. Su daño interfiere en el crecimiento de la célula.

➢ Daño de las proteínas y ácidos nucleicos. La célula no se puede replicar y


tampoco puede tener sus funciones metabólicas normales, como la síntesis de
enzimas.

Cuando se seleccionan métodos para el control de microorganismos deben


considerarse sus efectos sobre otros elementos además de los microbios. Ej.:
ciertas vitaminas o antibióticos en solución podrían ser inactivados por el calor.
Muchos materiales se alteran con el calentamiento repetido.
Control de crecimiento: agentes físicos
❖ Métodos que producen destrucción y muerte
➢ Calor Calor húmedo Autoclave
Ebullición
Pasteurización

Calor seco Fuego directo


Aire caliente

➢ Radiaciones Ionizantes
No ionizantes
❖ Métodos que producen inhibición del crecimiento
➢ Bajas temperaturas ➢ Desecación
➢ Alta presión ➢ Presión osmótica
Calor: destruye los microorganismos por desnaturalización de sus enzimas

Parámetros importantes en un tratamiento térmico:

Punto de muerte térmica (PMT) Temperatura mínima necesaria para causar la


muerte de todas las bacterias en una suspensión
líquida particular en 10 minutos.

Tiempo de muerte térmica (TMT) Menor tiempo necesario para que todas las
bacterias de un cultivo líquido mueran a una
temperatura determinada.

Tiempo de reducción decimal (TRD) Tiempo en minutos en el que se destruye el 90%


de la población de bacterias a una temperatura
determinada.
Calor húmedo: produce desnaturalización y coagulación de las proteínas

➢ Autoclave: esterilización
por vapor de agua a presión. Ventajas: es considerado el
Presión = 1 atm método más económico, rápido y
Temperatura = 121°C sin efectos adversos por no dejar
Tiempo = 15 minutos residuos del agente esterilizante
En estas condiciones se
produce la destrucción de
bacterias y esporas.
➢ Agente esterilizante: vapor
de agua.

Desventajas: no es apto para aplicar en materiales que


no soporten las condiciones del proceso.
Otros métodos que utilizan calor húmedo
➢ Ebullición: esterilización por vapor de agua sin presión. Produce destrucción de
formas vegetativas de las bacterias patógenas, de casi todos los virus, hongos y sus
esporas en unos 10 minutos. No se pueden eliminar las endosporas bacterianas.
➢ Pasteurización: es el proceso térmico realizado a líquidos (generalmente
alimentos) en el que se aplica una temperatura elevada durante un intervalo de
tiempo. Produce destrucción de patógenos.
VAT: el procedimiento, ya casi en desuso se basa en calentar el alimento a 63°C y
luego enfriarlo durante 30 minutos para luego envasarlo.
HTST: pasteurización “flash” en la que se aplican altas temperaturas durante un
corto tiempo, generalmente 72°C - 15 segundos.
UHT: también conocido como ultrapasteurización, es un proceso de flujo
continuo donde el líquido se somete a 150 °C durante 2 segundos y se enfría
después a temperatura ambiente. Este rápido calentamiento produce una
degradación mínima del alimento.
Calor seco: mata por los efectos de la oxidación y coagulación

➢ Fuego directo: exposición directa del objeto a esterilizar a la llama del


mechero. Se utiliza para material de mesada pequeños como ansas.

➢ Esterilización por aire caliente (estufas): temperatura entre 170°C y 200°C


durante 2 horas aproximadamente. Se utiliza para elementos metálicos y de
vidrio, sustancias en polvo y sustancias oleosas.

Comparación con respecto al calor húmedo:


- Es menos penetrante por eso necesita más tiempo.
- Las soluciones no se pueden esterilizar en la estufa porque se les evapora el agua
Radiaciones
➢ Ionizantes: alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y
lipídicas. Rayos gamma, rayos X o haces de electrones de alta energía. Poseen
mucha energía y son altamente penetrantes. Son muy eficientes y se utilizan en la
industria farmacéutica y alimenticia.
➢ No ionizantes: afectan el ADN. Rayos UV: son poco penetrantes y se utilizan en
áreas cerradas.

Otros agentes físicos: inhibidores del crecimiento


➢ Bajas temperaturas: la refrigeración habitual (0 a 7°C).
➢ Alta presión: si la presión es lo suficientemente elevada se alteran las estructuras
moleculares de las proteínas y los hidratos de carbono. Destrucción de las formas
vegetativas de las bacterias.
➢ Desecación: en ausencia de agua los microorganismos no pueden crecer ni
reproducirse pero pueden permanecer viables.
➢ Presión osmótica: las altas concentraciones de sales y azúcares crean un ambiente
hipertónico que determina que el agua abandone la célula microbiana.
Agentes químicos
Provocan la pérdida de viabilidad de microorganismos. La concentración de un
desinfectante, el material a desinfectar y el pH del medio influyen en su actividad.
➢ Óxido de etileno: agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles
como grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos y provoca la desnaturalización
de proteínas. Se utiliza una cámara que produce el gas y se utiliza generalmente en la
industria farmacéutica para materiales de plástico y de vidrio calibrado.
➢ Halógenos: el iodo inhibe la función de las proteínas y es un fuerte agente oxidante; el
cloro forma el ácido hipocloroso muy oxidante, que altera los componentes celulares.
➢ Alcoholes: desnaturalización de las proteínas y disolución de los lípidos.
➢ Metales pesados y sus compuestos: desnaturalización de enzimas y otras proteínas por
acción de los iones metálicos.
➢ Peróxidos: oxidación de componentes celulares. Se utilizan para superficies
contaminadas y también para heridas profundas.

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