UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

FISIOLOGÍA Y GENÉTICA BACTERIANA

INTEGRANTES:

Reyes Mendoza, Erika Lucía

Tipte Alvarado Andrea Sofia

Yengle Vereau, Jose Alfredo

DOCENTE DE MESA:

Prof. Castro Angulo, Raúl.

TRUJILLO-PERÚ

2022-II
 Bacterias del ácido acético

I. INTRODUCCIÓN

Las bacterias del ácido acético (Acetobacter y Gluconobacter )pertenecen a la familia

Acetobacteraceae y estan incluidas en el grupo de las α-Proteobacterias. Son
microorganismos Gram-negativos, de forma elipsoidal o cilíndrica que pueden encontrarse
aislados, en parejas o formando cadenas . Son móviles por flagelacion polar o peritrica.
Presentan actividad catalasa positiva, oxidasa negativa y no forman endospora , con
características comunes del grupo de bacterias similares a Pseudomonas que se presentaron
anteriormente. Viven en la superficie de las plantas donde constituyen una microflora
secundaria que utiliza los productos de desecho de la microflora primaria (bacterias lácticas y
levaduras). Esto es así porque presentan la capacidad de utilizar alcoholes como fuente de
carbono y energía produciendo su oxidación a ácido (bacterias suboxidantes como
Gluconobacter) o a CO2y H2O(bacterias superoxidantes como Acetobacter) (1).

La producción de ácido acético por estas bacterias las hace extremadamente acidófilas. Las
bacterias suboxidantes carecen de un ciclo de los ácidos tricarboxílicos completo por lo que
oxidan de forma estequiométrica el etanol a acético. Las bacterias super oxidantes realizan
una primera oxidación a acético; pero la presencia de ciclo de ácidos tricarboxílicos permite
la oxidación total mucho más lenta. Otra particularidad del grupo es que la utilización de
azúcares se produce únicamente por la ruta de las pentosas. Además de por su diferente
capacidad de oxidación de alcoholes las dos bacterias del ácido acético pueden diferenciarse
por su flagelación polar en Gluconobacter y peritrica en Acetobacter. Ciertos grupos de
Acetobacter son capaces de producir una gran cantidad de celulosa extracelular que llega a
formar verdaderas películas de este polímero.(1)

Su temperatura óptima de crecimiento es de 25 - 30 o C, aunque también pueden

desarrollarse a temperaturas mas altas; algunas especies lo hacen a 38– 40 C y otras, a
temperaturas mas bajas (10 C), aunque su crecimiento es muy debil. El pH optimo de
crecimiento esta ́entre 5 y 6; sin embargo, la mayor a de las cepas pueden crecer a pH
inferiores a 5, incluso a pH 2–2,2 , pero la tolerancia a los bajos pH depende de otros
parametros, como la concentracion de etanol y la disponibilidad de oxigeno.(2)

Esta capacidad es aprovechada en la industria de alimentos para la elaboración de vinagres de

vinos y de frutas, utilizado como un aderezo más versátil y muy utilizado en la cocina
gourmet. Industrialmente, se han desarrollado cultivos iniciadores (109 células/mL) y
utilizados en procesos biotecnológicos como es la bio-oxidación de mostos alcohólicos
(4-6%) obtenidos a partir de frutos con el fin de obtener vinagres.
Competencias
Aislar bacterias del ácido acético a partir de muestras biológicas con fines industriales
teniendo en cuenta las condiciones de bioseguridad y responsabilidad social.
Explica el fundamento del metabolismo de las bacterias del ácido acético en condiciones de
laboratorio con responsabilidad social.

II. MATERIALES
- Placas Petri con Agar Lee con etanol al 1%
- Asa bacteriológica
- Frutas fermentadas
- Chicha de jora fermentada
- Sedimento de vino
- Nata de aceituna
- Mechero de alcohol
- Encendedor
- Incubadora
III. MÉTODOS:
En placas petri conteniendo el medio de cultivo agar Lee conteniendo etanol al 1%, se dividió
en 4 cuadrantes: vino, fruta fermentada, aceituna y chica. Se sembró por estría y en superficie
cada una de las muestras biológicas. Luego se llevó a incubar a 35°C por 18-24 h.
A partir de las colonias características de bacterias productoras de ácido acético (Acetobacter
y Gluconobacter), hacer coloración Gram; y finalmente, se subcultivo en agar nutritivo.

Lectura: Para la lectura, primero se hizo una revisión bibliográfica para poder reconocer
colonias con cambio de color (de purpura a amarillo) del medio de cultivo y la presencia de
un halo de aclaramiento alrededor de la colonia de cultivo, indica de manera presuntiva
colonias de bacterias del ácido acético.
IV. RESULTADOS

Fig 1. Observación de colonias productoras de ácidos de fruta fermentada, evidenciado por el

cambio de color en el medio por el indicador purpura de bromocresol. Formación de halo
transparente.

Fig 2. Observación de colonias productoras de ácidos de fruta fermentada, evidenciado por el

cambio de color en el medio. Observación de pocos halos transparentes.

Fig 3. Observación de bacterias gram negativas de la colonia C6 de una muestra de fruta

fermentada
 V. DISCUSIÓN

Lee y colaboradores desarrollaron un medio de agar para la cuantificación diferencial de

bacterias iniciadoras de yogurt. Al desarrollar este medio se estudió cuidadosamente la
fermentación de los carbohidratos de varios cocos y bacilos. Con una apropiada combinación
de sacarosa y lactosa, la producción de ácido por S. thermophilus es estimulada, cuando solo
una cantidad muy limitada de azúcar utilizable (lactosa) para L. bulgaricus es aprovechada y,
la producción de ácido por el bacilo es restringido. Sin embargo, la cantidad de lactosa, es
ajustada de forma que se favorezca la formación de buenas colonias en el agar. Para la
detección visual de los diferentes niveles de fermentación, se utiliza un indicador que es el
púrpura de bromocresol, además se agrega al agar carbonato de calcio, el cual previene la
difusión del ácido a través del medio y localiza el ácido producido por cada colonia (3).

El Agar Lee contiene sacarosa, la cual la mayoría de las cepas de L. bulgaricus no fermentan,
pero sí las de S. thermophilus, además de la lactosa, que ambas especies utilizan. Con una
combinación adecuada de sacarosa y lactosa, la tasa de producción de ácido por parte de S.
thermophilus aumenta y la de L. bulgaricus se reduce. Por lo tanto, los estreptococos crecen
primero y producen un aroma cremoso y mantecoso a partir del diacetilo y metabolitos
similares. El potencial redox también se reduce por los estreptococos, lo que permite el
crecimiento de los lactobacilos. Los estreptococos sintetizan productos que estimulan el
crecimiento de los lactobacilos. La triptona y el extracto de levadura proporcionan los
nutrientes nitrogenados esenciales a las bacterias iniciadoras del yogur (láctico). La lactosa y
la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables. El carbonato de calcio, junto con el
fosfato dipotásico, se añaden para amortiguar el medio y evitar el descenso drástico de la
temperatura del medio y del pH debido a la formación de ácido láctico. El púrpura de
bromocresol es el indicador de pH, que se vuelve amarillo en condiciones de acidez y da el
color amarillo a la colonia (4).
VI. Referencias Bibliográficas

1. Martínez CL, Cortés LM, Jiménez HM. Aislamiento, caracterización y conservación

de bacterias ácido-acéticas a partir de productos fermentados tradicionales como una
herramienta pedagógica. Pág. 146-149. Bio-grafía [Internet]. 1 de julio de 2011
[citado 8 de noviembre de 2022]; 4(7):146.149. Disponible en:
https://revistas.pedagogica.edu.co/index.php/bio-grafia/article/view/8

2. Fuentes LE, Tapia A, Teresita H/., Mascarúa MÁ, Yuriria E/., Luis SP/., et al.
Elementos: ciencia y cultura [Internet]. Redalyc.org. [citado el 9 de noviembre de
2022]. Disponible en: https://www.redalyc.org/pdf/294/29404906.pdf

3. Méndez L. Evaluación del Medio de Agar de Lee Para la Determinacion y

Cuantificacion de Lactobacillus bulgaricus Y Streptococcus thennophilus en Yoghurt
[Internet]. México, D.F: Universidad La Selle; 1988. Disponible en:
http://132.248.9.195/pmig2017/0085004/0085004.pdf

4. HiMedia Laboratories. Lee’s Agar [Internet]. India: HIMEDIALABS; 2021.

Disponible en: https://himedialabs.com/TD/M602.pdf

Anexo

Medio Agar Lee

CaCO3 0,2 g
KH2 PO4 0.01 g
K2HPO4 0,02 g
Peptona 1,0 g
Casaminoácidos 0,1 g
Extracto de levadura 1,0 g
Glucosa 1,0 g
Agar 1,8 g
Agua destilada c.s.p 100 mL

pH: 7,0 – 7,5

Indicador Púrpura de Bromocresol

Antes de usar incorporar 0,5 mL de etanol 75º