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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


ESCUELA PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y
PARASITOLOGÍA
CURSO DE HELMINTOLOGÌA PARASITARIA

HP-IF 04

• Técnica de Sheather

Erika Lucia Reyes Mendoza

TRUJILLO-PERÚ
2022

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I. Presentación

Como se sabe que en la técnica por sedimentación, en la cual los parásitos


microscópicos, que son más pesados que las bacterias, y las partículas de
alimentos no digeridas van al fondo del recipiente, la flotación utiliza un medio
líquido de suspensión más pesado que los parásitos y éstos suben a la superficie y
pueden ser recogidos de la película superficial. El primer método de concentración
por flotación fue introducido por Bass (1906) para concentrar huevos de uncinarias
en escaso número en las heces. Para que el método sea útil, no basta con que el
medio de suspensión sea más pesado que los objetos que han de flotar, sino que
además no ha de producir retracciones en el parásito que impidan el
reconocimiento
La concentración de parásitos por flotación en muestras fecales permite comprobar
la existencia de quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos, aun cuando
estén presentes en pequeñas cantidades. Esta técnica se basa en la propiedad que
tienen las soluciones de densidad mayor, para hacer flotar objetos menos densos,
como los huevos y quistes de parásitos, los cuales son colectados en la superficie
del líquido y observados al microscopio. La técnica de concentración con
sulfato de zinc proporciona una suspensión de parásitos muy limpia y es
muy Buena para la recuperación de quistes de protozoarios de la mayoría de los
huevos de helmintos. Aunque no es muy usada en forma rutinaria, por su sencillez
se puede utilizarse en encuestas.
La ventaja de estos métodos es que producen una preparación más limpia de
deyección que el procedimiento de sedimentación, facilitando mucho su
observación microscópica. Las desventajas es que aquellos parásitos con mayor
peso específico que la solución empleada no flotarán (que es lo que a veces
sucede con huevos infértiles de Ascaris lumbricoides o huevos operculados) y que
el tiempo en que debe hacerse la observación microscópica es menor debido a que
la película superficial puede destruirse y los parásitos caer al fondo del tubo

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II. Objetivos

• Poder conocer, ejecución y fundamentar la técnica de Sheather para el


reconocimiento e identificación de huevos de enteroparasitos

III. Fundamento

Se basa en la flotación de quistes, ooquistes y huevos de parásitos en una solución


de azúcar que posee mayor densidad que ellos. Esta técnica es útil para la
concentración de quistes y ooquistes de protozoos y huevos de helmintos y se usa
como método preferencial en el diagnóstico de los coccidios: Cryptosporidium,
Cyclospora, Isospora, etc , pues los ooquistes flotan de manera diferencial a las
levaduras en una capa de líquido más arriba que éstas exhibiendo una tonalidad
rosada característica que permite su identificación sin necesidad de coloración
permanente.

IV. Materiales y Equipos

4.1. Materiales
4.1.1. Material biológico
- Muestra de heces
4.1.2. Material de laboratorio
- Tubos de ensayo 13 x 100.
- Láminas portaobjetos.
- Laminilla cubreobjetos.
- Aplicador.
- Solución de azúcar Sheather
- Hipoclorito de sodio
- Lugol fuerte
- Asa de platino.
- Gradilla para tubos de ensayo.
- Suero fisiológico
- Embudo de plástico
- Gasa.
- Pinza curva
- Aplicador.

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4.1.3. Equipos
- Microscopio óptico
- Centrifugadora

V. Procedimiento

• Homogenizar 2 g de materia fecal en suero fisiológico en un tubo


• Filtrar el homogenizado
• Centrifugar el tubo con el material homogeneizado a 1500 r.p.m. durante 3 min.
• Eliminar el sobrenadante, y agregue la solución de azúcar hasta 1 cm del borde del
tubo; agite hasta disolver el sedimento
• centrifugar y completar con la solución de azúcar hasta el borde y esperar 5
minutos la formación de un menisco.
• Con la ayuda de una pipeta, tomar una muestra de la superficie del menisco y
colocar la gota en una lámina portaobjeto, agregar Lugol, cubra con una laminilla y
observe al microscopio.

VI. Observación

Esta técnica es apropiada para la observación y registro de ooquistes de


Isospora, Cryptosporidium, Cyclospora y Sarcocystis.

VII. Resultados

Fig.1 . Observación de huevo de Difilobotrium .


Método de Sheather

4
. Fig.2. Observación de Quiste de Giardia
Método de Sheather

Giemsa 5

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