FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

PROGRAMA DE BIOLOGIA
LABORATORIO DE TÉCNICAS EN BIOTECNOLOGÍA
CÓDIGO: 20119

PRÁCTICA 3. BIOTRANSFORMACIÓN DE MATERIAL RESIDUAL VEGETAL

PARA OBTENCIÓN DE CELULOSA Y ÁCIDO ACÉTICO

Introducción

La actividad de las bacterias acéticas se conoce desde hace siglos por la

producción de vinagre, la acetificación de bebidas alcohólicas y el deterioro de
frutos. Estos organismos han sido de los primeras bacterias estudiadas que no
son de importancia médica y a la fecha se conoce realmente poco de su
ecología en el ambiente natural. Las acetobacterias son un grupo de
microorganismos gramnegativos que se desarrollan en distintas plantas.1 La
mayoría de los géneros de esta familia soportan altas concentraciones de
sacarosa, así como de sus componentes, glucosa y fructosa. Además, muchas
de ellas son capaces de crecer en presencia de ácido acético, produciendo
acidificación cuando crecen en presencia de etanol. La relación fisiológica de
las acetobacterias también está dada desde el punto de vista filogenético. La
comparación de secuencia nucleotídica del gene ribosomal 16S con el de
muchas otras bacterias, reúne a las acetobacterias en un grupo bien definido
dentro de la subdivisión a de las proteobacterias (Madigan M; Martinko j.,
2005).

El vinagre es un producto de la biotecnología humana que se conoce desde

hace miles de años. En un recetario del celebre romano Apicio ya aparece el
escabeche, una receta de conserva hecha con vinagre, como uno de los platos
más apreciados. A pesar de que el vinagre es usado por la humanidad desde
hace siglos no fue hasta 1864 que se descubrió como se producía. Fue Pasteur,
el que estudió y caracterizó el procedo producido por bacterias.

Objetivos:
 Aplicar las técnicas para construir un biotransformador a pequeña escala.
 Manejar adecuadamente los parámetros de operación utilizados en la
elaboración transformación del material vegetal frutal por acetobacterias.
 Aplicar los conocimientos bioquímicos en la transformación y obtención de
ácido acético.

Materiales, Equipos y Reactivos

 Cáscaras y pulpa de tomate (500g)
 15ml de vinagre de frutas
 Ácido clorhídrico 1M (100mL)
 Gasas y algodón estériles
 Termómetro
 Cocina industrial
 Morteros
  Recipientes plásticos
 pH metro
 Tabla de picar y Procesador de alimentos (provisto por los estudiantes)
 Beaker de 500 mL
 Balanza digital
 Agitadores magnéticos

Procedimiento
 Procese un equivalente a 250g de tomate sin adicionar agua.
 Filtre el a través de gazas, transfiéralo a otro Beacker.
 Caliente en un Erlenmeyer 250 mL de agua destilada a 65°C; y adicione
el triturado de tomate. Retire una muestra para evaluar cualidades
organolépticas (olor, sabor, color, cuerpo de la preparación)
 Deje este mosto cocinar por 10 min.
 Adicione 15mL de vinagre de frutas.
 Caliente a 45°C nuevamente por 40 min
 Cuando termine el tempo, retire del calor y enfríe hasta
aproximadamente 30°C.
 Mientras el mosto se enfría, coloque en el agitador magnético y cierre el
Erlenmeyer con torunda de algodón y gaza.
 Este mosto deberá quedarse fermentando por mínimo de 3 días a una
temperatura entre 30-40°C. Verificar diariamente que el sistema de
transformación esté en agitación y aereación constante.

Cuestionario
¿Por qué la biomasa de la cáscara es utilizada?
2. ¿Explique la razón por la que se realiza la cocción del maceradoantes de
adicionar el inóculo de vinagre?
3. ¿Por qué estas cepas pueden transformar el material vegetal reclacitrante?
4. ¿Cuál es el mecanismo de transformación de las bacterias acidófilas?
5. ¿Explique el mecanismo de transformación del material vegetal?
6. ¿Represente el proceso de elaboración de la celulosa y vinagre a partir de
este proceso?

Referencias
Andrés-Barrao, C., Falquet, L., Calderon-Copete, S. P., Descombes, P., Pérez, R. O. y
Barja, L. C. C. (2011). Genome sequences of the high-acetic acidresistant bacteria
Gluconacetobacter europaeusm(isolated from vinegar). Journal of Bacteriology,
193(10), 2670–2671.
Aydin, Y. A. y Aksoy, N. D. (2013). Isolation and characterization of an efficient
bacterial cellulose producer strain in agitated culture: Gluconacetobacter hansenii P2A.
Applied Microbiology and Biotechnology, 98(3), 1065-1075.
Madigan M; Martinko j., 2005. Brock Biology of Microorganisms (11th ed. edición).
Prentice Hall. ISBN 0-13-144329-1