SISTEMAS DE REPARACIÓN DEL

ADN
Ramón E. Graterol B. MD
 AGENDA
• Reparación Directa – Desapareamientos
– Fotoliasa y Transferasas (“mismatch repair”)
– Translesión (“by-pass”)
• Escisión de la región dañada
seguida de remplazamiento • Reparación de roturas de
preciso doble cadena
– Escisión de base – Unión de extremos no-
– Escisión de nucleótidos homólogos
– Unión de extremos
• Reparación de errores de homólogos: recombinación
replicación homóloga
REPARACIÓN DIRECTA
 REPARACIÓN DIRECTA

DNA fotoliasa: revierte los dimeros de

timina – fotorreactivación

Transferasas de grupos alquilo:

eliminan los grupos alquilo generados
por mutágenos (metanosulfonato de
etilo, nitrosoguanidina)
 ESCISIÓN Y DE
REMPLAZAMIENTO PRECISO
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE BASES

Son sistemas de
reparación
dependientes de
homología. Reparan
los daños causados
por metilación,
desaminación,
oxidación o pérdida
espontanea de
bases.
(ADN Glicosilasas + Endonucleasas AP + Desoxirribofosfodiesterasa + Polimerasa + Ligasa)
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE BASES

• Una glucosilasa elimina la base, deja la

cadena intacta.

• La AP endonucleasa corta la cadena, la

AP-liasa elimina el azúcar.

• La DNA polimerasa rellena el hueco.

• La DNA ligasa sella la mella

REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS
Este sistema de reparación actúa sobre una gran
variedad de lesiones:

•Dímeros de pirimidina
•Modificaciones químicas con carcinógenos
•Bases desapareadas y pequeños lazos del ADN

De forma general este sistema implica:

•Detección del daño: mecanismo de “escaneo”
•Actividad endonucleasa: Escinucleasa y ADN helicasa
•Sistema de replicación: DNA polimerasa y DNA ligasa
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS

PROCARIOTAS
Función Componente
Escaneo DNA UvrA
Nucleasa:
UvrB, UvrC
ESCINUCLEASA
Helicasa UvrD
Sistema de
DNApol I/DNApol II; ligasa
replicación
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS

EUCARIOTAS
Gen humano Función de la proteína
XPA Reconocimiento del daño (interacción con DNA lesionado)
XPB DNA helicasa, subunidad de TFIIH
XPC Reconocimiento inicial de la lesión. Interacción con TFIIH
XPD DNA helicasa, subunidad de TFIIH
XPF Actividad nucleasa (5’lesión)
XPG Actividad nucleasa (3’ lesión)
ERCC1 Unión a XPF y a proteína RPA
RPA Unión al complejo XPF-ERCC1 (reconocimiento de lesión junto a XPA)
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS
REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE NUCLEÓTIDOS
E. coli vs Humanos
Función E. Coli Humanos
Escaneo DNA UvrA XPA, XPC; RPA
Nucleasa: UvrB, UvrC XPF, XPG
ESCINUCLEASA
Helicasa UvrD XPB, XPD
Sistema de DNApol I/DNApol II; ligasa DNApol d/e; ligasa
replicación
 XERODERMA PIGMENTOSA

 Desorden genético autosómico recesivo donde

los sistemas enzimáticos de escisión de
nucleótidos están mutados.

 Fotosensibilidad: los individuos no pueden

reparar los daños causados por la luz
ultravioleta

 El cáncer de Piel sobreviene por mutaciones

en los genes supresores de tumores (p53) o los
protoncogenes se transforman en oncogenes.
REPARACIÓN DE ERRORES DE
REPLICACIÓN
 DESAPAREAMIENTOS (MMR)

PROCARIOTAS
Función Componente
Escaneo
MutS
DNA
MutL
Reparación
MutH (endonucleasa)
de errores
MutU (UvrD helicasa)
Sistema de
DNApol III; ligasa
replicación
 DESAPAREAMIENTOS (MMR)

PROCARIOTAS
• Los apareamientos
incorrectos son
reconocidos por un
homodímero MutS, al que
se une MutL
• Los 2 monómeros MutS
crean un bucle que
contiene el apareamiento
incorrecto
•La endonucleasa MutH se une a sitios hemimetilados, permanece inactiva hasta que interacciona con el
complejo MutL-MutS
• MutH corta la hebra hemimetilada, del lado 5’ ó 3’ del desapareamiento
 DESAPAREAMIENTOS (MMR)

PROCARIOTAS
 DESAPAREAMIENTOS (MMR)

HUMANOS
¿Cómo se distingue la cadena hija en
humanos?

No se ha determinado, sin embargo, se sugiere

que intervienen:
• Las secuencias CG metiladas
• Las mellas transitorias de los fragmentos de
OKAZAKI
DNApol δ/ε; Ligasa
 DESAPAREAMIENTOS (MMR)

E. coli vs Humanos
Función E. Coli Humanos
Escaneo DNA MutS hMSH2-hMSH6
Reparación de errores MutL hMLH1-PMS1, PMS2
MutH (endonucleasa) MED1 (endonucleasa)
MutU (UvrD helicasa)
Sistema de replicación DNApol III; ligasa DNApol d/e; ligasa
 SINDROME DE LYNCH

• Origina entre el 2% y el 7% de todos los cánceres de colon y recto

que se diagnostican.

• La edad media a la que se presenta el cáncer de colon es 44 años.

• Se debe a mutaciones germinales en los genes MSH2, MLH1,

MSH6 y hPMS2.

• Reconocen los apareamientos erróneos y reclutan a

la exonucleasa I, las proteínas SSB y la helicasa para que
seguidamente puedan actuar la ADN Pol y ligasa para su
reparación
 TRANSLESIÓN

Reparación propensa a error

Sistema SOS que evita

el bloqueo en la
replicación mediante la
adición de bases no
específicas (E. coli)
REPARACIÓN DE ROTURAS DE
DOBLE CADENA
REPARACIÓN DE ROTURAS DE DOBLE CADENA

Son potencialmente
letales
Causas de rotura de doble
hebra
• Radiaciones ionizantes
• Especies de oxígeno reactivas
• Quimioterápicos (bleomicina)
REPARACIÓN DE ROTURAS DE DOBLE CADENA

Unión de extremos no-homólogos

p. ej.: nucleasas; eliminan
los extremos no apareados

Proteína KU: ATPasa dependiente

de DNA con actividad helicasa

KU desenrrolla los extremos del

molde hasta que regiones muy cortas DNA-PK: Proteína quinasa
(2-6 pb) puedan aparearse dependiente de DNA SE ELIMINAN PB
REPARACIÓN DE ROTURAS DE DOBLE CADENA

Unión de extremos homólogos: Recombinación Homóloga

ATM: proteína
quinasa activada
por rotura de
cadena doble

RAD51: conduce el apareamiento de

ADN homólogos e invasión de cadenas
DETENCIÓN DEL CICLO CELULAR

La proteína p53 detiene el

ciclo celular si el DNA está
dañado

La quinasa ATM
activa p53
ENFERMEDADES ASOCIADAS CON ALTERACIÓNES EN EL SISTEMA DE
REPARACIÓN POR UNIÓN DE EXTREMOS HOMÓLOGOS

ANEMIA DE FANCONI
Síntomas: Anomalías de desarrollo (infertilidad, deformidades esqueleto)
Anemia
Elevada predisposición a padecer leucemia mieloide

CÁNCER DE MAMA HEREDITARIO

Por deficiencia en BRCA-1 y BRCA-2
ATAXIA TELANGIECTASIA
Inestabilidad genómica, Disfuncióin del sistema inmune
Predisposición a padecer linfomas, leucemias.
Producida por alteraciones en la proteína quinasa ATM