UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
AREA ACADÉMICA DE CIENCIAS BÁSICAS
CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN BIOLOGÍA MOLECULAR Y BIOINFORMÁTICA

Blgo. Tomás Yuret MIRANDA TOMASEVICH

AYACUCHO PERÚ.
Principales acontecimientos en la molécula del ADN
• el mantenimiento de la información contenida en el adn es, por tanto, un
imperativo celular, por lo que en cada célula se encuentra un complicado
conjunto de sistemas de reparación de ADN.
• el ADN puede resultar dañado por diversos procesos, algunos espontáneos,
otros catalizados por agentes ambientales. además, la replicación puede,
ocasionalmente, dejar bases mal apareadas.
• la química de las lesiones del ADN es diversa y compleja.
Principales acontecimientos en la molécula del ADN
 Cuando está en peligro la integridad de la información genética, la
cantidad de energía química invertida en un proceso de reparación
parece no tener importancia.
 La reparación del ADN es posible en gran parte debido a que la
molécula de ADN consta de dos cadenas complementarias.
 Puede eliminarse y reemplazarse de forma precisa la lesión del ADN
en una cadena siguiendo las instrucciones de molde en la cadena
complementaria no dañada.
 Principales acontecimientos
en la molécula del ADN
• Las moléculas propias del ADN son irremplazables.
• Las mutaciones están ligadas al cáncer. Un error en el ADN
mal apareado, cambio o sustitución de una base , una
delección, etc., si se replica en ADN se transmite a las
generaciones futuras y se hace permanente.
MECANISMOS DE REPARACIÓN DEL ADN

El tipo de moléculas para entrar a formar parte del mecanismo

de reparación depende de:
1.El tipo de ADN dañado.
2.Si la célula ha entrado en estado de senescencia.
3.La fase del ciclo celular e que se encuentra la célula.
 1. FIDELIDAD DE LA POLIMERASA:
Fidelidad intrínseca de la maquinaria de replicación (10 -9 pb)

• Está dado por la actividad exonucleasa 3’ – 5’ (ADN polimerasa de reparación)

• Requerimiento de primers
• Imposibilidad de la polimerasa de agregar nucleótidos si no hay apareamiento
exacto en los nucleótidos previos.
• Implica la imposibilidad de replicación en dirección 3’- 5’.
 REPARACIÓN DE APAREAMIENTOS
INCORRECTOS
• Para corregir los apareamientos incorrectos se debe
discriminar la cadena molde y la recién sintetizada.
• La discriminación de la hebra se basa en la acción de
una enzima denominada Dam metilasa, que metila el
ADN en la posición N6 de todas las adeninas presente
en las secuecias 5´GATC3´

Reparación de mal apareamiento

Muchos errores se corrigen con la revisión, pero algunos se escapan. La reparación
de mal apareamiento sucede justo después de que se ha hecho ADN nuevo, y su
función es eliminar y reemplazar las bases mal apareadas (las que no se arreglaron
durante la revisión). La reparación de mal apareamiento también puede detectar y
corregir pequeñas inserciones y deleciones que suceden cuando las polimerasas "se
resbalan" y pierden su lugar sobre el molde22squared.
¿Cómo funciona la reparación de mal apareamiento? Primero, un complejo proteico
(grupo de proteínas) reconoce y se une a la base mal apareada. Un segundo complejo
corta el ADN cerca de la pareja errónea y otras enzimas cortan el nucleótido
incorrecto junto con un segmento de ADN circundante. Luego, una ADN polimerasa
reemplaza la sección faltante con los nucleótidos correctos y una enzima llamada
ADN ligasa sella el espacio
 2. Reparación por escisión de nucleótidos
La reparación por escisión de nucleótidos también se utiliza para reparar algún tipo de
daño que causa la radiación UV, como cuando te quemas con el sol. La radiación UV
puede causar que la citosina y la timina reaccionen con bases vecinas que también
sean C y T, y se forman enlaces que distorsionan la doble hélice y causan errores en la
replicación del ADN. El tipo más común de unión, el dímero de timina, se compone de
dos bases de timina que reaccionan entre sí y se unen químicamente
 SISTEMA DE REPARACIÓN DIRECTA
La reparación directa es realizada por la acción de una única enzima
capaz de reparar la lesión, sin necesidad de substituir la base
dañada. Así, la estructura original de la molécula del ADN revierte la
lesión. Existen tres mecanismos en la reparación directa:
fotorreactivación, alquiltransferencia y desmetilación oxidativa

a) Fotorreactivación. La radiación UV (longitud de onda entre 250 y 320 nm), puede

ocasionar alteraciones químicas en las bases del ADN. Los fotoproductos de estas
reacciones originan los dímeros de pirimidinas ciclobutano (CPD), pirimidina (6,4) y
pirimidonina (6,4 PP) que causan efectos deletéreos como la inhibición de la replicación y
de la transcripción, el aumento en la aparición de mutaciones, la detención del ciclo celular
y la muerte celular. Los efectos mutagénicos generados por la radicación UV son invertidos
por un proceso llamado fotorreactivación , catalizado por una fotoliasa, que posee dos
cromóforos que captan un fotón, cuya energía es utilizada para revertir el dímero, es decir
quiebra el enlace covalente entre las pirimidinas reparando el daño en el ADN
Mecanismo de reparación directa del ADN
por fotorreactivación, catalizado por
fotoliasas, el cual revierte la lesión del ADN
inducido por luz UV.
 3. SISTEMA DE REPARACIÓN
DIRECTA:
• Fotorreactivación: Eliminación de dímeros de pirimidina.
• Remoción del metilo en O6 de guanina.(la mutilación se
produce por agentes alquilantes).
Alquitransferencia: Remueve los aductos alquilo en las bases del ADN como la
metilación de restos de guanina para formar O6-metilguanina, usando enzimas
“suicidas” llamadas alquitransferasas, que desplazan el grupo metilo desde la
guanina al centro activo de la cisteína
 Reparación por apareamiento erróneo -
MMR (Mitsmach Repair)

El mecanismo de reparación de errores de

apareamiento (MMR), es responsable de remover
las bases desapareadas, causadas por daños
espontáneos, desaminación de bases, oxidación,
metilación y daños en los procesos de replicación o
recombinación.
La importancia del MMR radica en mantener la
estabilidad genómica y reducir las mutaciones
durante la replicación, puesto que individuos con
mutaciones relacionadas al MMR, presentan una
alta predisposición de tumores, síndromes y
cáncer.
Reparación por escisión de nucleótidos - NER (Nucleotide Excision Repair): El
complejo vde los tres polipéptidos (UvrABC) en E. coli actúa como endunucleasa,
localizando la lesión y removiendo los nucleótidos con daño. La escisión de
oligonucleótidos es realizada por la UvrC y la UvrD helicasa libera los
oligonucleótidos con daño, la ADN polimerasa I sintetiza y la ligasa une la
secuencia corregida a la cadena de ADN.
Reparación por apareamiento erróneo -
MMR (Mitsmach Repair): El
reconocimiento de las bases erróneas y
las regiones de DNA con pérdidas o
inserciones es realizado por un complejo
llamado MutSα, posteriormente un
dímero (MSH2-MSH6), se une al sitio del
apareamiento erróneo y el complejo
MutL (MLH1-PMS2) en presencia de
ATP reconoce la secuencia de ADN
hemimetilado generando un
rompimiento de la cadena
(endonucleasa). El segmento lesionado
es removido por la helicasa y la
exonucleasa retira la secuencia errónea,
de esta forma la polimerasa resintetiza y
la ligasa restaura los enlaces fosfodiéster.
 5. REPARACIÓN POR ESCISIÓN:

• 3.1. Reparación por escisión

de bases:
• Se localizan bases distintas a las 4
que componen el DNA.
• DNA glicosilasas eliminan estas
bases.
• La AP endonucleasa rompe los
enlaces fosfodiéster de la
desoxiribosa sin base unida.
• DNA polimerasa añade el
nucleótido eliminado.
• Ligasa cierra el polinucleótido.
 3. REPARACIÓN POR ESCISIÓN:

• 3.2. Reparación por escisión de nucleótidos:

• Repara casi cualquier daño que suponga un cambio
grande en la estructura del DNA:
• Reacción covalente de las bases con
hidrocarburos (Ej. Benzopireno)
• Dímeros de pirimidina (T-T; T-C; C-C),
causados por la luz solar.
• Un complejo multienzimático recorre el DNA en
busca de distorsiones en la doble hélice.
• Una vez localizadas, el esqueleto de fosfatos de la
cadena afectada se corta a ambos lados de la
región alterada.
• Una helicasa elimina el oligonucleótido resultante
de la digestión.
• El “hueco” (Gap) se rellena con una DNA
polimerasa y una ligasa.
6.MECANISMO DE REPARACIÓN DE QUIEBRES EN DOBLE
CADENA DSB (DOUBLE-STRAND BREAKS)
Reparación por recombinación homóloga - HR (Homologous
Recombination): En eucariotas los DSB son reconocidos por
un complejo proteico llamado MRN
(RAD50/MRE11/NBS1), este complejo posee actividad de
nucleasa que degrada el ADN produciendo cadenas
sencillas. Posteriormente, la proteína RAD52 protege el ADN
de la acción de exonucleasas inespecíficas, mientras que la
proteína RAD51 en presencia de ATP sintetiza un filamento
nucleoproteíco que busca la secuencia homóloga y cataliza el
intercambio y apareamiento de las cadenas con la ayuda de
RAD52. Finalmente, se forma una estructura de cadenas
entrecruzadas llamada el intermediario de Holliday que
terminan el proceso de reparación.
 3. REPARACIÓN POR ESCISIÓN:

• La reparación es posible por los siguientes proceso.

 4. SISTEMAS DE REPARACIÓN
POST- REPLICACIÓN:
 Reparación recombinatoria. La hebra parenteral no dañada rellena espacio
opuesto al sitio dañado en la otra molécula hija, mediante recombinación entre
secuencias homólogas.
 5. REPARACIÓN DE ERRORES COMETIDOS
DURANTE LA REPLICACIÓN:

• La reparación es posible porque la hebra molde marcada previamente por

metilación de la A de todas las secuencias GATC presentes en ella.
 6. REPARACIÓN DE LOS
DÍMEROS DE TIMINA:

• Fotorreactivación: Eliminación de dímeros de pirimidina.

• La reparación es posible por el efecto de la luz visible.

Dímeros de Timina
por efecto de la luz UV