MUTACIONES – CÁNCER – ENFERMEDADES GENÉTICAS 2.

Missense
3. Nonsense
MUTACIÓN: Cambio heredable en secuencias de
- Inserción de bases y Deleción de bases:
material genético en la célula (o virus)
Cambio en el marco de lectura (secuencias
NO TODAS LAS MUTACIONES SON DAÑINAS
codificantes)

Mutaciones SILENCIOSAS: no hay alteraciones

fenotípicas
Mutaciones BENEFICIOSAS: ayudan a que las especies se
adapten a cualquier cambio en su entorno
(EVOLUCIÓN).
Clasificación:
Cuanto DNA es afectado:
1. Mutaciones Cromosómicas: Afectan el número
y estructura de cromosomas.
2. Mutaciones Génicas o Puntuales: Afectan una o
pocas bases.
Donde se genera la mutación:
1. Mutaciones Somáticas: Ocurren en células
somáticas, se heredan células somáticas
nuevas.
La mutación ocurre en la gestación, es
congénito y en el adulto solo una parte del
organismo posee la mutación. No se hereda.
2. Mutaciones de la línea Germinal: Ocurren en
células que dan origen a los gametos (oocitos y
espermatozoides), se heredan a la progenie. En
el adulto, el organismo completo porta la
mutación.
- Inserción: Se infiltra un nucleótido entre otras
(ACTG -> ACATG)
- Deleción: desaparece un nucleótido
(ACTG -> AC--G)
- Sustitución: se sustituye un nucleótido por otro
distinto (ACTG -> ACGG)
- Nonsense: cambia a un codón de término, y se le
llama sin sentido, para la codificación
- Missense: Cambia un solo nucleótido y esto hace
que aparezca un codón que codifique para un
aminoácido distinto
TGC (Cys) -> GGC (Arg)
- Silenciosa: se cambia un nucleótido, pero esto no
implica ningún cambio a nivel del codón que lo
codifica, es decir el codón en el mismo, solo cambia
un nucleótido.
GCC (Ala) -> GCT (Ala)
MUTÁGENOS: son los agentes que hacen daño en el
DNA.

Como se produce la mutación:

1. Mutaciones Espontaneas: Se produce por

causas naturales (internas de la célula),
maquinaria de replicación o de reparación.
2. Mutaciones Inducidas: Son causadas por
factores ambientales (físicos y químicos)

Tipos de mutaciones:

Mutaciones cromosómicas:

- Deleción DESPURINACIÓN Y DESAMINACIÓN: 2 de las

- Duplicación alteraciones químicas más frecuentes en el DNA y
- Inversión pueden dar origen a mutaciones si no son reparadas
- Traslocación
Despurinación: remoción de una purina (A o G) desde
Mutaciones Génicas: un nucleótido, es decir, que se pierde una base
- Sustitución de bases: completa y hay pérdida de información
1. Silenciosas
Desaminación: remoción de un grupo amino desde una
base, provocando un cambio a otra base: cambio en la
información
La radiación ultravioleta provoca la formación de
dímeros de pirimidinas
la radiación UV no es ionizante, pero es capaz de
provocar la formación de enlaces covalentes entre 2
pirimidina que se encuentran unidas entre sí en la
misma hebra de DNA, esto provoca una deformación de
la doble hélice y la imposibilidad de la maquinaria de
replicación de copiar esos segmentos.
3 pasos que aseguran una copia de DNA de alta
fidelidad durante la replicación
actividad correctora de pruebas de DNA polimerasa
Proofreading, esta corrige errores inducidos por la
misma de una polimerasa durante la replicación
1. los nucleótidos desapareados en el extremo
3’OH bloquea la elongación
2. la actividad exonucleasa del ADN a polimerasa
remueve el nucleótido en dirección 3’ a 5’
3. DNA polimerasa vuelve a polimerizar
nucleótidos en dirección 5’ a 3’
Reparación del DNA: daño y respuesta al daño
la mayoría de estos errores genéticos provocados por
diferentes causas son eficientemente reparados por la
maquinaria de reparación de DNA
reparación dependiente de la hebra complementaria:
- Reparación de desapareamientos (Mismatch
Repair MMR): reparar errores en la secuencia
de bases como inserciones, de lesiones y
sustituciones que aparecen durante la
replicación y recombinación, además de reparar
algunas formas de daño del DNA. la edad con el
error es reconocida por la presencia de nicks y
quedan por la síntesis de la era discontinua
durante la replicación.
- Escisión de bases (base excisión Repair BER):
generalmente para reparar bases modificadas
químicamente, y podrían producir mutaciones
de sustitución.
- Escisión De nucleótidos (nucleotide excisión
Repair NER): reparación de lesiones que
producen deformaciones en la doble hélice,
como: dímeros de timidinas, uniones a grupos
químicos voluminosos.
reparación de cortes de las 2 hebras de DNA (double-
stand breaks):
- unión no homóloga de extremos (Non-
homologous end joiniing NHEJ)
- Reparación por recombinación homóloga
Xeroderma pigmentosum (xerodermia pigmentosa): es
una enfermedad autosómica recesiva que es causada
por mutaciones en genes de reparación por escisión de
nucleótidos. Hay 8 variantes aceptando genes XP-A a
XP-G.
Caracterizada por hiperpigmentación (Pecas),
hipersensibilidad a la radiación UV, cáncer de piel
precoz, cataratas. puede ir acompañada de alteraciones
neurológicas.
Ataxia telangiectasia.
es una enfermedad autosómica recesiva en el
cromosoma 11, y está usada por mutaciones en el gen
de la proteína ATM (ataxia telangiectasia mutated) una
proteína quinasa que actúa de sensor de cortes de
doble hebra en el DNA. está caracterizada por el
deterioro cerebelar progresivo (ataxia),
inmunodeficiencia, inestabilidad genómica, sensibilidad
de la radiación ionizante, infertilidad y predisposición al
cáncer.
Síndrome de Seckel 1
es una enfermedad autosómica recesiva en el
cromosoma 3, y es causada por mutaciones en el gen de
la proteína ATR (ATM and RAD3 related) Una proteína
quinasa que actúa de sensor de radiación ionizante UV,
o detención de la horquilla de replicación por cortes de
una hebra. está caracterizada por enanismo,
deficiencias cognitivas, alteraciones craneofaciales:
microcefalia, micrognatia (mandíbula pequeña), fisura
palatina o nariz de oso.
Síndrome de Werner
es una enfermedad autosómica excesiva en el
cromosoma 8 y es causada por mutaciones en el gen de
la proteína WRN, una DNA helicasa RecQ que posee
actividad exonucleasa, importante en la reparación de
cortes de doble hebra de DNA, mediante recombinación
homóloga y unión no homologa de extremos.
Caracterizada por envejecimiento prematuro (progeria),
acompañado de alopecia, aterosclerosis, fertilidad
reducida, diabetes tipo 2 y predisposición a cáncer
como meningiomas.
Elementos transponibles o móviles, “Genes saltarines”,
“DNA egoísta”
Clase 1: retro transposones: copiar y pegar y son
dependientes de transcriptasa reversa
Clase 2: transposones de DNA: cortar y pegar y son
dependientes de una transposasa
Elementos transportables o móviles dan cuenta de más
del 40% del genoma humano
Efectos de los elementos: las inserciones que ocurren
en la línea germinal son corregidas por diversos
mecanismos. Las inserciones en las células somáticas
pueden ser silenciosas y algunas incluso beneficiosas
evolutivamente. Pero la mayoría son detrimentales; se
asocian a cáncer, neuropatías y envejecimiento
- inserción de un Line -1 en el gen supresor de
tumores APC se asocia a cáncer de colon
- cambios en la estructura del genoma generados
por secuencias Alu se asocian con varias formas
de leucemia
- inserción de secuencias Alu en el gen de la
proteína mitocondrial TOMM40 se asocian a la
pérdida de la función mitocondrial, derivando
en neuropatías.
enfermedades genéticas
enfermedades congénitas: generadas por errores o
accidentes genéticos durante la gametogénesis,
gestación o parto. no son heredadas por el individuo
afectado desde sus progenitores, pero algunas veces
pueden ser heredadas a la progenie del individuo
afectado (ejemplos: trisomías; mutaciones de la línea
germinal en general, dependiendo del lugar y el
momento en el cual se produce la mutación)
enfermedades hereditarias: generadas primariamente
de una mutación de la línea germinal, afectando a todos
los tejidos, incluyendo el tejido reproductivo. Desde ese
punto el alelo mutado se puede heredar a la progenie.
Anemia falciforme: es una enfermedad autosómica
recesiva; mutación de Glu6Val del gen de la beta
globina (HBB), que forma parte de la hemoglobina
(11p15.4)
La mutación genera hemoglobina S, que forma cadenas
o filamentos de hemoglobina, en lugar del tetrámero
normal, reformando los glóbulos rojos en condiciones
de bajo nivel de oxígeno.
los eritrocitos adoptan una forma de media luna (hoz),
bloqueando el flujo sanguíneo, causando fatiga, anemia
(vida corta de los glóbulos rojos), retraso en el
crecimiento, hipertensión pulmonar y enfermedades
cardiacas, entre otros síntomas.
esta mutación, sin embargo, ofrece una protección
contra la malaria, confiriendo a los heterocigotos una
cierta ventaja evolutiva como ya que el parásito
(plasmodium falciparum) tiene dificultad para
reproducirse dentro de eritrocitos falciformes. hasta el
40% de la población de África ecuatorial es portadora
del gen mutado (presión selectiva del patógeno).
Hemofilia
es una enfermedad recesiva ligada al cromosoma x;
mutación del gen f8 (factor de coagulación VIII; tipo A) o
al gen f9 (factor de coagulación IX; tipo B)
frecuencia en varones:
hemofilia A: 1 en 4000-5000
hemofilia B: 1 en 20000
deficiencia en la coagulación, heridas que no sanan,
peligro de desangramiento.
las mujeres heterocigotas son portadoras
asintomáticas.
los varones tienen un solo gen (un solo cromosoma x)
por lo tanto los que heredan el alelo defectuoso
presentan la enfermedad siempre.
mujeres homocigotas casi inexistentes ya que no
sobreviven en la pubertad.
Fibrosis quística
es una enfermedad autosómica recesiva; mutación del
gen CFTR (Cystic fibrosis transmembrane conductance
regulator), un canal de cloruro (Cl-) (7q31.2). la
mutación más frecuente 76% es ΔPhe508 (deleción de 3
bases que codifican para una fenilalanina)
afecta principalmente los pulmones, el páncreas, el
hígado, los intestinos, los senos paranasales y los
órganos sexuales. la fibrosis quística hace que el moco
sea espeso y pegajoso. el moco tapona los pulmones,
causando problemas respiratorios y facilitando el
crecimiento bacteriano. eso puede conducir a
problemas como infecciones pulmonares repetidas y
daño pulmonar.
Frecuencia: 1 de cada 2500-3500 caucásicos; 1 de cada
17000 afroamericanos; 1 de cada 31000 asiáticos.
expectativas de vida= 37 años
distrofia muscular de Duchenne
es una enfermedad recesiva que está ligada al
cromosoma x; causada por mutaciones en el gen DMD
(distrofina), una proteína muscular que conecta con el
sitio esqueleto de actina de la célula muscular con la
matriz extracelular, ofreciendo estabilidad y protección
a la célula. sin distrofina, las células se van dañando con
las sucesivas contracciones.
afecta 1 de cada 3500-5000 varones, las mujeres son
asintomáticas en la mayoría de los casos.
debilitamiento progresivo del músculo esquelético y
cardiaco, derivando en inmovilidad y cardiomiopatía en
la adolescencia. la expectativa de vida es hasta los 20
años.
Corea de Huntington o enfermedad de Huntington
Es una enfermedad autosómica dominante, mutación
del gen HTT (Huntingtina) (4p16.3) de función
desconocida pero importante para las Funciones
cerebral.
frecuencia 3 a 7 por cada 100000 personas de
ascendencia europea
problemas de coordinación muscular, movimientos
involuntarios (Corea), dificultades para caminar, hablar,
tragar, pérdida de capacidades cognitivas y ataques
epilépticos.
expectativa de vida: inicio en edad adulta de 15 a 20
años después del comienzo de los síntomas. inicio
juvenil entre 10 a 15 años.
la mutación consiste en una expansión de tripletes CAG,
que codifica para glutamina. el gen normal tiene de 10 a
35 repeticiones: la expansión puede ir desde 36 a más
de 120. personas con 36 a 39 repeticiones pueden
desarrollar síntomas o no y más de 40 desarrollan
síntomas siempre.
bases moleculares del cáncer
grupo de enfermedades cuya característica común es la
proliferación descontrolada. Es la segunda causa de
muerte a nivel mundial, y es causado por mutaciones
que liberan a las células de los controles normales de
proliferación. por lo tanto los cánceres son
enfermedades genéticas pero en pocos casos
hereditarias. es de alta complejidad celular y genética,
multifactorial. tiene múltiples causas, ambientales
genéticas o epigenéticas, con componente hereditario
y/o adquirido. La mayoría de las mutaciones son
adquiridas y no heredadas (mutaciones somáticas). te
origina en un sitio y desarrolla la capacidad de alterar y
dañar el tejido normal que lo rodea. en etapas
avanzadas se desarrolla metástasis, la invasión y
colonización de otros tejidos, lo que provoca la muerte
en la mayoría de los casos.
factores de riesgo para el cáncer
- edad (1/4 de los casos aparece entre los 65 y 74
años)
- alcohol
- sustancias químicas carcinógenas (asbesto,
arsénico, formaldehído, humo de tabaco)
- inflamación crónica (esófago de Barrett,
enfermedad de Crohn)
- dieta
- hormonas
- inmunosupresión
- agentes infecciosos (VPH, VHB, VHC, H. pylori)
- obesidad
- radiación (rayos x, gamma, UV)
- tabaquismo
- herencia (BRCA-1 o 2, p53: síndrome de
Li- Fraumeni) -> solo 5 - 10% de influencia
Teoría de la evolución clonal del cáncer
Las sucesivas mutaciones dan origen a poblaciones
celulares que son genéticamente diferentes entre sí:
heterogeneidad del cáncer
Algunas células se acumularán suficientes mutaciones
que le permitirán abandonar el tumor primario y
colonizar otros tejidos: metástasis
principales alteraciones genéticas del cáncer:
proto oncogenes y supresores de tumores
pro-oncogén= acelerador de proliferación
supresor de tumores= freno de proliferación
mutación de un oncogén= acelerador “pegado”
mutación de un supresor de tumores= frenos
defectuosos
mutaciones sobreactivadora o ganancia de función:
mutación permite a la angustia promover la
transformación celular
mutación de un alelo de un protooncogén y aparición
de un oncogén ->
mutación subactivadora o perdida de función:
mutación de ambos alelos del gen supresor de tumores
promueve la transformación celular
- primera mutación: inactivación de un alelo de un
supresor de tumores
- segunda mutación: mutación de ambos alelos de un
supresor de tumores
Ejemplo de proto-oncógenes: Los factores que
promueven la progresión del ciclo celular, estos hacen
que se active la replicación, es como la gasolina del auto
(hace que parta)
predisposición hereditaria a desarrollar cáncer
la mayoría de los cánceres son esporádicos, esto quiere
decir que son adquiridos por mutaciones somáticas.
sólo en 5 a 10% se puede atribuir a factores
hereditarios
estos cánceres hereditarios son mayoritariamente por
mutaciones hereditarias de genes supresores de
tumores ya que los oncogenes casi nunca son
hereditarios

El p 53 es el principal sucesor de tumores.
cuando aparece daño en el DNA la p53 detiene el ciclo
celular mientras la célula intenta reparar el daño.
Si no es reparado, la célula muere o entra en
senescencia.
Síndrome de Li-Fraumeni
Es una enfermedad autosómica dominante. mutación
heredada en uno de los alelos del gen TP53 que codifica
para la proteína p53 (17p13.1)
Aumenta la probabilidad de desarrollar cáncer a edad
temprana (infancia, adultez, joven) principalmente
cáncer de mama, leucemias, glándulas suprarrenales,
sarcomas.
Su frecuencia es de 1 por cada 5000 a 20000 personas
El reingreso al ciclo (G0->G1) está regulado por el factor
de transcripción E2F y el supresor de tumores “proteína
del retinoblastoma (Rb)”
Célula en G0 -> Proteína Rb activa y E2F inactiva
- E2F se encuentra “secuestrada-2 por Rb, lo cual
le impide activar la transcripción
Célula en proliferación -> proteína Rb inactiva y E2F
activa, hay transcripción
- Cuando Rb es fosforilada, por
CDK3/ciclina C, E2F es liberada y activa la
transcripción de genes que permiten reingresar
a la fase G1.
Retinoblastoma
es una enfermedad autosómica dominante. mutación
en uno de los alelos del gen RB1, que codifica para la
proteína Rb (13q14.2). 1/3 de los casos es hereditario
tumor en la retina de un ojo o ambos ojos, comienzo en
la infancia temprana (5 años) .
frecuencia 1 por cada 250 a 350 niños
síntomas: leucocoria (reflejo de ojo de gato),
estrabismo, cambio en el color del iris, seguirá en el ojo
afectado.
Técnicas de biología molecular:
tecnología del DNA recombinante
DNA recombinante: fusión de 2 o más secuencias de
dna de orígenes diferentes (por ejemplo: dna humano +
dna de bacterias
ingeniería genética: disciplina que utiliza la tecnología
de dna recombinante para generar organismos
genéticamente modificados
organismos genéticamente modificados: organismo
cuyo material genético ha sido modificado
artificialmente: organismos transgénicos y organismos
knock out.
organismos transgénicos: organismo al cual se le ha
insertado una secuencia adicional de dna ya sea foráneo
o propio
organismo knock out: organismo al cual se le ha
removido una secuencia de DNA
terapia génica: introducción de ácidos nucleicos a
células para corregir una alteración genética o
epigenética
DNA recombinante:
la enzima de restricción corta una parte del plasmidio
cerrado Y lo abre en este espacio inserta la secuencia de
interés y la pega con DNA ligasa
Fragmentación de DNA: enzima de restricción
son enzimas que cortan en secuencias específicas de
dna de doble hebra, son producidos por bacterias y
sirven de mecanismo de defensa contra infecciones
virales, una especie de sistema inmunológico bacteriano
la mayoría posee sitios de corte de secuencias
palindrómica de dna que se leen igual para ambos lados

Los extremos complementarios son pegajosos por lo
que el ADN ligasa une el esqueleto azúcar fosfato
Tecnología del PCR
reacción en cadena de la polimerasa
Utiliza DNA polimerasa proveniente de
microorganismos termófilos que viven a altas
temperaturas por ejemplo Géiseres
en cada siglo se duplica la cantidad de copias de la
secuencia de interés.
1 paso: denaturación
alta temperatura (94-98°C) para separar las 2 hebras
del DNA templado
2 paso: hibridación
temperaturas más bajas (típicamente 40-60°C) para
permitir la hibridación de los partidores o primers en
ambos extremos de la secuencia de interés.
3 paso: extensión
DNA polimerasa termoestable polimeriza
desoxirribonucleótidos desde los partidores a la
temperatura óptima de la enzima (alrededor de los
72°C)
Ejemplos:
Si Ud comienza una reacción de PCR con 10 copias de la
secuencia a amplificar ¿cuantas copias habrá obtenido
al final del ciclo 5?
Si Ud comienza una reacción de PCR con 4 copias de la
secuencia a amplificar ¿cuantas copias habrá obtenido
al final del ciclo 6?
Si Ud comienza una reacción de PCR con 100 copias de
la secuencia a amplificar ¿cuantas copias habrá
obtenido al final del ciclo 3?
PCR en tiempo real o qPCR (quantitative PCR)
Aplicación analítica-diagnóstica (ejemplo: carga viral de
virus DNA)
se utiliza un termociclador especial, conectado a un
computador, que permite la cuantificación relativa de la
cantidad de DNA amplificado de cada ciclo
la mezcla de reacción contiene un marcador
fluorescente (SYBR green) que se incorpora al DNA de
doble hebra amplificado y que es detectado por la
máquina
Generación de un inserto de dna a partir de un rna
transcripción reversa acoplada a pcr
1. copia de DNA a RNA complementario (cDNA):
Transcripción inversa o reversa llevada a cabo por la
transcriptasa reversa de origen viral
2. amplificación de cDNA por PCR: se usan partidores
que contienen sitios de restricciones en sus extremos.
Transcripción reversa rt acoplada a PCR en tiempo real
(RT-qPCR)
Aplicación analítica- diagnóstica
 se utiliza para cuantificar los niveles de un rna
específico
por ejemplo:
para medir los niveles de expresión de mRNA de una
proteína específica
en diagnóstico molecular, para medir los niveles de un
virus o carga viral que tenga un genoma de ARN
(coronavirus o VIH)
Ámbito de aplicación de la biología molecular y la
ingeniería genética
OGMs en biotecnologia: arroz dorado
OGMs en medicina:
- bacteria transgénica productora de insulina
recombinante
- vacuna recombinante adreno viral contra covid-19
Terapia génica
introducción de ácidos nucleicos a células para corregir
una alteración genética o epigenética
sus objetivos son reemplazar genes defectuosos y
cambiar los niveles de expresión de genes
las estrategias terapéuticas son introducción de un gen
directamente al paciente in vivo, introducción ex vivo
de un gen a célula de un paciente Y administración in
vivo de ácidos nucleicos pequeños.
terapia génica ex vivo
es aplicable en células que pueden ser extraídas del
paciente y cultivadas en el laboratorio, tales como
células troncales de la médula ósea, linfocitos y células
dentríticas
ejemplos: strimveliz: para tratar la inmunodeficiencia
combinada severa, debida a una mutación en el gen de
la adenosina desaminasa (ADA) (ADA-SCID). es una
enfermedad genética ligada al cromosoma X. por lo
tanto sólo afecta a hombres (uno en 50000). se extrae
médula ósea y se transforman con un virus que
contiene el gen ADA correcto; las células se inyectan
devuelta al paciente. aprobado en la ue en 2016
Yescarta: para tratar linfoma de células B. inserción viral
de un gen que codifica para receptores quimericos para
antígenos, el linfocitos T (terapia CAR-T): al reintroducir
las células al paciente, los linfocitos t puede matar a las
células tumorales en la sangre. aprobado por la fda en
2017 y por la ue en 2018.
Zynteglo: para tratar beta talasemia, enfermedad
genética provocada por una mutación en el gen de la
beta globina (parte de la hemoglobina). el gen correcto
se introduce mediante un vector viral a las células
troncales de la médula ósea y se inyectan devuelta al
paciente (las células se van automáticamente devuelta a
la médula). aprobada por la ue en 2017.
terapia génica in vivo
administración de cta del gen terapéutico del paciente.
Para tipos celulares que no pueden ser cultivadas y
reinsertadas
vectores virales y no virales
Ejemplos:
Lexturna: para tratar una forma de amaurosis congénita
de leber, seguirá producida por una mutación del gen
RPE65, se codifica para una enzima que genera un
pigmento en la vía de señalización de la fotoconvención
(traducción de estímulos lumínicos en imágenes).
el gen correcto en un vector viral se inyecta en la retina.
aprobado por la fda en 2017.
Zolgensma: para tratar atrofia muscular espinal el niños
menores de 2 años de edad. causada por una mutación
hereditaria en el gen SMN, afecta la función de las
neuronas motoras.
el virus que contiene el gen correcto es inyectado por la
vía endovenosa o directamente a la médula espinal por
dosis única. aprobado por la fda en 2019
Imlygic: Para tratar melanoma cutáneo recurrente. la
droga consiste en un vector viral (HS1) contiene el gen
de la GM-CSF; es inyectado directamente dentro de
tumores para estimular la respuesta inmune en contra
de las células tumorales. aprobada en China 2005,
Estados Unidos (FDA, 2015) y la ue en 2015
terapia génica in vivo para fibrosis quística
(experimental)
el objetivo es llevar el gen correcto CFTR a las células
alveolares mediante un virus, por vía de nebulización humano (21%) SINES (short interpsersed elements):
aérea. secuencias de 200 a 300 pb como secuencias Alu en
humanos, con 1.200.000 copias por genoma (14%)
siRNAs aprobados para terapia

Onpattro: para tratar la amiloidosis hereditaria mediada

por transtiretina (hATTR), Una polineuropatía de los
nervios periféricos provocada por acumulación de
transtiretina. se administra el siRNA encapsulado en una
nanopartícula lipídica (liposoma) por infusión en el
hígado. aprobado por la fda en 2018

Givlaari: para tratar porfiria hepática aguda. causado

por acumulación de la enzima ácido aminolevulínico
sintetasa (ALAS1). se administra en forma subcutánea.
aprobado por la ue en 2019.

oligonucleótidos antisentido (ASOs) aprobados para

terapia
los ASOs son moléculas de DNA debra simple, se
sintetizan con modificaciones químicas en su esqueleto
azúcar fosfato o en sus bases para aumentar su
estabilidad en la sangre y la capacidad de ser absorbidos
por las células. administran desnudos o acoplados a
alguna nanopartículas lipídicas no lipídica
Fomiversen: tratamiento de retinitis causada por
citomegalovirus. Aprobado por la FDA en 1998.
Mipomersen: Tratamiento de hipercolesterolemia
familiar. Aprobado por la FDA en 2013.
Nusinersen: Tratamiento de atrofia medular espinal.
Aprobado por la FDA en 2016.
Eteplirsen: Tratamiento de distrofia muscular de
Duchenne. Aprobado por la FDA en 2016.
Mipomersen: Tratamiento de hipercolesterolemia
familiar. Aprobado por la FDA en 2013.

Secuencias altamente repetidas Repeticiones en Utilización de un marcador ligado a una enfermedad

tandem de número variable
DNA satélite: DNA centromérico, alto contenido A/T ,
DNA alfoide de 170pb
DNA minisatélite: Unidades repetidas de 15 a 100 pb,
normalmente de 25pb, que forman complejos de hasta
20 kb de extensión (LTR)
DNA microsatélite Unidades de repetición de no mas de
13 pb y 150 pb de extensión (STR) Lo más frecuente son
repetidos de dinucleótidos con alrededor de 140.000
copias en todo el genoma, normalmente CA.
Repeticiones Dispersas Secuencias transpuestas
(transposones) LINES (long interpsersed elements): 1 a 5
kb presentes en 20.000 a 40.000 copias por genoma
uso de RFLP:
- se dispone de marcadores RFLP de los 24 cromosomas
humanos diferentes.
- son más útiles aquellos los que la mayoría de los
miembros de la familia son heterocigotos
- El análisis se hace por ensayo y error usando varios
RFLP
- Si un RFLP y el gen para una cierta enfermedad
genética están en el mismo cromosoma mostrarán
ligamiento
- Se debe analizar la probabilidad de que el patrón de
herencia observado sea al azar
Logaritmo de las probabilidades o puntuación lod:
Probabilidad de no ligamiento/ probabilidad de
ligamiento Un valor de lod score de 3 o más es prueba
de que el marcador RFLP y el gen están ligados

F y H : siempre juntos……¿ligados?
A y B: en hijos uno o el otro….¿alelos?
A y D: no hay patrón………..¿no ligados?
I y C : siempre en afectados……¿ligados a P?

Gen de Neurofibromatosis de tipo 1 (NF1), autosómico

dominante (1/3.000), por RFLP se ubicó en cromosoma
17 cercano al centrómero, estudios posteriores
localizaron el locus en 17q11.2, se identificó el gen, se
secuencio y se determinó que codifica para una
proteína implicada en la transducción de señales con
regulación negativa sobre un gen que controla el
crecimiento celular

Síndrome de Marfan, autosómica recesiva (1/10.000)

posible candidato gen de fibrilina, ubicado por FISH en
el cromosoma 15, luego se encontró ligamiento con
RFLP de cromosoma 15, finalmente se encontró una
mutación en los afectados
 El análisis puede
realizarse en cantidades
muy pequeñas de tejido y
en muestras antiguas Se
analizan utilizando la
estadística, la
probabilidad y la genética
de poblaciones
(frecuencia combinada:
cuan a menudo la huella
molecular de DNA podría
observarse en la
población general) La
utilización de diversas
sondas de STRs aumenta la exactitud de la frecuencia
combinada Locus 1: 1/333 Locus 2: 1/83 Frecuencia
combinada: 1/28.000 Locus 3: 1/100 Locus 4: 1/25
Frecuencia combinada: 1/70 millones
DIAGNÓSTICO Y RASTREO DE ENFERMEDADES
GENÉTICAS

Rastreo: Uso de marcadores asociados, como los RFLP o

microsatélites, análisis poblacional de SNPs

Detección: presencia de una mutación (deleción,

duplicación, sustitución de bases) Ej. Mutación puntual
en gen BRAC1 para cáncer de mama Ej. Sustitución de
bases que hace aparecer o desaparecer un sitio de
reconocimiento para una enzima de restricción

Diagnóstico prenatal:
Amniocentesis (Muestra de fluido amniotico que
contiene células del feto)
Extracción de vellosidades coriónicas (Mediante un
catéter en el útero se toma una muestra de tejido del
corion fetal)
No Invasivo (Muestra de sangre materna, contiene 3-6%
de DNA fetal)