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Los vegetales que contienen saponinas se han utilizado ampliamente alrededor del mundo por sus propiedades detergentes. Este tipo de
vegetales contiene un alto porcentaje de heterósidos llamados saponinas (del latín sapo que significa jabón), que se caracterizan por sus
propiedades de producir espuma en soluciones acuosas.
Además de sus propiedades detergentes, también poseen propiedades hemolíticas, si se inyectan en el torrente sanguíneo. No todas las
plantas que contienen propiedades hemolíticas contienen saponinas.
Las saponinas tienen un elevado peso molecular y su aislamiento en estado puro ofrece ciertas dificultades. Como heterósidos que son, se
hidrolizan con ácidos, dando una genina (sapogenina) y diversos azúcares y ácidos urónicos relacionados.
Según la estructura de la sapogenina se conocen dos grupos:
● Las de tipo esteroidal, terpenoides tetracíclicos.
● Triterpenas pentacíclicos, con enlaces heterosídicos en el C3 que tienen un origen biogenético común (vía del ácido mevalónico y unidades
isoprenoides).
OBJETIVOS:
• Determinar la presencia de taninos en diferentes extractos de plantas.
EQUIPOS: MATERIALES E INSUMOS:
• Tubos de ensayo,
• varilla de vidrio,
• cápsula de porcelana,
• vasos de precipitación
• plato calefactor o parilla eléctrica, • papel filtro.
• estufa de secado • Pinzas para tubo de ensayo
• Erlenmeyer de 100 mL
• 1 pipeta graduada de 2 y de 5 mL
• gradilla para tubos de ensayo
• pinzas para tubos de ensayo
REACTIVOS: MUESTRAS / OTROS:
• Agua destilada,
• gelatina sin sabor 1%,
• cloruro férrico (FeCl3),
• NaCl 10% • Vegetal (verbena, alfalfa y eucalipto)
• Etanol o metanol
• Clorformo o acetato de etilo
• Éter
• Hexano
• Peróxido de hidrógeno
• alfa naftol 1% en etanol Reactivo de Molisch
• ácido sulfúrico concentrado
PRECAUCIONES / INSTRUCCIONES:
• Utilizar mandil y guantes.
• Mantener el área de trabajo limpio y ordenado.
• Manejar cuidadosamente los materiales de laboratorio.
• No utilizar ninguna herramienta o equipo del laboratorio en caso de desconocer su funcionamiento.
PROCEDIMIENTO / ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
TANINOS
1. El primer extracto triplicar el vaor de la preparación para realizar este ensayo. Evaporar extracto equivalente a 10 g del material vegetal
hasta secarlo en baño María. Etiquetar de la siguiente manera: Nombre de Científico y Familia de la planta asignada:
2. Al residuo añadir 10 mL de agua destilada caliente. Agitar bien con la varilla de vidrio y dejar enfriar a temperatura ambiente.
3. Añadir de 3 a 4 gotas de NaCl al 10% para salar y precipitar cualquier compuesto no tanino y así evitar resultados positivos falsos.
4. Filtrar la solución resultante al vacío y dividir el filtrado en cuatro tubos de ensayo.
Al tubo No.1: Añadir de 4 a 5 gotas de solución de gelatina al 1%, la formación de un precipitado es indicativo de la presencia de taninos.
Al tubo No.2: Añadir de 4 a 5 gotas del reactivo de gelatina + NaCl, la formación de un precipitado más abundante con respecto al primero
confirma la presencia de taninos.
Al tubo No.3: Añadir de 3 a 4 gotas de FeCl3. La aparición de colores negro a azul es indicativo de anillo de pirogalol, y grisáceo a negro es
indicativo de la presencia de catecol.
Al tubo No.4: Sirve de control y no se le agrega reactivo.
La ausencia de precipitado con gelatina y gelatina + NaCl y el desarrollo de colores obscuros con FeCl 3 es indicativa de compuestos fenólicos
no taninos.
SAPONINAS
a) Test afrosimétrico. Se coloca un poco de planta seca en un tubo, se adicional 5 mL de agua destilada, se calienta en baño maría a ebullición
2 min y se agita vigorosamente. Se valora la persistencia de la aparición de la espuma con cruces: 5-20min (+), 20-25 min (++), >30 min (+++).
b) Prueba del peróxido. En un tubo de ensayo colocar 3 gotas del extracto con 2 gotas de H2O2. Calentar ligeramente con agitación. La
presencia de espuma y su abundancia indica la presencia de saponinas
c) Prueba de Molisch. En un tubo de ensayo colocar 5mL del extracto con 2 gotas de solución de alfa naftol 1% en etanol. Adicionar
suavemente por las paredes 1.5mL de ácido sulfúrico concentrado. No agitar. La formación de un anillo violeta en la interfase es indicativa de
saponinas
RESULTADOS OBTENIDOS:
• Anote sus resultados
CONCLUSIONES:
• Anote sus conclusiones en base a sus resultados
RECOMENDACIONES:
• Coloque sus recomendaciones
FIRMAS
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Nombre: Dra. Sandra Naranjo Nombre: Ing. Mario Moreno Nombre: Dra. Sandra Naranjo
DOCENTE COORDINADOR ÁREA DE CONOCIMIENTO COORDINADOR/JEFE DE LABORATORIO