CÓDIGO: SGC.DI.

505
GUIA PARA LAS PRÁCTICAS DE VERSIÓN: 2.0
FECHA ULTIMA REVISIÓN:
LABORATORIO, TALLER O CAMPO. 12/04/2017

CIENCIAS DE LA VIDA Y LA
DEPARTAMENTO: CARRERA: AGROPECUARIA
AGRIGULTURA
PERíODO
ASIGNATURA: Biología Celular 201950 NIVEL: 1
LECTIVO:
DOCENTE: Carlos Noceda NRC: 5025, 5045 PRÁCTICA N°: 13
LABORATORIO DONDE SE DESARROLLARÁ LA Microbiología-IASA
PRÁCTICA
TEMA DE LA
Extracción de ADN
PRÁCTICA:
INTRODUCCIÓN:
La extracción de ADN comienza con la lisis de las células con un detergente, de modo que los componentes del interior
del citoplasma y el núcleo, incluyendo los cromosomas, quedan liberados a un tampón. Las proteínas asociadas al ADN,
como las histonas de los cromosomas, se separa del mismo por acción del detergente. Los cationes del tampón
permiten la solubilidad del ADN (que posee cargas negativas). Para extraer el ADN de la mezcla resultante se utiliza
alcohol isoamílico.
OBJETIVOS:
Aprender un método de extracción de material genético
MATERIALES:
INSUMOS:
REACTIVOS:
. Batidora
• Agua destilada
• Nevera
• Sal de mesa
• Coladora
• Bicarbonato sódico
• Vaso
• Detergente líquido o shampoo
.Pipeta 10 mL
• Alcohol isoamílico a 0°
. Pera
EQUIPOS: Centrífuga
MUESTRA:
Fresas, tomates
INSTRUCCIONES:
1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes:
-120 ml de agua destilada
-1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
- 5 g de bicarbonato sódico.
- 5mL de detergente líquido o shampoo
2. Mantener el tampón a unos 4 ºC:
3. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN
4. Triturar cubitos de muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10
segundos.
5. Mezclar en un recipiente limpio 5 mL del triturado con 10 mL del tampón frío
6. Agitar vigorosamente durante al menos 2 min
7. Separar los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino
posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
8. Retirar 5 mL del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 mL de alcohol isoamílico enfriado a
0º C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El
alcohol quedará flotando sobre el tampón.
9. Introducir la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón.
Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño
de ADN.
10. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su
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FECHA ULTIMA REVISIÓN:
LABORATORIO, TALLER O CAMPO. 12/04/2017

extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.

- Representar un esquema de los resultados, y fotos

RESULTADOS OBTENIDOS:
- Indicar lo obtenido
CONCLUSIONES:
Mediante el procedimiento se puede obtener ADN de células vegetales
RECOMENDACIONES:
 Tomar fotografías del proceso para tener evidencias.
 Portar siempre el mandil cerrado.
 Usar guantes para manipular las muestras y/o colorantes.
 Usar correctamente los recipientes de desecho común e infeccioso.
 Lavar el material utilizado con detergente.
 Limpiar los mesones y los alrededores del área de trabajo.
BIBLIOGRAFÍA:
Prácticas de Laboratorio biología , por Ma. Teresa Montoya del Hoyo. Modificado en enero de 2007 por: María Guadalupe
Castorena Esparza,. Mayra Janeth Esparza Araiza
FIRMAS

Nombre: Carlos Noceda Nombre: Jakeline Torres Nombre: Carlos Chiriboga

COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR/JEFE DE LABORATORIO
DOCENTE CONOCIMIENTO