TEMA 1: LABORATORIO BIOLOGÍA MOLECULAR Y

CITOGENETICA

1BiologIA MOLECULAR Y CITOGENETICA

La biología molecular es la parte de la biología que estudia la composición, estructura y función de
las moléculas biológicamente importantes. Engloba principalmente el estudio de ácidos nucleicos y
proteínas.

Biología molecular-Ácidos nucleicos

Estudio de las proteínas-Laboratorio de proteómica.

La citogenética es la parte de la genética que estudia la estructura, función y comportamiento de

los cromosomas en metafase.

En ambos laboratorios se van a realizar técnicas de alta complejidad, que requieren un

equipamiento especializado y costoso y con un problema en común, la contaminación.

Encontramos dos áreas zonas sucias y zonas limpias entre las que no se pude cruzar materiales para
intentar minimizar el riesgo de contaminación.

2 EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR

La técnica básica que se lleva a cabo es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), técnica
mediante la cual se puede amplificar(copias) una muestra de ADN. En una PCR no se amplifica el
ADN entero, solo un fragmento, la polimerasa va a copiar la parte que le índique una molécula. Se
realiza en un termociclador (se pueden procesar 90 muestras) y se suele programar entre 30 y 40
ciclos.

Para empezar la PCR tiene que separarse las dos cadenas para que la polimerasa pueda comenzar
su trabajo y eso se hace variando la temperatura.

Necesitamos para la PCR: Cebador o primer, ADN, nucleótidos y la polimerasa.

Etapas de la PCR:

 CICLO 1
Desnaturalización 95ºC; anillamiento 55-65ºC; elongación 72ºC
 CICLO 2 (se sintetizan 4 nuevas cadenas)
Desnaturalización 95ºC; anillamiento 55-65ºC; Elongación 72ºC

(Dos ciclos y no hay fragmento que se quiere amplificar, ya que todas las cadenas tienen restos de la
cadena principal)

 CICLO 3 (8 moléculas de las cuales 2 son la copia del gen que queríamos amplificar)
Desnaturalización 95ºC; anillamiento 55-65ºC; elongación 72ºC
  CICLO 4 (Partimos de 8 moléculas y dos fragmentos que nos interesan y cuando terminen
contaremos con 16 moléculas y tendremos 8 copias de interés.)No se duplican ,crecen
exponencialmente.

Las copias de gen de interés se calcula haciendo 2 elevado a “n” , siendo n el número ciclos que
se realiza menos 2 por n (TODOS DEL MISMO TAMAÑO)

Las copias de longitud variable (fragmentos no deseados) son 2xn(MÁS GRANDES)

Todas las copias (con cola sin cola) 2 elevado n

Se separan en por tamaños mediante electroforesis

2.1 El equipamiento
Específico
Permite realizar técnicas exclusivas de este tipo de laboratorio. Equipamiento necesario para
realización PCR y análisis de los productos obtenidos.

EL TERMOCICLADOR (amplificar), EQUIPO DE ELCTROFORESIS (separar por tamaños), EL

DOCUMENTADOR DE GELES (visibilizar).

También forman parte los aparatos automáticos necesarios para los procesos específicos como son:

La extracción de ácido nucleicos

La secuenciación de los fragmentos que son objeto de estudio. Esta función la cumplen los aparatos
denominados secuenciadores.

Termociclador

Realiza secuencialmente un número elevado de ciclos repetitivos programables con temperaturas

diferentes y distintos tiempos de incubación, controlados por un microprocesador.

Partes del termociclador:

Bloque incubador: Soporte metálico con múltiples pocillos para colocar los tubos de reacción de
PCR .El rango de temperaturas esta entre 4 a 96ºC.

Los distintos modelos que existen se diferencian en la tecnología para calentar y enfriar el bloque:

 Sistemas de aire caliente y frio o resistencias eléctricas(utilizado en equipos antiguos)

 Materiales semiconductores en conjunción con el efecto Peltier.

Efecto Peltier: Efecto termoeléctrico que produce transferencia de calor entre 2 metales o
semiconductores distintos unidos por dos soldaduras cuando son atravesados por una corriente
eléctrica continua. Este efecto se usa en termocicladores para aumentar o bajar temperatura del
bloque rápidamente, invirtiendo la polaridad de la corriente continua que alimenta el circuito.

Tapa del bloque incubador termostizada a 102-105ºC

Evita evaporación del agua de la mezcla, de la reacción de PCR debido al efecto de las temperaturas
alcanzadas en el bloque incubador y que se condense en la tapa (concentración de los reactivos de
la mezcla que alteraría el desarrollo de la reacción)

Termociclador a tiempo real

Contiene los mismos componentes, pero incorporan un sistema de láser y detección de

fluorescencia capaz de excitar y medir la fluorescencia emitida por cada tubo y detectar la síntesis
de productos de reacción en tiempo real.

El equipo de electroforesis

ELECTROFORESIS

Este proceso sirve para separar moléculas de ácidos nucleicos de distintos tamaños y permite
analizar los productos amplificados en una PCR o purificar y obtener fragmentos de tamaño
concretos de ADN.

Se lleva a cabo aplicando un campo eléctrico, en una disolución tampón en la que se sumerge una
matriz que contiene las muestras de ácidos nucleicos, migran con más o menos velocidad a través
de la matriz en función de la carga neta que poseen.

La matriz que se utiliza es un gel de agarosa o de poliacrilamida (el uso de los geles y la
concentración depende del tamaño de las moléculas que queremos separar)

Agarosa permite electroforesis rápidas de resolución limitada. A mayor % de agarosa separamos

moléculas más pequeñas.

Poliacrilamida separan moléculas de menor tamaño con mayor poder resolución.

Para poder visualizar los resultados hay que añadir un agente intercalante; el bromuro de etidio, un
agente cancerígeno,que se intercala entre las hebras de ADN

Cubeta de electroforesis contiene:

 Un soporte central para la cama con el gel

 Dos zonas de depósito de tampón de electroforesis en cada uno de los extremos
 Electrodos positivo y negativo en cada extremo.
Cama de gel o soporte de plástico para solidificar el gel, y que contiene un peine para poder formar
los pocillos y por la que se puedan desplazar las moléculas

Fuente de alimentación a la que se conectan los electrodos, permite seleccionar el voltaje y la

intensidad.

Procedimiento

1º Añadir una solución tampón (MANTIENE CONSTATE EL PH) TAE1%: Tris base, ác.Acético y EDTA
(ácido etilendiaminotetraacerico,agente quelante) (pH 7,5-7,8)

2º Sumergir la matriz preparada previamente en gel agarosa o poliacrilamida.

3º Cargar las muestras en los pocillos del gel.

4º Aplicar un campo eléctrico.

5º Ácidos nucleicos migraran con mayor o menor velocidad a través del gel en función de:carga neta
que posean tamaño y conformación tridimensional.

Las moléculas más pequeñas migrarán más rápido que las grandes y por tanto aparecerán en la
parte inferior del gel, mientras que las de mayor tamaño quedan en la parte superior.

Documentador de geles

Visualizar las bandas de ácidos nucleicos en el gel después de la electroforesis y obtener una
fotografía de él.

Equipo consta del

 Transiluminador: Fuente de luz UV, situada debajo de una superficie transparente al UV

donde se coloca el gel. Cuando la luz UV ilumina el gel, el agente intercalante emite
fluorescencia, visualizándose las bandas correspondientes a las moléculas de ácidos
nucleicos.
 Cámara fotográfica el gel se visualiza a través de la cámara adecuada para trabajar con luz
UV y controlada por un software específico. Con esta cámara se puede visualizar el gel en la
pantalla de un monitor.
Genérico

 Cabina de bioseguridad
 Sistema de purificación de agua
 Espectrofotómetro
 Microscopio de luz transmitida y fluorescencia
 Autoclave
 Incubador o estufa
 Baño termostático, termobloque y placa calefactora
 Centrífuga y microcentrífuga
 Neveras y congeladores
 Otros equipamientos

 Cabina de bioseguridad Cabinas de flujo laminar vertical de clase II. Protegen de la

contaminación a la muestra, a la persona que lo manipula y al medio ambiente. Importante
 cuando se trabaja con ARN (extracción y purificación de ARN…), las ARNasas son
omnipresentes y pueden degradar el ARN de una muestra; también imprescindibles si se
trabaja con cultivos celulares.0,3 micras los filtros que se utilizan, antes de utilizar una
cabina la desinfectamos, se desinfectan con etanol o lejía o con luz UV.
 Sistema de purificación de agua

Agua purificada de tipo II (agua destilada)

Recomendada para la mayoría de las pruebas analíticas y generales de laboratorio (análisis

hematológicos), preparada por destilación. Estar siempre libre de impurezas orgánicas

Agua ultrapura de tipo I

Procedimientos que requieren de máxima exactitud y precisión (enzimología soluciones buffer de

referencia), utilizan equipos de purificación basados en distintas tecnologías: electrodesionización,
resinas de intercambio iónico, ósmosis inversa, filtración.

 Espectrofotómetro La medida de la concentración y la pureza de ADN, requiere lectura

de absorción en un rango de 230-320 nm; existen espectrómetros específicos para
pequeñas cantidades de muestra(1µm) basados en cubetas capilares.
 Microscopio de luz transmitida y fluorescencia
Los microscopios de fluorescencia son importantes para las técnicas de hibridación in situ
fluorescente, deben de estar dotados con los filtros de fluorescencia adecuados para los
fluorocromos, se pueden visualizar cromosomas con coloración

 Autoclave: recipiente metálico de paredes gruesas con cierre hermético que permite
trabajar con vapor de agua, a alta presión y alta temperatura que sirve para esterilizar
material
 Incubador o estufa estas características dependen de las muestras que se estudien. Si se
trabajan con bacterias se necesitarán estufas de cultivo de microbiología. Si se trabaja con
cultivos celulares se requerirán incubadores con CO2 y humedad controlada.
 Baño termostático, termobloques y placa calefactora temperatura regulable es básico
para realizar todo tipo de incubaciones, digestiones y tratamientos enzimáticos.
 Centrífuga y microcentrífuga aparatos mediante los cuales separamos componentes
por densidades, permiten centrifugar tubos de 50 a eppendorf de 0,2 ml. (el rotor siempre
debe estar equilibrado)
 Neveras y congeladores de -20 y -80ºC, imprescindibles para conservación de
reactivos y muestras:
Reactivos y enzimas: -20ºC
Muestras de ARN y almacenamiento a largo plazo muestras de ADN -80ºC CONGELADAS
PREVIAMENTE EN NITRÓGENO LÍQUIDO.
Otros equipamientos: Balanzas, agitadores magnéticos, vórtex, pHmetro

2.2 ESTRUCTURA DEL LABORATORIO

La estructura está condicionada por la técnica de PCR

La realización de una PCR implica:

 Preparación de reactivos
 Extracción y purificación de ADN de una muestra biológica
 Reacción de PCR

Análisis de los productos de la reacción mediante electroforesis y documentación en gel

Cada fase de PCR se realizará en un área de trabajo independiente, separados físicamente, cada una
con su propio equipamiento y material de trabajo.

 Sala de preparación de reactivos

Se considera un área limpia sin ADN, en ella se preparan todos los reactivos que se van a utilizar en
el laboratorio.

Importante que no se contaminen los reactivos con ADN por lo que debería tener presión positiva
imprescindible que disponga de una cabina de bioseguridad.

 Sala de preparación de muestras y extracción de ADN

Es una sala sucia con ADN, lo que conviene que tenga presión negativa debe contar con una
cabina de bioseguridad y espectofotómetros.
 Sala PCR
Contiene termocicladores para realizar la PCR y un espacio de trabajo para añadir muestras
de ADN a la mezcla de reacción.
 Sala post-PCR
Dispone de equipos de electroforesis y documentación de geles. (Zona sucia) por lo que
también debería tener una presión negativa.
 Sala de cultivos celulares
Sala limpia. Sí no se adhieren se centrifugan y si se adhieren al medio de cultivo se vuelcan

 Sala de secuenciadores
Sala sucia

2.3 EL FLUJO DE TRABAJO

Marca el sentido único de los procesos en el circuito de trabajo.

En el laboratorio de biología molecular el flujo debe ser unidireccional, desde las áreas limpias hacia
las áreas sucias.

Pre-PCR PCR post-PCR

Salas autónomas y cada sala tiene su propio equipamiento: Micropipetas, EPIs, material fungible.

2.4 CONDICIONES DE TRABAJO

 Normas genéricas prohibido comer, fumar, maquillaje.
 Normas para la manipulación de materiales y reactivos en condiciones de esterilidad
TÉCNICA ASÉPTICA Conjunto de actividades encaminadas a prevenir la contaminación por
microorganismos, ácidos nucleicos y nucleasas
Contaminación de muestras
Contaminación: introducción accidental en la muestra de material exógeno que altera su
pureza.Causa resultados erróneos o no interpretables

Hay dos tipos de contaminantes:

 Ácidos nucleicos extraños a la muestra

 Las enzimas no deseadas que degradan ácidos nucleicos

Fuentes de contaminación

 Contaminación cruzada por

o Material no amplificado del medio ambiente o microorganismos ambientales como
los aerosoles generados durante la manipulación.
o Procedente del propio personal técnico, como la descamación de células de la piel.
o Contaminantes de las superficies de trabajo puesto que se acumulan.
 Contaminación por productos amplificados
Generados por PCR anteriores en el laboratorio(carryover)
 Contaminación de los reactivos comerciales y del material fungible

Debido a la esterilidad de los productos. El t6ermino estéril no significa ausencia de ADN o

nucleasas sino ausencia de microorganismos viables.

Normas para la manipulación de materiales y reactivos

Algunas de las medidas más importantes la separación de las áreas de trabajo y el flujo
unidireccional.

 Identificar fuentes contaminación para anularlas o prevenirlas

 Llevar control exhaustivo reactivos
 Controles negativos (y a veces, también positivos) en todas las técnicas
 Y buenos hábitos de trabajo en condiciones de esterilidad TÉCNICA ASÉPTICA.
Técnica aséptica
La técnica aséptica es un conjunto de actividades y hábitos encaminados a prevenir la
contaminación, ya sea por microorganismos, ácidos nucleicos, nucleasas… Destacan:

 Lavado frecuente de mano.

 Uso de EPI.
 Descontaminación física y química de superficies.
 Prevención de contaminación cruzada ambiental.
 Prevención de carry over.

Uso eficiente de recursos

Los laboratorios de biología molecular especializados tienen costes elevado, por eso las normas de
calidad estándar son imprescindibles, como las normas ISO.

Para que en un laboratorio se cumplan las normas de seguridad:

 Tener un plan de mantenimiento, para garantizar que los aparatos estén correctamente
calibrados, con revisiones periódicas. (equipamientos e infraestructuras).
 Asegurar la trazabilidad de los reactivos.
 Tener en RRHH un plan de formación y adiestramiento continuados.
 Tener técnicas de procedimientos estandarizados, mediante PNT (procedimientos
normalizados de trabajo): recepción de muestras, desarrollo, emisión resultados.
 Gestión ambiental: buenas prácticas, reducir consumo, garantizar el reciclado.
3 EL LABORATORIO DE CITOGENETICA Y CULTIVOS CELULARES

Laboratorio de cultivos celulares: Objetivo es propagación o crecimiento de células eucariotas de

organismos pluricelulares en medios de cultivo artificiales en condiciones controladas.

Lab de citogenética Estudia cromosomas de especies eucariotas, con perspectiva

morfológica(cariotipo)y molecular (citogenética molecular). (Metafase pasa ADN a cromosoma). Se
considera una ampliación especializada del lab. de cultivos celulares.

3.1.1 Para cultivos celulares

Cabina de flujo laminar

Se usan en procesos y manipulación de cultivos celulares, como siembra de cultivos celulares, o

cambios de medio. Se suele usar cabinas de tipo II, que tienen dos filtro HEPA (particula >0,2µm).
Previenen la contaminación del cultivo, del trabajador y del medio.

Consta de los siguientes elementos:

 Un panel frontal transparente para mantener la estabilidad del flujo laminar

 Una rejilla frontal que genera corriente e impide el escape de posibles contaminantes
 Sistema mecánico que impulsa el aire entrante y el aire recircularizado hacia la parte superior de la
cabina
 Dos filtros HEPA

Incubador de CO2

Proporciona las condiciones ambientales óptimas para el crecimiento celular en el medio de cultivo.

Elementos:

 Control de Tª: fija y mantiene estable, para cada tipo de cultivo una temperatura optima
 Recirculación del aire interior: homogeneizar la temperatura.
 Control CO2: mezcla el CO2 puro en botella presurizadas con aire en proporción 4-7% inyectándolo
en interior incubador.
 Control de humedad: inyecta H2O estéril. Cuando la humedad sube evitamos la evaporación del
medio de cultivo.

Microscopio invertido
Permite controlar el crecimiento del cultivo. La fuente de luz está encima de la platina y los objetos
debajo. Consta con un sist. de contraste de fases, para facilitar la visión de células en crecimiento sin
tinción. (Control diario resiembra cada semana).

Equipo de criogenia

Conservar a largo plazo y de forma variable muestras de células y cultivos celulares, formad por
depósitos de nitrógeno líquido.(-195,8ºC).

3.1.2 Para citogenética:

 Equipo de análisis de imagen nos permite documentar y analizar las metafases para
obtener los cariotipos. Para esto necesitamos:
 Microscopio óptico convencional de luz transmitida: visualizar metafases con
técnicas de bandeo.
 Cámara digital para obtener imágenes de metafase para análisis posteriores
 Software específico: análisis de metafase cromosoma a cromosoma. permitiendo
su reconocimiento (patrón de bandas) y su emparejamiento para obtener el
cariotipo.
 Microscopio óptico convencional y de fluorescencia se utiliza para los recuentos
celulares, estudios de visibilidad y morfología celular, visualización de preparaciones de
hibridación in situ fluorescente.

3.1.3 Común a ambos laboratorios

Equipo de esterilización imprescindible para todos los materiales y reactivos que estén en contacto
con los cultivos, que son la autoclave (esterilizar(no hay microoganismo) todo tipo de material) y un
sistema de filtración.

Sistema de purificación del agua esta agua tiene que ser ultrapura estéril y libre de pirógenos.

Nevera y congeladores de -20ºC y -80ºC

Otros equipamientos: centrífugas con rotores apropiados, placas calefactoras (hibridación in situ),
pHmetro, balanza, agitador magnético, pipeteadores automáticos.

3.2 La estructura del laboratorio

La estructura del laboratorio está condicionada, para la prevención de contaminación, separando las
zonas limpias y sucias. Un laboratorio de citogenética tiene mínimo tres salas:

 Sala de cultivos: (Zona limpia) se van a realizar todos los procedimientos directos con el
cultivo celular. Se encuentran las cabinas de flujo laminar, los incubadores y el microscopio
invertido
 Sala de laboratorio convencional: (Zona sucia) aquí no realizan procedimientos directos con
el cultivo, se encuentran todos los equipos menos el equipo de criogenia.
 Sala de frío: con congeladores y equipo de criogenia. Para conservar cultivos celulares
procesados.

3.3 Las condiciones de trabajo: Técnica aséptica.

Todas las manipulaciones deben hacerse en una cabina, para evitar la contaminación por
microorganismos. Dentro de la cabina:

1. Lavarse las manos continuamente.

2. Uso de guantes y batas desechables estéreles.
3. La puerta de la sala siempre cerrada.
4. Uso exclusivo de material y reactivos estériles.
5. No introducir mecheros bunsen.
6. Colocar en el interior de la cabina solo el material que se vaya a utilizar.
7. No sacar el material estéril del embalaje si no se va a utilizar.
8. Limpiar el material de vidrio reutilizable con hipoclorito 10%.
9. Desechar el material fungible en biocontenedores.
10. Acceso restringido, sólo personal del laboratorio.
11. Desinfectar con etanol 70% o desinfectante comercial, antes y después.
12. En las cabinas, encender la luz UV 30 min antes de empezar a trabajar.
13. Mantenimiento programado de la cabina y comprobación de los filtros HEPA. Como mínimo
se deben renovar una vez al año.
14. Puerta siempre cerrada.

4.Seguaridad de laboratorio
La seguridad de los laboratorios de biología molecular, citogenética y cultivos celulares, previenen la
exposición del personal a agentes nocivos e impedir la liberación de estos al exterior.

En función de la naturaleza de los agentes pueden ser:

 Bioseguridad: prevención de agentes patógenos y toxinas.

 Química prevención a los agentes químicos.

4.1 Bioseguridad
Engloba todas la técnicas, normas, prácticas y hábitos de trabajo que intentan evitar la exposición
accidental del personal a agentes biológicos potencialmente peligrosos, e impedir la liberación de
estos al exterior.

Cualquier muestra puede ser potencialmente peligrosa por lo que se deben de utilizar EPI.

El gran problema se plantea en el trabajo de microrganismos y con organismos modificados

genéticamente.

En los laboratorios de cultivos celulares y de citogenética como mínimo hay 2 niveles, pero hay 4
niveles, de menor a mayor peligrosidad.

Cualquier organismo modificado genéticamente tiene su propio reglamento, y conlleva un riesgo

biológico alto.

4.2 Seguridad química

Hay un reglamento que notifica sobre sustancia nuevas y clasificación, envasados y etiquetados de
sustancias peligrosas, encontramos 15 tipos sustancias peligrosas.

Una sustancia teratógena es aquella que puede influir en el desarrollo del feto.

Las buenas prácticas referidas a la seguridad química incluyen:

  Prevenir la exposición del personal a estas sustancias
 Almacenamiento seguro
 Gestión eficiente de residuos generados.

Estas medidas quedan basadas en la Ficha de Datos de Seguridad (FDS)que es específica para cada
producto: composición, manipulación, peligros, vías de exposición, efectos tóxicos, eliminación y
primeros auxilios.

Las medidas genéricas son:

 Uso adecuado de EPI.

 NO pipetear con la boca.
 Manipular productos volátiles en el interior de campanas de extracción.
 Manipular productos inflamables lejos de fuentes de calor y llamas.
 Correcto etiquetado de todos los envases que contengan agentes químicos.
 Almacenamiento de productos químicos en armarios adaptados a sus características de
peligrosidad.

Sustancias peligrosas que nos podemos encontrar

 Inflamables alcoholes
 Tóxicos y muy tóxicos acrilamida, azida sódica, bromuro de etidio
 Carcinógenos: acrilamida(grado2), DAB, formaldehído
 Mutágenos acrilamida, bromuro de etidio
 Teratógenos y/o perjudiciales para la fertilizad: acrilamida, formida, tetrametil, urea

4.3 EQUIPAMIENTO Y NORMAS DE SEGURIDAD

 Deben de ser las adecuadas para la minimizar y prevenir los riesgos
 Deben de disponer de instalaciones de emergencia señalizadas
 Estar dotados de EPI adecuados
 Tener instalaciones adecuadas para el almacenamiento de sustancias tóxicas y peligrosas
 Contenedores para la recogida selectiva
  Deben de disponer de kits para recogida de derrames de productos químicos y citotóxicos
 Contar con un manual de seguridad y un plan de gestión de residuos

El personal debe de seguir una serie de normas.

 Lavado frecuente de manos

 Uso de EPI
 Uso de ropa adecuada y abrochada Syrgreen
 Prohibido comer, fumar, beber y maquillarse
 Usar gafas de seguridad si se llevan lentillas
 Prohibido pipetear con la boca
 Recibir información adecuada sobre el manejo de aparatos
 Conocer el Plan de Gestión de Residuos y Manual de Seguridad

4.4 EL MANUAL DE SEGURIDAD

Es un documento de obligado conocimiento por TODO el personal, que recoge:

 Evaluación de riesgos inherentes a cada puesto de trabajo

 Descripción de normas y uso de equipamiento de seguridad
 Hábitos de trabajo apropiados para minimizar riesgos a exposición
 Normas de almacenamiento de productos químicos
 Normas de eliminación de desechos y gestión de residuos, incluido derrames
 Normas de actuación en casos de emergencias y accidentes biológicos o químicos.

4.5 GESTIÓN DE RESIDUOS

Gestión de residuos tóxicos y peligros deben de inducir medidas para la recogida selectiva,
clasificación y el almacenamiento temporal de residuos hasta su recogida por una empresa gestora

Las medidas para gestionar son:

Residuos biosanitario especiales se incluyen grupos punzantes y cortantes q han estado en contacto
con productos biológicos, cultivos biológicos, cultivos microbiológicos y material contaminado

Residuos químicos envases que han contenido productos químicos reactivos caducados o
innecesarsios

Residuos citotóxicos el resto de los productos carcinógeros, mutágenos y teratógenos.

Residuos radiactivos.

Se recogen:

 Contenedores para los residuos solidos.

 Garrafas en el caso de residuos líquidos.

Y deben cumplir:

 Estar homologados y ser específicos para cada residuo

 Ser diferenciados normalmente por código de color
 Estar perfectamente etiquetados
 No se deben de llenar más de 2/3

En caso de derrame, que es el accidente más común en el laboratorio, se deben llevar a cabo 3
acciones de forma inmediata:
  Neutralización: depende de las características químicas del producto derramado
 Absorción: el material absorbente depende del producto derramado
o Celulosa, absorbe derrames en pequeñas cantidades
o Serrín, para líquidos no inflamables, tóxicos ni corrosivos
o Carbón activo, para líquidos inflamables, tóxicos y corrosivos
o Absorbentes/neutralizador comercial
 Eliminación: se debe introducir el residuo en un envase adecuado y eliminar en el
contenedor específico
o Derrames de productos en polvo, se debe evitar la formación de aerosoles y polvo
en suspensión.
o Derrames de productos volátiles tóxicos recogidos con celulosa, se debe meter
cuanto antes en un envase hermético.

Mientras se lleven a cabo estas actividades se debe restringir el acceso al laboratorio, mientras que
el personal responsable de la recogida debe estar equipado con los EPI y tener especial cuidado con
los derrames de líquidos inflamables y volátiles.