La biología molecular es la rama de la biología que estudia la composición, estructura y función

de las moléculas biológicamente importantes y los procesos en los que están implicadas. Por
ello, y debido a que las proteínas son estudiadas por la proteómica, la biología molecular se
enfoca en el estudio de los nucleótidos.

La citogenética es la rama de la genética que estudia la estructura, función y comportamiento

de los cromosomas en metafase.

LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR

EQUIPAMIENTO

ESPECIFICO

Termociclador: aparato básico que lleva a cabo las PCR, es decir, la amplificación de
ADN. Está compuesto por el bloque incubador (soporte que mantienen de manera
homogénea una temperatura especifica durante un tiempo determinado, siendo capaz de
realizar ciclos. Los cambios de temperatura pueden deberse a sistemas de aire caliente y frio/
resistencias eléctricas, o materiales semiconductores que aplican el efecto Peltier) y por la
tapa del bloque incubador (tapa cerrada que entra en contacto con la tapa de los tubos de
reacción que evitan la evaporización total del agua).

Equipo de electroforesis: aparato capaz de separar moléculas de ácidos nucleicos en

función de su densidad, mediante una reacción de electroforesis. Se compone de una
disolución tampón (pH 7,5-7,8), un gel de agarosa (mayor tamaño, menor resolución) o de
poliacrilamida (menor tamaño, mayor resolución), un soporte donde solidificar el gel, una
cubeta con dos electrodos (uno negativo y uno positivo) y una zona con electrolitos donde
colocar la solución, y una fuente de alimentación.

Documentador de geles: equipo que permite visualizar las bandas de ácidos nucleicos
en el gel tras la electroforesis, obteniendo una fotografía. Se compone de un transiluminador
(fuente de luz UV con una superficie transparente por encima, donde se colca el gel. Permite
visualizar las bandas gracias al agente intercalante fluorescente previamente añadido) y una
cámara fotográfica (permite tomar fotografías de las bandas).

GENERAL

Cabina de flujo laminar vertical de tipo II: necesario para trabajar con ARN, puesto que
evita la entrada de ARNasas.

Sistema de purificación de agua: se usa para obtener agua purificada de tipo II y agua
ultrapura de tipo I (recomendable solo si son usados frecuentemente).

Espectrofotómetro: necesario para medir la concentración de ácido nucleico de la

muestra.

Microscopio de luz transmitida o fluorescencia: permite ver las bandas del gel a la vista
del microscopio, lo que permite las técnicas de hibridación in situ.

Autoclave: equipo capaz de esterilizar materiales.

 Incubador o estufa: Existen de CO2 y humedad controlada, y de cultivos de
microbiología. Se usan para realizar cultivos.

Centrifugadora y microcentrifugadora: equipo cuya función principal es separar

componentes de una disolución en base a su densidad.

Neveras y congeladores de -20ºC y de -80ºC: permiten conservar los reactivos y las

muestras.

Además, podemos encontrar balanzas, vórtex, agitadores magnéticos, pHmetro, etc…

ESTRUCTURA DEL LABORATORIO

El laboratorio de biología molecular se compone por 4 salas principales, siendo una de

ellas limpia mientras que el resto están calificada como sucias.

La primera sala es la preparación de reactivos, donde se preparan los reactivos y las

disoluciones que se usaran (sala limpia, pues no contiene ADN). Debe contener una cabina de
seguridad y una ligera presión positiva (no deja que los contaminantes entren).

La segunda es la sala de preparación de muestras y extracción de ADN. En ella se prepara

la muestra. Debe contar con una ligera presión negativa (impide la salida de contaminantes),
una cabina de bioseguridad y un espectrofotómetro.

La tercera sala es denominada sala de PCR, y tal como su nombre indica, en ella se realizan
las PCR (sala sucia). Debe disponer de termocicladores.

La cuarta y última sala es la sala post-PCR, donde se dispone de los equipos de

electroforesis, del documentador de geles y de una ligera presión negativa (sala sucia).

EL FLUJO DE TRABAJO

El flujo de trabajo marca el sentido único de los procesos en el circuito de trabajo. Es

decir, tantos los reactivos como las muestras no deben de invertir este flujo y viajar a salas
anteriores. Además, los equipos no pueden cambiarse de una sala a otra.

LAS CONDICIONES DE TRABAJO

LA CONTAMINACION DE LAS MUESTRAS

La contaminación de las muestras se debe a la intrusión de ácidos nucleicos extraños o

de nucleasas, ya sea mediante la contaminación cruzada (material no amplificado del medio
ambiente, contaminantes precedentes del personal, o contaminantes de las superficies de
trabajo), contaminación por productos amplificados o contaminación de los reactivos y del
material fungible.
 TECNICA ASEPTICA

La técnica aséptica consiste en el conjunto de actividades que tienen por objetivo

prevenir la contaminación por microorganismos, ácidos nucleicos y nucleasas; como el lavado
frecuente de manos, el uso de equipos de protección individual o la descontaminación se
superficies.

PREVENCION DE CONTAMINACION AMBIENTAL

Previene la contaminación cruzada medioambiental mediante el uso de cabinas de

bioseguridad de clase II, puntas de micropipetas especiales (de desplazamiento positivo o de
filtro), y las puntas con filtro.

PREVENCION DE CARRYOVER

El carryover es el nombre que recibe la contaminación por productos amplificados

debido a la inversión del flujo de trabajo.

EL USO EFICIENTE DE RECURSOS

El uso de los recursos consiste en cumplir como mínimo con un plan de mantenimiento,
un seguimiento de la trazabilidad de los reactivos, el adiestramiento adecuado del nuevo
personal, la estandarización de los procesos y técnicas empleadas, y contar con un buen
código de buenas prácticas medioambientales.

LABORATORIO DE CITOGENETICA Y CULTIVOS CELULARES

EQUIPAMIENTO

CULTIVOS CELULARES

Cabina de flujo laminar: estructura en la que se realizan todos los procesos

relacionados con los cultivos. Esta se compone de un panel frontal transparente, una rejilla
frontal, un sistema mecánico que provoca una ligera presión negativa, un filtro HEPA de gran
superficie que filtra el aire entrante, y un segundo filtro HEPA de gran superficie que filtra el
aire saliente.

Incubador de CO2: equipo usado para incubar cultivos, debido a que es capaz de
mantener las condiciones optimas para el desarrollo de las células. Este consta de un control
de temperatura, recirculación de aire interna, un control de CO2 y un control de humedad.

Microscopio invertido: microscopio que destaca por tener el revolver y la fuente de

luz con los lugares intercambiado, debido a que el tamaño de las platinas dificulta observar el
cultivo en un microscopio convencional.
 Equipo de criogenia: permite conservar muestras y líneas celulares durante un largo
periodo de tiempo.

CITOGENETICA

Equipo de análisis de imagen: básico para documentar y analizar metafases. Contas

de un microscopio óptico convencional, una cámara digital y un software especifico para
formar el cariotipo.

Microscopio óptico convencional y de fluorescencia: necesarios para el recuento de

células o las técnicas de hibridación in situ, entre otras funciones.

COMÚN

Equipo de esterilización: su función principal consiste en esterilizar el material del

laboratorio. Consta de una autoclave, y un sistema de filtración.

Sistema de purificación de agua

Neveras y congeladores de -20ºC y de -80ºC

ESTRUCTURA DEL LABORATORIO

El laboratorio se compone de tres salas:

La primera se corresponde con la sala de cultivos (sala limpia). Esta contiene todo lo
necesario para realizar los cultivos y observar su progresión; por ello, dispone de la cabina de
flujo laminar y del microscopio invertido.

La segunda sala es la sala de laboratorio convencional (sala sucia), y contiene las cubetas
de tinción, los microscopios convencionales y los de fluorescencia, el equipo de análisis de
imagen, etc…

La tercera y ultima sala es la sala de criogenia (sala sucia). Esta contiene las neveras y los
congeladores.

TÉCNICA ASEPTICA

Son una serie de normas pensadas para evitar la infección de agentes patógenos, su
salida al exterior o la contaminación de la muestra. Por tanto, debemos de cumplir con las
siguientes normas: lavados frecuentes de manos, uso de guantes y batas desechables, puerta
siempre cerrada, uso exclusivo de material y reactivos estériles, prohibido introducir mecheros
bunsen, colocar el material de antemano, no sacar el material estéril del embalaje hasta su
uso, prohibido el paso a todo aquel no autorizado, realizar un mantenimiento periódico y
exhaustivo, entre otros…