UDI 1.

Laboratorios de biología
molecular y citogenética.
1. Introducción

Biología molecular
• Parte de la biología que estudia la composición, estructura y
función de las moléculas biológicamente importantes y los
procesos en los que están implicadas.

Citogenética
• Parte de la genética que estudia la estructura, función y el
comportamiento de los cromosomas en metafase.
2. El laboratorio de biología molecular
2.1. Equipamiento del laboratorio de biología molecular

PCR

Equipo de Documentador
Termociclador
electroforesis de geles
Permite realizar Permite separar Permite visualizar
secuencialmente un número moléculas de a. nucleicos resultados de
elevado de ciclos repetitivos por tamaño, carga o electroforesis.
programables con Tª conformación
diferentes y distintos tridimensional.
tiempos de incubación.
 DOCUMENTADOR DE GELES
• Transiluminador
TERMOCICLADOR

• Bloque incubador

EQUIPO DE ELECTROFORESIS
• Cama
• Luz UV bajo
• Soporte metálico con • Donde solidifica el superficie donde se
pocillos. gel. coloca el gel para que
• Mantiene Tª • Cubeta de bandas emitan
homogénea, 4-96ºC. electroforesis fluorescencia.
• Tapa del bloque • Soporte central para • Cámara fotográfica
incubador cama. • Permite visualizar
• Termoestatizada 102- • 2 zonas de depósito imágenes.
105ºC, entonces agua de tampón en los
en tubos de reacción extremos.
no se evapora. • 2 electrodos.
• Fuente de
alimentación
• Suministra corriente
eléctrica.
2.2. Equipos genéricos de un laboratorio

Sistema de Microscopio de luz

Cabina de
purificación de Espectrofotómetro transmitida y
bioseguridad
aguas fluorescencia

Autoclave Incubador o estufa Baño termostático Placa calefactora

Otros equipos:
Nevera y
Centrífugas y balanzas, agitadores
congeladores de -
microcentrífugas magnéticos,
20ºC y -80ºC
pHmetros, vórtex…
 Fig.2. Placa calefactora.

Fig.3. Espectrofotómetro para medidas de

concentración y pureza de ácidos nucleicos.

Fig.1 Cabina de flujo laminar de clase II.

 2.3. Estructura del laboratorio de biología molecular
SALA DE PREPARACIÓN
SALA DE PREPARACIÓN
DE MUESTRA Y SALA DE LA PCR SALA POST-PCR
DE REACTIVOS
EXTRACCIÓN DE ADN
• Preparación de • Sala “sucia”, con • Termocicladores. • Con equipos de
reactivos, ligera presión • Con un espacio de electroforesis y
incluyendo la negativa. trabajo para añadir documentador del
mezcla de PCR. • Con cabina de las muestras de gel.
• Sala “limpia” de bioseguridad. ADN a la mezcla de • Sala “sucia”.
ADN con ligera • Con reacción.
presión positiva espectrofotómetro.
• Con cabina de
bioseguridad.
Fig.4. Plano de un laboratorio de biología molecular.
2.4. Flujo de trabajo

Salas “limpias” Salas “sucias”

Pre- PCR PCR Post- PCR

Fig.5. Flujo de trabajo unidireccional en los laboratorios de biología molecular.
2.5. Condiciones de trabajo

2.5.1. Contaminación de las muestras

Tipos de Fuentes de
contaminación contaminación

ADN Contaminación
cruzada
extraños

Contaminación
Nucleasas por productos
amplificados

Contaminación
de los reactivos
comerciales y el
material fungible.
2.5.2. Normas para la manipulación de materiales y reactivos
• Separación física de las áreas.
• Flujo unidireccional.
• Materiales y reactivos asépticos y exentos de ADN.

2.5.3. Técnica aséptica

BPL

Prevenir la
Lavado de Descontaminar Prevención de
Uso de EPI contaminación
manos las superficies carryover
ambiental
Fig.6. Organigrama técnica aséptica en el laboratorio de biología molecular.
Ejercicios UDI 1. Parte 1.
Hacer de la hoja de ejercicios los ejercicios del 1 al 5(Enviados por
Clasroom).
3. Laboratorio de citogenética y cultivos
celulares
• Laboratorio de cultivos celulares
• Propagación o crecimiento de células eucariotas de organismos
pluricelulares.

• Laboratorio de citogenética
• Estudio de los cromosomas de especies eucariotas.
• Áreas:
• De cultivo celular
• De genética
Equipamiento específico para cultivos celulares
 Cabina de flujo laminar
- Panel frontal trasparente.
- Rejilla frontal que genera una
corriente entrante de aire.
- Sistema mecánico para impulsar
el aire.
- Filtros (2) de tipo HEPA(evita el
paso de esporas, hogos, bacterias
y levaduras).

Fig.7. Esquema de una cabina de flujo laminar de clase II.

 Incubador de CO2
- Control de temperatura.
- Recirculador de aire para homogenizar la temperatura del interior.
- Control de CO2 (botellas presurizadas).
- Control de humedad

 Microscopio invertido

Fig.8. Incubador de CO2 para cultivos celulares.

 Equipo de criogenia

Fig.9. Microscopio invertido.

Equipamiento específico para citogenética
 Equipo de análisis de imagen
• Microscopio óptico convencional
• Cámara digital
• Software específico
 Microscopio óptico convencional y de fluorescencia

Equipamiento común
 Equipo de esterilización
• Autoclave
• Sistema de filtración
 Sistema de purificación de agua
 Neveras y congeladores de -20 y -80 grados
 Otros equipamientos: pHmetros, balanzas, agitadores magnéticos, placas calefactoras,
pipeteadores automáticos…
 Seguridad en el
laboratorio

Seguridad
Bioseguridad
química

Reactivos
Medidas
Microorganismos considerados BPL
generales
sustancias
peligrosas
- Prevenir la exposición del - Utilización de EPI.
personal a estas - Prohibido pipetear con la boca.
GMO sustancias. - Manipular los productos volátiles en
las campanas de aspiración de gases.
- Establecer un
-- Manipular los productos inflamables
almacenamiento seguro. alejados de fuentes de calor y o llamas.
- Gestión eficiente de los - Correcto etiquetado de los envases.
residuos que genere. - Almacenamiento de los productos
químicos en armarios adaptados.+
 5. Equipamiento y normas de seguridad
EQUIPAMIENTO
• Disponer de instalaciones de emergencias
señalizadas.
• Estar dotados de EPI.
• Tener instalaciones adecuadas para
almacenar sustancias toxicas.
• Tener contenedores adecuados para la
recogida y clasificación de residuos.
• Disponer de kits para recogida de derrame
de productos químicos y fitotóxicos.
• Contar con un manual de seguridad y un
plan de gestión de residuos.
NORMAS PARA EL PERSONAL
• Lavado frecuente de manos.
• Utilización de EPI.
• Prohibición de comer, beber, fumar y
maquillarse.
• Uso de gafas de seguridad cuando se
lleven lentes de contacto.
• Prohibido pipetear con la boca.
• Recibir la formación adecuada.
• Conocer el plan de gestión de residuos.
6. Gestión de residuos
• Residuos sólidos Contenedores
• Residuos líquidos Garrafas

- Deben estar homologados.

- Deben ser específicos para cada residuo.
- Se diferencian por códigos de color.
- Deben estar debidamente etiquetados.
Procedimiento en caso de derrames

1. Neutralización (agua)

2. Absorción (Aserrín, carbón activo, papel…)

3. Eliminación (Residuo y material de actuación en

contenedor específico)
Ejercicios UDI 1. Parte 2.
Hacer de la hoja de ejercicios los ejercicios del 6 al 9(Enviados por
Clasroom).
Actividad 1 del primer trimestre. Elaborar una presentación.

Debéis diseñar un laboratorio de biología molecular donde se va a realizar la técnica de PCR.

En la presentación debéis incluir:
1. Descripción de las salas del laboratorio.
2. Inventario de cada sala con los equipos y aparatos que debe haber. (Incluid fotografías)
3. Inventario de cada sala con los elementos de seguridad que deben estar disponibles: instalaciones de
emergencia, armarios para reactivos, contenedores para residuos… (Incluid fotografías)
4. Un plano con la distribución de las salas, y la distribución de los equipos y elementos de seguridad más
importantes.
5. Debéis explicar mediante un esquema el flujo de trabajo en el laboratorio y haced debajo de dicho esquema una
descripción explicándolo.
6. Por último, incluiréis un cartel donde se enumeren las normas y buenos hábitos de trabajo para colgar en vuestro
laboratorio.
Exposición voluntaria.