Medios de cultivos, microscopía e identificación y observación de células eucariotas y

procariotas.
Universidad del Quindío, Facultad de Ciencias Básicas y Tecnología
Parra Bohorquez A. E.* Patiño Mejía, S. A., Varon Rojas, D., Ramirez, J. D

Resumen

Introducción
Los microorganismos desempeñan un papel crucial en diversos procesos biológicos y tienen un
impacto significativo en la salud humana, la agricultura y el medio ambiente. Comprender los
requisitos de crecimiento y las características de los microorganismos es esencial para estudiar su
biología y desarrollar estrategias para controlar su crecimiento (Richard M. Atlas, 2001). Este
experimento de laboratorio tuvo como objetivo explorar la preparación de medios de cultivo, los
requisitos de nutrientes para el crecimiento microbiano y el uso de microscopía para observar y
diferenciar entre células procariotas y eucariotas.
La preparación de medios de cultivo es un aspecto fundamental de la investigación en microbiología,
ya que proporciona los nutrientes necesarios para el crecimiento y supervivencia de los
microorganismos. Se pueden adaptar diferentes tipos de medios para favorecer el crecimiento de
microorganismos específicos, lo que permite a los investigadores estudiar sus características y
comportamientos únicos. Al comprender la composición y preparación de los medios de cultivo, los
científicos pueden crear condiciones óptimas para el crecimiento microbiano y realizar diversos
experimentos para investigar su biología ( Versalovic, J. 2022).
Además de los medios de cultivo, los requisitos de nutrientes para el crecimiento microbiano son
factores cruciales a considerar. Los microorganismos requieren nutrientes específicos, como carbono,
nitrógeno, fósforo y oligoelementos, para sus procesos metabólicos y su crecimiento. Al manipular la
composición de nutrientes de los medios de cultivo, los investigadores pueden controlar la tasa de
crecimiento y las características de los microorganismos, proporcionando información valiosa sobre
sus necesidades nutricionales y capacidades metabólicas (W. B. Hugo.1966).
La microscopía es otra herramienta esencial en microbiología que permite la observación y
diferenciación de células procariotas y eucariotas. Las técnicas microscópicas, como la tinción de
Gram, permiten a los investigadores visualizar y clasificar las células bacterianas según las
características de su pared celular. Esta técnica ayuda en la identificación y clasificación de especies
bacterianas, proporcionando información valiosa sobre su patogenicidad y susceptibilidad a los
antibióticos (Hans Christian Gram, 1884).
Los objetivos de este experimento de laboratorio fueron preparar medios de cultivo, comprender los
requisitos de nutrientes para el crecimiento microbiano y practicar el uso de microscopía para
observar y diferenciar entre procariotas y eucariotas.

Material y Métodos

Resultados
Se preparó un agar apto para el cultivo donde posteriormente se extrajo con un hisopo e implementó
la muestra en la caja de petri con su agar preparado en el cultivo, se almacenó con una temperatura
óptima y sellados bajando así la probabilidad de contaminación del cultivo. Se presentaron Bacterias
Gram positivas, Bacterias Gram negativas y hongos de tipo moho (Tabla 1)

Tabla 1.Tabla de identificación de microorganismos

se identificaron y ordenaron los microorganismos encontrados en las muestras obtenidas se observó su
morfología y su características macroscópicas.

Muestra Tipo de Morfología del Identificación de Observación

Microorganismo Microorganismo Microorganismos Macroscópica

Manzana Hongo, Moho Moho Zigomicetos Rhizopus Stolonifer se presentó color blanco
en el centro coloración
negra textura afelpada

Yogur Hongo, Moho Moho Zigomicetos Rhizopus Stolonifer se presentó color blanco
en el centro coloración
grisácea oscura textura
afelpada

Moneda Bacteria Gram Bacilos Bacillus color blanco amarilloso

leve con textura espesa
positivo

Manzana Bacteria Gram Racimos en forma Staphylococcus coloración amarilla

pálido con textura espesa
Positiva de uva

Yogur Bacteria Gram Cocos Streptococcus coloración blanco pálido

con textura espesa
negativo

Figura 1.Vision Macroscopica

Figura 1. En la imagen se muestran tres fotografías de

cultivos de bacterias con diferentes muestras: A.Muestra de
yogur, B. Muestra de manzana, C.Muestra de moneda. Los
cultivos presentaron crecimiento de hongos y bacterias. Los
hongos recogidos en las muestras están señaladas con un
círculo azul y las bacterias están señalizadas como se aprecia
en la imagen los cultivos proliferaron unos más que otro se
destaca en la muestra C que solo había una colonia visible a
simple vista.

Figura 2.Vista Microscópica

Figura 2.en la visión microscópica se evidencio

hongos de tipo Moho, bacteria gram negativas y
bacterias gram positivas las imágenes del grupo A.
Son de la muestra de manzana y el yogur que
presentaron el mismo tipo de Moho unas partes
identificadas y marcadas 1.Rizoide,
2.Estolón,3.Esporas,4.Esporangióforo, como se
evidencia en A1, A2 y A3. También en la Figura 2.
Se proporcionaron información visuales de tres
colonias de bacterias diferentes que fueron
etiquetadas como B, C y D entre esas tres dos
colonias se tornaron de color violera oscuro y una
se tiño de color rosa lo que significa que la
bacterias observadas fueron dos bacterias Gram positivas y una Gram negativa.
En la Figura 2. En la muestra B. Se identifica la presencia de bacilos Gram positivos como se
evidencia por la tinción gram que presenta en la zona señalizada con el número 1 es una acumulación
de bacilos entre montados por eso dificulta ver su morfología individual. En el número 2 la forma de
la bacteria se distingue y se logra identificar su morfología de bacilo ergo da entender que la muestra
B es un Bacilos de tipo Gram positivo. En la siguiente muestra obtenida.
La muestra C se presencia tincion de color violeta, en 1 se muestra una acumalicion pero se distigue
su separaciones con otras bacterias de su colonia tambien se evidencia su morfología de racimo de uva
en el 2 se resalta con más plenitud su morfología de racimo de uva todo estas caractaristicas da para
decir que la bacteria es Staphylococcus de tipo Gram positivo.
Las muestras anteriores eran de tipo Gram positivo y presenta una tinción violeta, en la siguiente
muestra D la tinción es de un color rosa en la parte 1 muestra una agrupación de bacterias de la misma
colonia con dificultad se puede distinguir su morfología de coco que es esférico individual 2. La
bacteria está aislada de los grupos cercanos con lo que se logra evidenciar con plenitud su forma
esférica dando a su morfología de coco y la tinción Gram de tonalidad Rosa para identificar la
bacteria Estreptococos de tipo Gram negativo.

Discusión
El informe se enfocó en el cultivo de bacterias y su identificación a través de la tinción gram, para la
identificación de bacterias gram positivas o negativas; donde se observaron diferentes tipos de
organismos de diferentes colores, estructuras y tamaños. La utilización de colorantes permite una
identificación más fácil de bacterias como señala Ronay en 2012. lo cual se demuestra en los
resultados, ya que gracias a la tinción se logró visualizar diferentes tipos de bacterias como se observa
en la (Fig. 2 B, C y D). además de eso se evidenciaron coloraciones de color rosa-rojo y Violeta-azul,
esta diferencia se debe segun Breakwale en 2009 a la constitución de la pared celular de las bacterías,
comenta, que las gram negativas debido a que tienen una capa fina de peptidoglicano y una capa
externa, en cambio las gram positivas cuentan con una pared celular gruesa de peptidoglicano, pero
sin capa externa.
Según Popescu & Doyle en 1996 la tinción de gram consiste en utilizar cristal violeta, este
componente tiene una afinidad para adherirse al peptidoglicano, así se queda adherido a las bacterias
que contengan más peptidoglicano y carezcan de una capa externa, que en este caso serían las gram
positivas quedando moradas-azules y como último procedimiento se agrega safranina como colorante
para las bacterias que no pudieron retener el cristal violeta-yodo, obteniendo una coloración
rojiza-rosa, estas bacterias son conocidas como gram Negativas. Esta descripción es similar a los
resultados obtenidos, donde se evidenció los colores azul-violeta y rojo-rosa, dando a entender que en
las bacterias de la (Fig.2 B Y C) se tratan de bacterias gram positivas con un alto contenido de
peptidoglicano en cambio las bacterias de la (Fig. 2 D) son bacterias gram negativas con poco
contenido de peptidoglicano y una capa externa.
Los medios de cultivos deben ser apropiados según las bacterias que se desean cultivar, como señala
koneman en 1994 , de ahí la importancia de elegir agares adecuados según el tipo de bacterias, los
agares sólidos por lo general han demostrado proporcionar buenos resultados debido a que son ricos
en nutrientes lo cual permite el desarrollo de las bacterias, además deben estar esterilizados para evitar
la presencia de organismos indeseados, así se podrá visualizar la bacteria que se necesita en cuestión,
teoría la cual es apoyada en base a Boquet en 1973 y Nicoletti en 1990, donde hablan de la
importancia de los agares sólidos y donde Nicoletti realizó un agar con características específicas,
llamado agar manitol salado lo que le permitió identificar el proceso de reproducción de estafilococos.
Esto permite deducir que en la (Fig. 2A) la presencia de un agente externo a una bacteria se debió a un
mal procedimiento de esterilización, donde por falta de atención o un procedimiento inadecuado se
esparce un hongo en el agar. Se piensa que es un hongo debido a que Llovo y Pontón en 2007
describen hongos microscópicos, como filamentosos y con presencia de esporas, de fácil dispersión
como se aprecia en la (Fig. 2 A1 y A3).
Finalizando, los resultados muestran efectivamente las diferentes coloraciones de tinciones en
bacterias, apoyando la teoría de la existencia de bacterias gram positivas y negativas, además de la
estructura de un hongo, esto resulta importante para futuras investigaciones de medios de cultivos
microbiológicos donde se debe de tomar más importancia a el proceso de esterilización y cultivación
para evitar agentes externos y tener resultados más completos; aunque se reconoce la falencia de
cuidado debido a la invasión de un agente externo a la bacterias como el hongo, se considera que esto
permite la concientización del cuidado que se debe tener con los medios cultivos para evitar la
contaminación, además de abrir la posibilidad a nuevos estudios relacionados a la relaciones e
interacciones en un medio de cultivo microbiológico entre microhongos y bacterias.

Conclusión

Bibliografía
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