Asignatura:

Microbiología

Título del trabajo:

Informe de laboratorio N° 3

Presenta:

Jessica Liseth Escamilla Rojas ID: 687865

Juan Sebastian Rodriguez Chaparro ID: 686535

Valentina Curcio Cruz ID: 688939

Docente:

Nubia Carolina Higuera

Corporación Universitaria Minuto de Dios

Colombia _ Ciudad Bogotá D.C Marzo, de 2020

 Introducción
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes y factores de crecimiento que crean las
condiciones necesarias para el desarrollo de microorganismos, los medios de cultivos están
conformados por Agar, extractos, peptonas, indicadores de pH, agentes reductores, agentes
selectivos y en algunas ocasiones por fluidos corporales.
Los medios de cultivo se clasifican en:
● Líquido: los nutrientes están disueltos en agua
● Sólido: se les añade agentes solidificantes como el agar y se emplean en el aislamiento
y separación de microorganismos.
● Semisólido: Presenta una consistencia levemente gelatinosa y se emplea para
determinar la movilidad.
● Complejo: Constituidos por sustancias complejas que se complementan con minerales.
● Sintéticos: Presentan ingredientes químicamente puros que permiten conocer la
composición cualitativa y cuantitativa.
● Selectivos: Diseñados para el aislamiento de microorganismos específicos.
● Enriquecimiento: Permite un incremento en el número de un tipo de microorganismo
en relación a otro tipo de microorganismo.
● Test bioquímicos: Conociendo la reacción permite identificar los microorganismos
presentes.
La tinción de Gram fue desarrollada por Hans Christian Gram en 1884, consistió en aplicar
diversos colorantes como cristal violeta, lugol, alcohol/acetona y safranina durante tiempos
determinados, esta tinción permite identificar distintos tipos de bacterias según la distribución
del peptidoglicano de la pared celular, debido a que las bacterias gram positivas poseen una
pared celular gruesa conformada por un gran número de capas de peptidoglicano,permite que
la tinción de Gram se inserte entre estas capas, dando como resultado una coloración azul en
las bacterias en cambio la bacteria Gram negativas poseen una pared más delgada formada por
menos capas de peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos que repelen la tinción
dejando a este tipo de bacterias incoloras, motivo por el cual se agrega safranina logrando así
colorearlas de rosado.

Objetivos
● Caracterizar las bacterias segun su forma elevación, borde, pigmento y olor para
identificar sus características a nivel macroscópico y así poder agruparlas de una
mejor manera
● Ejecutar la tinción de Gram de manera que se permita la identificación de bacterias
Gram negativas y Gram positivas para saber con qué bacterias se trabaja y en qué
medio habitan normalmente.
● Determinar los diferentes medios nutritivos en los que se hacen cultivos para
desarrollar medios de cultivos puros y colonias adecuadas para el estudio de los
mismos
Metodología
 Resultados:

Caracterización primera bacteria

Manos antes- Forma Circular

AN
Elevación Plana

Borde Entero

Color Amarillo

Caracterización segunda bacteria

Aire -AN Forma Ameboide

Elevación Plana

Borde Ondulado

Color Amarillo claro

Caracterización tercera bacteria

Cabello -AN Forma Circular

Elevación Convexa

Borde Entero

Color Amarillo
Imagen Observaciones

Se pudo observar que las bacterias son Gram

positivas debido a la tinción color violeta
que tuvo.

Las bacterias observadas son coccus

agrupadas en racimo.

Levaduras Saccharomyces cerevisiae

observadas en el microscopio después de
aplicar azul de lactofenol.

Se observó que son bacterias gram positivas

debido a su tinción violeta, adicional a esto
son coccus y algunas son agrupadas en
racimos.

Por medio del microscopio se observó que

son levaduras, su color se debe a que estas
fueron observadas después de aplicar azul
de lactofenol.
 Discusiones:

Los medios de cultivo bacteriano, son medios enriquecidos con nutrientes necesarios para el
crecimiento de cualquier microorganismo, estos ayudan a su composición química y favorece
la rápida reproducción en colonias macroscópicas. Para esto, en el siglo XIX, un
microbiólogo llamado Robert Koch, desarrolló medios de cultivos usando tajadas de papa ya
que, se dio cuenta que la papa tenía los nutrientes necesarios para el cultivo adecuado de
bacterias y hongos, para así obtener cultivos más puros. Seguido a esto, también desarrolló
medios de cultivo sólidos con soluciones que se gelifican y son ricas en nutrientes,
posteriormente progreso con cultivos de agar, que provienen de un alga marina, la cual en un
ambiente seco y sin humedad, se solidifica como la gelatina, llamándolo así Agar nutritivo.
Según (Salinas M., Moreno S., Vigueras J., Sigala J. & Le Borgne S.. 2016) “Los medios más
comunes son los caldos (medios líquidos), tubos con agar inclinado, tubos con agar y cajas de
Petri con agar (medios semisólidos y sólidos)”.

En este tipo de cultivos con agar nutritivo o extracto de malta, se usan distintos métodos para
analizar una bacteria o colonia en específico, uno de ellos llamado el aislamiento o
agotamiento bacteriano en cultivos sólidos, el cual consiste en esparcir por todo el medio, un
número elevado de bacterias hasta reducirlas en el centro de la caja. Este método es usado
normalmente para separar las diversas bacterias que hay en una colonia y solo dejar las que se
quieren estudiar en una parte específica.

Una colonia está constituida por las descendientes de una célula o bacteria, así que las
características de la colonia se derivan del tipo bacteria que primero se reprodujo (llamada así
célula o bacteria madre). Así que de la misma forma, citando a (Pirez M. & Mota M. 2006)
“El tamaño puede variar desde 0.5 mm (Haemophilus sp. o N. gonorrhoeae) a más grandes
como las enterobacterias. La forma de la colonia puede ser circular (Staphylococcus),
irregular o filamentosa (Bacillus). Los bordes pueden ser ondulados (característicos de los
bacilos largos como Bacillus anthracis), en sierra o dentados (Yersinia pestis) o lisos (por
ejemplo Proteus vulgaris o Escherichia coli). La superficie de la colonia también es
orientadora y puede ser: plana, convexa, mamelonada, umbilicada (S. pneumoniae). En
relación al pigmento que adquieren, éste puede ser: verde (P. aeruginosa), amarillo (S.
aureus), grisáceo (N. meningitidis). También es diferente el comportamiento frente a la luz:
brillante (Streptococcus) u opaca (Staphylococcus). Pueden presentar olores particulares
como el frutal de P. aeruginosa o el putrefacto de los anaerobios. Por último hay que destacar
la consistencia: mucoide (M), liso (S) o rugoso (R). Las colonias M tienen aspecto acuoso,
brillante, propio de las bacterias capsuladas o que forman cubiertas polisacáridas como
Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae (...)” (p. 27).

El bacteriológo Christian Joachim Gram en 1844, desarrolló una técnica de coloración

empleada en la microbiología para observar las bacterias y la denominó tinción de gram, donde
esta reacción es diferentes en las bacterias gram positivas ya que estas tiñen de color violeta y
las gram negativas tiñen de color rosa. Las diferencias entre estas dos bacterias gram negativas
y gram positivas se debe a su estructura de la pared celular ya que las gram negativas tienen
una delgada capa de peptidoglicano y su capa más externa está cubierta de una capa de
lipoproteínas, mientras que las bacterias gram positivas tienen una gruesa capa de
peptidoglicano y dos tipos de ácidos teicoicos: ácido lipoteicoico que está ubicado en la parte
interna de la pared celular unido a la membrana plasmática; y el ácido teicoico que está ubicado
en la superficie unido a la capa de peptidoglicano.

La estructura de las bacterias gram negativas está constituida por una membrana plasmática
que está formada por fosfolípidos, proteínas y enzimas; esta se encarga de la produccion de
energia y de los mecanismos de transporte. Estas bacterias constan de una pared celular que
tiene peptidoglicano que tiene como función darle rigidez y forma a la bacteria ya sean cocos,
bacilos o espirilos; además consta de una membrana externa que protege la célula, finalmente
está constituida de proteínas y lipopolisacáridos.
Algunas bacterias gram negativas tienen flagelos que le permiten el desplazamiento y fimbrias
donde su función es facilitar la adhesión a otras bacterias.

Entre todos los microorganismos analizados en el laboratorio, se identificó a un grupo de

levaduras llamadas Saccharomyces cerevisiae como se muestra en los resultados, los cuales
son microorganismos unicelulares del grupo de los hongos, que es muy usado para
fermentación del vino, cerveza o pan. Todo el género Saccharomyces metabolizan azúcares
como la fructosa o sacarosa, incluso en condiciones anaerobias, es por eso que esta levadura
es muy usada a nivel industrial, por la producción de alcohol y anhídrido carbónico, en el
proceso de fermentación. La reproducción de estas levaduras es de forma asexual, a través de
la gemación de la superficie del hongo, pero puede también reproducirse de forma sexual en
determinadas condiciones.

Conclusiones:

● Todos los medios de cultivos requieren de nutrientes específicos para la reproducción y

crecimiento de microorganismos. Los más usados, es el agar nutritivo (derivado de las algas
marinas) o el Potato-Dextrosa Agar o PDA (que como su nombre lo indica, se deriva de la
papa). Estas dos soluciones se usan para crear medios de cultivos sólidos en cajas petri
● Gracias a la tinción de gram, se pueden catalogar a las bacterias en dos grupos específicos, las
gram positivas y las gram negativas, que según sus características pueden ser de utilidad en
procesos antrópicos, o por el contrario pueden ser patógenas para el ser humano o para
cualquier otro ser vivo, siendo las gram positivas las más patógenas, aunque esto no quita el
hecho que en las gram negativas hay grupos que también pueden ser perjudiciales
● La forma, color y el olor clasifican a las bacterias, ya que se agrupan por características y
comportamientos a niveles macroscópicos. Luego, para mayor especificación, se analizan a
nivel microscópico y se tiñen para que sean más fáciles de reconocer.
 Bibliografía
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