Práctica 1.Selección y escalamiento de m.o.

s para la elaboración de un
biorreactor
Integrantes:
Hernández Peña Naomi Kinnereth
Méndez Albarrán Ivana
Morales Jasso Abigail
Ortega Vara Fernando
Venancio Méndez Nahomi
Zamudio Bolaños Omar
Asignatura: Biotecnología
Docente: De la rosa Cruz Roberto
Carrera:QFBT
Fecha: /03/2023

Resumen:
En esta práctica se prepararon de diversos medios de cultivos en los que sembraron bacterias
de hongos donde posteriormente se pasaron a cajas petri ,se realizó un frotis de las muestras ,
después de una semana se colocó en un medio líquido para aumentar la biomasa para luego
incubarlo al final se tomó una muestra de la biomasa que creció y se realizó un frotis.
Palabras Clave: Bacterias, hongos, medios de cultivos, biomasa

Introducción ● Estafilococos S. aureus

Sal y manitol es un extracto de carne, peptona
de carne y tripteína, constituida por la fuente
de nutrientes carbono, nitrógeno, vitaminas y
minerales; es medio selectivo por la
concentración salina; son característicos por la
producción de ácidos los cuales modifican el
pH del medio y vira el pH de un color rojo al
amarillo. Crecen bacterias como estafilococos
a una temperatura de 33-37 °C durante un
tiempo aproximado de 18 a 24 hrs. (Britania,
Desconocido)
Los microorganismos que pueden crecer en él
son:
● Staphylococcus aureus
● Staphylococcus epidermidis
● Estafilococos S. epidermidis
● Micrococos
● Bacterias gram negativa
(Instrucciones de uso medio en placa, 2023)
Czapek
El medio Czapek está compuesto por nitrato
de sodio, fosfato dipotásico, sulfato de
magnesio, cloruro de potasio, sacarosa y
potasio; el nitrato es utilizado como fuente de
carbono y fuente de nitrógeno, utilizado en
muestra de suelo, vegetales, granos, aire,
insectos, etc, es incubado a 28°C por 5 a 7
días.
Los microorganismos que crecen en el medio
son:
● Aspergillus brasiliensis
● Penicillium aurantiogriseum
● Candida albicans ATCC
● Candida albicans por clamidosporas
● Penicillium atrovenetum
(Universidad de Carabobo, 2019)
McConkey:
Es un medio diferencial que aísla bacilos
gramnegativos fermentadores y no
fermentadores de lactosa, se utiliza con
frecuencia el aislamiento de coliformes,
normalmente los microorganismos de lactosa
son de color rojo ladrillo. Crece a 37 °C
durante 18 a 24 hrs (Dickinson and Company,
2014)
Los microorganismos que pueden crecer en él
son:
● E. coli
● Enterobacter
● Klebsiella
● Proteus
● Salmonella
● Shigella
● Pseudomonas
Murashige y Skoog:
Es un medio de crecimiento a base de agar rico
en nutrientes que se usa como estándar para el
cultivo de células y tejidos vegetales in vitro.
Contiene una combinación equilibrada de
macronutrientes, micronutrientes y vitaminas
esenciales para el crecimiento y el desarrollo
de las plantas. El medio suele complementarse
con reguladores del crecimiento vegetal, como
auxinas y citoquininas, para estimular la
división y diferenciación celular.
Se utiliza en diversas aplicaciones, como la
propagación de nuevas variedades vegetales,
producción de metabolitos secundarios,
transformación genética de plantas,
mantenimiento de líneas celulares vegetales,
embriogénesis somática y micropropagación.
Planteamiento del problema:
En estas prácticas se desarrollaron los
procesos de selección para un futuro
escalamiento de microorganismos con el fin de
obtener un biorreactor con un producto útil en
la manera de biomasa o un metabolito que sea
benéfico a nivel industrial.
Justificación:
En la industria actual un rol importante para el
biotecnólogo es el desarrollo de productos a
base de microorganismos por su alta tasa de
reproducción, aprovechamiento de espacio y
costo, muchos de estos productos siendo
obtenidos de metabolitos a partir de
biorreactores, resultando más baratos de
producir comparados a un compuestos
sintéticos con rendimientos bajos.
Es por ello que seguir desarrollando las
aptitudes de selección y aprovechamiento de
microorganismos es fundamental para
investigaciones y proyectos futuros.
Objetivos
General
● Por medio de bacterias, hongos y
plantas se busca la obtención de
biomasa para escalar a un biorreactor
y aprovechar sus productos
metabólicos.
Específicos
● Conocer los productos pueden crecer
en los diferentes agares.
● Determinar cuáles agares nos ayudan
al crecimiento de los microorganismos
previamente elegidos.
 ● Identificar de que muestra Método:
obtendremos, bacterias, hongos y
plantas. Resultados:
● Eficientar el metabolito seleccionado. (Etapa 1)

Hipótesis:
Si los organismos seleccionados presentan
crecimiento rápido y adaptación idónea al
proceso de escalamiento, añadiendo que se
pueda identificar algún metabolito útil,
tendremos un candidato potencial para aislar
un producto del biorreactor

Figura 1: Medio de cultivo líquido para la

inoculación de la bacteria
seleccionada(caldo nutritivo).

Figura 2:Visualización microscópica del

frotis de la muestra de hongos proveniente
de la cáscara de aguacate.

Figura 3: Visualización microscópica del

frotis de la muestra de hongos
provenientes de la semilla de Aguacate
 Mandarina
Caldo nutritivo Tamaño: Grande
Transparencia:
Muestra de pera Tinción Forma Transparente
Gram Brillo: Brilloso
Color: Blanco translúcido
(+), (-) Cocos y Elevación: Plana
bacilos

(100x)
Esporangio
Calabaza
Tamaño: Mediano
Transparencia: Opaco
Brillo: Brilloso
Color: Blanco/salmón
Elevación: Elevada

Tabla 1. Morfológica microscópica de la

biomasa de la muestra de pera en caldo
nutritivo(mixto). (100x)
Hifas
(Sesión 2)
Semilla aguacate
Tamaño: Pequeño
Medio Czapek (Tinción con Transparencia:
Translúcido
Microscópica Macroscópica Brillo: Brilloso
Color: Salmón
Cáscara de Aguacate Textura:
•Colonia “1”. Elevación: Elevada
Tamaño: Mediano
Transparencia: Opaco
Brillo: Sin Brillo
Color: Blanco (100x)
Textura: V Hifas
Elevación:
Consistencia: pegajosa
(100x) Tabla 2. Morfológica microscópica y
Hifas macroscópica de los cultivos de hongo en
Colonia “2” el medio Czapek incubados por una
Tamaño: Pequeño semana a 37°C a …..rpm
Transparencia: Opaco
Brillo: Sin Brillo
Color: Blanco Al final de visualizar su morfología
Textura: V microscópica, descartamos una de las dos
Elevación: Elevada
Consistencia: Rugosa
placas de calabaza y la colonia “2” en la
placa de cáscara de aguacate, al ser
[Bacterias Gram (-)] identificadas como bacterias. Optamos por
(100x) la muestra de mandarina al lograr
visualizar con facilidad esporangios en su
estructura fúngica.
 (Etapa 3)

Figura 4. Crecimiento de hongo

proveniente de mandarina tras una
semana en incubación en Caldo Rojo Figura 7. Comparación del medio Rojo
Fenol Dextrosa Fenol Dextrosa con la muestra de la
esperada bacteria proveniente de pera 1
semana después de incubación.

Figura 5. Visualización de biomasa de las

bacterias de la muestra de pera al fondo
del matraz con caldo Rojo Dextrosa
Figura 8. Comparación del medio Rojo
Fenol Dextrosa con la muestra de hongo
de mandarina 1 semana después de
incubación.

Figura 6. Visualización de crecimiento de

raíces a partir de la muestra de planta en
medio Murashige y Skoog.
 Medio Murashige y Skoog. Análisis de resultados:
Muestra de planta Tinción Forma Durante esta fase de escalamiento se
Gram utilizó solo una colonia bacteriana
desconocida debido a la pérdida de las
(+), (-) Cocos otras muestras a causa de desecación de
y los medios agar iniciales, debido a la
bacilos
ausencia de humedad en la incubadora.
Esta colonia resultó ser mixta de unos
cocos Gram (+) y unos bacilos Gram (-),
los cuales podrían ser simbióticos por la
aparente uniformidad de la colonia. En la
selección de hongos, el único espécimen
utilizado fue el proveniente de la
mandarina, debido a la posible
contaminación de los otros medios Czapek
los cuales revelaron ser cultivos mixtos al
(100x)
observarse, y el caso de dos placas, en los
Tabla 3. Morfológica microscópica de la que solo crecieron bacterias y no
muestra de la fase líquida en el medio permitieron el crecimiento de hongos. Los
Murashige y Skoog con raíz de planta. cultivos se desarrollaron de manera
apropiada, observándose el aumento de la
Caldo Rojo Fenol y Dextrosa biomasa disponible.
Muestra de pera Tinción Bacteria
Gram Forma Conclusiones:
Para este proyecto se busca que por medio
(+) y(-) Cocos
de una selección de organismos como
bacterias, hongos y plantas se logre llevar
la producción de su biomasa desde un
matraz pequeño hasta un biorreactor y
aislar sus correspondientes productos.

En el medio Skoog, aunque la planta

presentó crecimiento de raíces, hubo
contaminación por bacterias Gram (-) y
(+).

Y en el caldo de Rojo Fenol y Dextrosa

(100x) con la muestra de la pera seleccionada
Además de bacterias, inicialmente como bacteria, creció una
presencia de levadura
levadura fermentadora, posiblemente….
fermentadora
Tabla 4. Morfológica microscópica de la
Planteamos aislar …. a partir de la
muestra de la biomasa de la muestra de
levadura fermentadora de la pera.
pera en el caldo Rojo Fenol Dextrosa.
Para poder continuar, esperamos la
correcta adaptación de los organismos
aislados al medio del biorreactor y un
crecimiento sin contaminaciones.

Referencias:
Sal y manitol (S/f-b). Britanialab.com.
Recuperado el 22 de febrero de 2023, de:
https://www.britanialab.com/back/public/uploa
d/productos/upl_607073c954fa9.pdf

Previsto, U. (s/f). BD Mannitol Salt Agar.

Www.bd.com. Recuperado el 22 de febrero de
2023, de
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8771

Czapek Scharlab. (s/f). Scharlab.com.

Recuperado el 22 de febrero de 2023, de
http://www.scharlab.com

Gil, M. (2019, abril 1). Agar Czapek:

fundamento, preparación, usos y limitaciones.
Lifeder. https://www.lifeder.com/agar-czapek/c

Agar Macconkey (S/f-c). Ucv.ve. Recuperado

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BM. Previsto, U. (s/f-a). BD MacConkey II

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