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Laboratorio de Biología General

Práctica N°2
LABORATORIO DE MORFOLOGÍA BACTERIAL
Presentado por Ana Soffía Gómez Arias y José Manuel Cardona Osorio. Docente Ricardo Soto
Agudelo. Laboratorio de Biología General. Programa de Química. Facultad de Ciencias Básicas
y Tecnologías. Universidad del Quindío. Armenia. Fecha de entrega septiembre de 2019

1. Resumen

En el siguiente artículo se exponen las diferentes morfologías que presentan las

bacterias. En este se realizó un procedimiento para identificar y determinar los tipos y

estructuras de las bacterias que se encuentran presentes en alimentos como el yogurt y el

vinagre de cocina. Para la observación e identificación de estas bacterias, por medio del

uso del microscopio óptico, se realizó una tinción con safranina, alcohol cetona, lugol y

cristal violeta. En estos se pudo observar bacterias como: Streptococcus salivarius subsp.

thermophilus, Lactobacillus delbueckii subsp. bulgaricus y Acetobacter aceti. A través de

los procedimientos realizados se logró conocer e identificar la morfología bacteriana.

2. Introducción

Las bacterias, pertenecientes así cada célula bacteriana hija

al reino procariota, son poseerá el mismo genoma.

microorganismos unicelulares que se Las bacterias se pueden

reproducen por fisión binaria, dividir en dos grupos, las

replicando su ADN (ácido arqueobacterias las cuales comprende

desoxirribonucleico) portador de la bacterias sin peptidoglicano que

información genética de la bacteria, viven en condiciones ácidas calientes

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y medios salinos, y las eubacterias reproducen por división simple. El

que poseen peptidoglicano y debido a tamaño de la célula eucariota es

esto viven en organismos vivos, el mayor que el de la procariota. Los

suelo o agua. procariotas no poseen citoesqueleto,

“Como característica a diferencia de los eucariotas. Otra

principal, los procariotas no poseen diferencia es la presencia de fimbrias

compartimientos intracelulares o pilis en las bacterias. Los

delimitados por membranas, por lo procariotas pueden poseer flagelos,

que carecen de membrana nuclear, a mientras que los de los eucariotas si

diferencia de los eucariotas. También los poseen, éstos tienen una

es importante destacar que el ADN estructura más compleja.”1

procariota es circular y cerrado, El tamaño de las bacterias se

mientras que el eucariota se organiza encuentra entre 0,5 y 3 µm, las cuales

en cromosomas individuales y se solo es posible observarlas por medio

asocia a proteínas de tipo histonas. de un microscopio óptico o

Las bacterias poseen una pared microscopio electrónico. Para el uso

celular compuesta por peptidoglicano del microscopio óptico se utiliza el

(a excepción de los Mycoplasmas) objetivo de inmersión (100X) con

mientras que las células eucariotas no una gota de aceite de inmersión en la

tienen este tipo de pared. La muestra a observar. Por medio de

reproducción en los eucariotas puede esto es posible diferenciar las

ser tanto sexuada como asexuada, posibles morfologías que presentan

mientras que los procariotas se las bacterias, en forma de cocos,

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bacilos y espirilos (como se muestra de otros tipos celulares, las

en la Figura 1). diferenciales permiten la

diferenciación de las bacterias ya que

usan diferentes colorantes que se

comportan distinto según el

microorganismo en cuestión, por

último, las especiales son utilizadas

para reconocer distintas estructuras

como la cápsula, el núcleo, los

flagelos, los esporos, entre otros.

Previo a la coloración se debe


Figura 1. Morfología: 1. Cocos; 2. extender una capa fina de muestra
Diplococo; 3. Cocos en cadenas; 4.
Cocos en racimos; 5. Cocos en tétradas;
6. Cocobacilos; 7. Bacilos; 8. Bacilos sobre una lámina y debe ser secada y
bordes redondeados; 9. Bacilos bordes
rectos; 10. Bacilos fusiformes; 11, 12. fijada. Con esto se obtiene la muerte
Bacilos curvos; 13 al 15. Espiroquetas.
de microorganismos, la adhesión a la

Las coloraciones que se lámina y la conservación de la

utilizan para reconocer las bacterias morfología de las bacterias.

se pueden dividir en: simples, Una de las coloraciones más

diferenciales y especiales. Las utilizadas es la tinción de Gram, la

simples permiten observar la cual permite clasificar a las bacterias

existencia de bacterias, su como Gram positivas y Gram

morfología, su agrupación, la negativas, las primeras presentan una

presencia de esporos y la existencia coloración azul violeta y las

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segundas toman un color rosado o irregular o filamentosa. Puede

rojo, como se muestra en la Figura presentar bordes ondulados o lisos, la

2. superficie de la colonia también es

orientadora y puede ser: plana,

convexa, mamelonada o umbilicada.

3. Metodología

Figura 2. Tinción bacterias Gram Tinción de Gram para el yogurt


positivas y Gram negativas.
Se tomó una pequeña

Esta diferencia de tinción se cantidad de yogurt y se extendió una

explica debido a las diferencias capa fina de este en la lámina

fundamentales de la envoltura celular (Figura 4).

de las dos clases de bacterias (Figura

3).

Figura 3. Diagrama de la pared


bacteriana. Figura 4.

Las colonias bacterianas


Para realizar la fijación de la
pueden presentar diferentes
muestra, se tomó el porta con la
morfologías dependiendo del borde y
muestra hacia arriba y se pasó por la
la forma en que se eleva sobre el

medio de cultivo, puede ser circular,


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llama del mechero hasta que se secó

la muestra (Figura 5).

Figura 6.
Luego, se decoló la muestra con

alcohol cetona por 5 a 10 segundos,

se lavó con agua destilada, se añadió


Figura 5.
unas gotas de safranina durante 30

Para eliminar la grasa de la segundos, se lavó con agua destilada

muestra, se colocó la lámina sobre (Figura 7) y se procedió a la

una caja de Petri y se le aplicó unas observación con aceite de inmersión

gotas de alcohol cetona, se esperó en el microscopio con el objetivo de

unos minutos y se lavó con agua 100X (Figura 8).

destilada. Posteriormente, se agregó

unas gotas de cristal violeta durante

30 segundos, sobre la muestra, se

lavó con agua destilada y se añadió


Figura 7.
lugol de nuevo durante 30 segundos

y luego se lavó con agua destilada

(Figura 6).

Figura 8.

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Figura 9.

Tinción de Gram para el vinagre

Se colocó una gota de agua

destilada en un portaobjetos limpio,

mediante el uso de una micropipeta,


Figura 10.
se midieron 150 µL de vinagre de

cocina y se esparcieron en la gota de

agua destilada (Figura 9), este se

selló con la llama del mechero de

alcohol y posteriormente se adicionó Figura 11.

una gota de cristal violeta durante 5


4. Resultados
minutos (Figura 10), se lavó con
Se pudo observar diferentes
agua destilada para eliminar el
morfologías de las bacterias
exceso de colorante, se tapó el
presentes en el yogurt, del cual se
preparado con el cubreobjetos y se
identificaron 2 bacterias las cuales
procedió a la observación en el
presentaban forma de cocos en
microscopio con el objetivo 100X y
cadena, cocos en tétradas y bacilos
una gota de aceite de inmersión
alargados de extremos redondeados.
(Figura 11).
En la Figura 12 y Figura 13 se puede

observar la bacteria identificada

como Streptococcus salivarius

subsp. thermophilus, la cual presenta

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la forma de cocos en cadena y cocos Clase: Bacilli

en tétradas. Orden: Lactobacillales

Familia: Lactobacillaceae

Género: Streptococcus

La segunda bacteria

identificada en el yogurt se conoce

por el nombre científico de

Lactobacillus delbueckii subsp.

bulgaricus, la cual se pudo observar

en forma de bacilos alargados de


Figura 12. Cocos en cadena.
extremos redondeados, como se

muestra en la Figura 14.

Figura 13. Cocos en tétradas.

Figura 14. Bacilo alargado de extremo


redondeado.
Nombre científico: Streptococcus

salivarius subsp. thermophilus


Nombre científico: Lactobacillus
Dominio: Bacteria
delbueckii subsp. bulgaricus
Filo: Firmicutes
Dominio: Bacteria

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Filo: Firmicutes Clase: Alphaproteobacteria

Clase: Bacilli Orden: Rhodospirillales

Orden: Lactobacillales Familia: Acetobacteraceae

Familia: Lactobacillaceae Género: Acetobacter

Género: Lactobacillus

En el procedimiento del 5. Discusión

vinagre se pudo observar la bacteria Como ya se ha mencionado

identificada como Acetobacter aceti, anteriormente, en la muestra de

la cual poseía forma de bacilos yogurt fueron identificadas dos

ligeramente curveados, como se bacterias, la Streptococcus salivarius

puede observar en la Figura 15. subsp. thermophilus es una especie

de bacteria Gram positiva anaerobia

facultativa, debido a la tinción que se

puede observar, en la Figura 12 y

Figura 13, de color azul violeta

característico de las bacterias Gram

positivas, debido a que la pared de

esta retiene el colorante y sufre una


Figura 15. Bacilos.
deshidratación que impide la salida

Nombre científico: Acetobacter de este, y es anaerobia facultativa ya

aceti que puede desarrollarse tanto en

Dominio: Bacteria presencia como en ausencia de

Filo: Proteobacteria oxígeno y esto quiere decir que es

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capaz de generar energía en forma de La bacteria obtenida en el

ATP. Este tipo de bacterias se vinagre, Acetobacter aceti, es una

encuentran en productos fermentados bacteria Gram negativa, puede

lácticos y es usada en la producción observarse en la Figura 15, la cual

de yogurt. Su pared celular está presenta una tinción fucsia ya que no

compuesta por N-acetilglucosamina posee una capa de peptidoglicano lo

y ácido N-acetilmurano unidos por suficientemente gruesa como para

enlaces de éter, esta característica le retener las partículas del colorante,

da la facilidad de soportar elevadas sin embargo, en este caso presenta un

temperaturas. color más oscuro debido a que la

La segunda bacteria cantidad del colorante cristal violeta

identificada en el yogurt, añadido a la muestra fue mayor al

Lactobacillus delbueckii subsp. indicado. Este tipo de bacterias son

bulgaricus, es una bacteria Gram aeróbicas obligadas, así que para su

positiva (posee una tinción de color desarrollo necesitan un ambiente con

azul violeta como se observa en la una amplia disponibilidad de

Figura 14) y catalasa negativa, es oxígeno.

homofermentativa produciendo D-

ácido láctico exclusivamente. Todas 6. Conclusiones

las cepas fermentan glucosa, 1. Se logró realizar la identificación

fructosa, manosa y lactosa. No de las bacterias esperadas en el

presentan flagelo, es decir, no son yogurt y en el vinagre de cocina.

móviles.

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2. En conclusión, se identificó la Signature=1a2e1e4076fecab86ebdc1


a40324e05c0e60f064d0cf84329f9bb
diferencia de tinción, frente al
3c3d3984c7e
colorante, de las bacterias Gram
2. Vargas-Flores, T. & Kuno-Vargas, A
positivas y las Gram negativas. . (2014). Morfología bacteriana. Revi
sta de Actualización Clínica, 49(2), 2
3. Se utilizó la tinción de Gram para
594-2598.
reconocer la morfología de las
3. Lira Gómez, C. F. (s.f.).
bacterias reconocidas en las Lactobacillus delbueckii:
características, morfología.
muestras.
Recuperado 28 septiembre, 2019, de
https://www.lifeder.com/lactobacillus
7. Referencias -delbrueckii/
4. Gil, M. (s.f.). Streptococcus
1. Pírez, M., & Mota, M. (s.f).
thermophilus: características,
Morfología y estructura bacteriana.
morfología. Recuperado 28
Recuperado 28 septiembre, 2019, de
septiembre, 2019, de
https://s3.amazonaws.com/academia.
https://www.lifeder.com/streptococcu
edu.documents/43169930/Morfologi
s-thermophilus/
ayEstructuraBacteriana.pdf?
5. López, B. (s.f.). Acetobacter:
response-content-disposition=inline
características, hábitat y especies
%3B%20filename
principales. Recuperado 28
%3DTEMAS_DE_BACTERIOLOG
septiembre, 2019, de
IA_Y_VIROLOGIA_MEDIC.pdf&
https://www.lifeder.com/acetobacter/
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