IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS CAUSANTES DE PODREDUMBRES EN

FRUTAS Y HORTALIZAS
PINZÓN SIERRA Darcy, SERRANO FERREIRA Carolina, SUESCÚN GAMBOA Camilo.

Grupo: A, Microbiología de cereales, Departamento de Ciencias Básicas, Programa

Microbiología, Universidad de Pamplona

METODOLOGIA

observación en el se realizó muestras en

estereoscopio de fresco con azul
limpieza y desinfección muestras de curuba, lactofenol, las cuales se
auyama, zanahoria y visualizarón en el
lechuga microscopio.

se tomó una parte de la con ayuda de un asa

zona afectada de la microbiologica se tomó
fruta o verdura y se muestra de curuba, auyama,
realizó siembra por zanahoria y lechucha y se
punción en agar PDA inoculó en caldos nutritivos

Se llevó a incubar por se realizo lectura se realizaron microcultivos

24 - 48 h a 25°C macroscopica y los cuales se llevaron a
(Muestras en agar microscopica de los incubar por 6 días a 25°C
PDA) y a 37 °C cultivos y se procedio a y posteriormente se
(Muestras en caldo analizar y caracterizar observaron
nutritivo) los hongos y bacterias microscopicamente
RESULTADOS Y ANÁLISIS

A continuación se demuestra microfotografía de bacterias tras tinción Gram aisladas de un

medio nutritivo después de haberlas obtenido previamente en un medio selectivo agar EMB

Imagen 1. Microfotografia de bacterias tras tinción Gram. Bacilos cortos Gram negativos. A)
Bacterias en Muestra de Auyama; B) Bacterias en Muestra Zanahoria; C) Bacterias en muestra de
Lechuga.

La microfotografía presente en la imagen 1 para tres muestras: lechuga, Zanahoria y Auyama denotan
ser bacterias en forma de bacilos cortos Gram negativos después de inocular e incubar en medio
selectivo para bacterias Gram negativas Agar EMB (Eosina Azul de Metileno).
En el medio Agar EMB se obtienen colonias irregulares, mucoides, y de color rosa violeta. Por otro
lado, no se evidenció crecimiento característico de Escherichia coli (verde metalizado). No es posible
establecer con claridad los géneros de bacterias desarrolladas en dicho medio ya que no se realizaron
pruebas confirmatorias y bioquímicas. Sin embargo, es evidente que el crecimiento bacteriano en el
medio indica la presencia de bacterias entéricas o coliformes los cuales representan contaminación
fecal ya sea en el agua de riego o en el suelo del cultivo, aunque se ha demostrado que estas bacterias
son comunes en estos ambientes de campo. Así mismo, son indicadores de deficiencia en el manejo
higiénico sanitario de las frutas y verduras analizadas que representan un riesgo a la salud del
consumidor
 Identificación de Mohos

A A B

B C D

Imagen 2:. Afectaciones macroscópicas presentes en los diferentes alimentos

analizados. (A) Podredumbre de curuba. (B) Podredumbre presente en la lechuga.
(C) Podredumbre en zanahoria. (D) Podredumbre en auyama.

Las características obtenidas a cada una de las muestras (Imagen 2) se llega a determinar que
cada una presentaba alguna afectación consistente por lo tanto se hizo necesario identificar
tanto macroscópica como microscópicamente. La curuba (Passiflora tripartita var.
mollissima) presentó un tipo de podredumbre grisácea en otras zonas filamentos blancos con
puntos negros con ablandamiento; La lechuga presentó zonas degradadas, pero al preparar el
primer montaje en fresco con azul de lactofenol no se logró visualizar estructuras de mohos;
La zanahoria presentó podredumbre húmeda y ennegrecimiento apical; La Auyama se denota
esporangios de color negro
A continuación, se demuestran los hongos identificados directamente desde microcultivos de
tres muestras diferentes: Curuba, Lechuga y Auyama. A su vez se describe características
macroscópicas en agar OGY y microscópicas (microfotografías tomadas de microcultivos)

.
 Esporangio

Esporangióforo
Esporangiosporas

Esporangio

Esporangióforo
Esporangiosporas

Imagen 3. Aislamiento en Curuba. Identificación

Imagen 4. Aislamiento en lechuga. Identificación
macroscópica: presenta micelio con color blanco,
macroscópica: Micelio algodonoso de color blanco e irregular
algodonoso e irregular con esporangios negros.
con esporangios negros.
Identificación microscópica: Esporangio globoso negro con
Identificación microscópica: Esporangio globoso de color
abundantes esporangiosporas, Esporangióforo salientes
negro, Esporangióforo, salientes desde hifas segmentadas
desde hifas segmentadas

1
2

Imagen 5. Aislamiento en auyama. Identificación Imagen 6. Microfotografía En fresco con azul de

macroscópica: presenta crecimiento con color crema, Lactofenol. 1 Esporangio globoso
relativamente viscoso e irregular. multiesporado,2) Columela en forma de sombrilla;
Identificación microscópica: no es posible observar cuerpos 3) Esporangióforo; 4) Rizoide; 5)
fructíferos, solo se observan un conjunto de hifas organizadas Esporangiosporas
en sectores compactos formando esa peculiar estructura.
Las imágenes 3 y 4 denotan el crecimiento de un mismo hongo con base a sus características
macroscópicas y microscópicas. La identificación de estos hongos se establece usando la
clave dicotómica establecida por Carrillo Leonor, basándonos en características
microscópicas.

Se determina que presuntivamente el hongo aislado de las muestras de curuba y lechuga

pertenece a el género Rhizopus spp que de acuerdo a su crecimiento comparado con la
literatura resulta similar ya que crece formando abundante micelio de color blanco que cubre
la fruta en los sitios de infección con esporangios grises o negros ( Kwon J . et.al) que se
logran observar bajo el microscopio (imagen 3,4,6) y a su vez las especies de Rhizopus spp
forman rizoides en la base de los esporangióforos. Comúnmente se les conoce como el moho
del pan no obstante se ha demostrado que causa el deterioro y podredumbre húmeda en fresas,
otras bayas, frutas y verduras con alteraciones en el tejido de la planta, presencia de masa
necrótica de color pardo y la aparición de abultamientos algodonosos. También se han aislado
de granos de cereales, nueces y carne. Por lo tanto no es de extrañarse que se lograra aislar
de las muestras analizadas en éste estudio Aunque, generalmente sean afectadas por Botrytis
cinérea y Colletrotichum spp en Curuba, Sclerotinia spp en lechuga y Alternaria radicina
en Zanahoria

Cabe resaltar que en este documento no se demuestra microfotografía de zanahoria debido a

que no se le realizó microcultivo ya que no se había hecho un previo repique por falta de
disponibilidad de agar OGY. Sin embargo, su crecimiento inicial mostró el mismo micelio
algodonoso y con esporangios negros en agar PDA. (Imagen 6 Anexo). Por otro lado, es
posible que se haya presentado un error sistemático asociado al manejo de las diferentes
muestras lo que causo una posible contaminación de las mismas ya que a la hora de realizar
las primeras siembras en agar PDA de las zonas lesionadas estuvieron juntas una sobre otra
demostrándose así en las cajas de 3 las muestras (Curuba, Lechuga y Zanahoria) la presencia
masiva del mismo micelio característico de Rhizopus spp.

La imagen 5 correspondiente al aislamiento del hongo presente en Auyama resulta confuso

ya que comparado con la caracterización inicial (Imagen 1. D) se lograba visualizar
esporangios que no se desarrollaron en las cajas de PDA, sino que las colonias obtenidas eran
cremosas e irregulares. Posteriormente en la microfotografía correspondiente al aislamiento
en microcultivos (Imagen 4) se demuestra estructuras peculiares que no son identificadas ya
que la clave usada en éste análisis para su clasificación no posee información acerca de dichas
estructuras.
CONCLUSIONES
Se logró identificar diferentes tipos de podredumbre, las cuales son una enfermedad a nivel
mundial, ya que traen problemas económicos y producen un riesgo para los consumidores,
ya que son vectores de diferentes enfermedades; para evitar las podredumbres se deben contar
con un plan de vigilancia y control.
Se logró el aislamiento del hongo Rhizopus spp, el cual estuvo presenten en todas las
muestras, también se logró apreciar las diferentes estructuras que presentaron los diferentes
hongos.

REFERENCIAS
Castillo L. Clave de Hongos de Alimento y Forrajes. Recuperado de
file:///C:/Users/CARACOLAS/Downloads/10htextoclave%203.pdf
( Kwon J . et.al) (2011) First Report of Rhizopus oryzae as a Postharvest Pathogen of Apple
in Korea Recuperado de https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3385096/
L.B. Bullerman (2033) Learn more about Rhizopus spp. Encyclopedia of Food Sciences and
Nutrition (Second Edition) Recuperado de. https://www.sciencedirect.com/topics/food-
science/rhizopus
Sygenta. Podredumbre gris y blanca en Lechuga. Recuperado de
https://www.syngenta.es/cultivos/lechuga-escarola-espinaca/enfermedades/podredumbre-
gris-podredumbre-blanca
(Miranda D. et al). (2009) Sociedad Colombiana de Ciencias Hortícolas. Cultivo, poscosecha
y comercialización de las pasifloráceas en Colombia: maracuyá, granadilla, gulupa y curuba
http://fedepasifloras.org/es/wp-content/uploads/2018/01/Cultivo-poscosecha-y-
comercializacio%CC%81n-de-las-pasiflora%CC%81ceas-en-Colombia.pdf