Zalazar Kevin | Biologia I TN.

TP INTEGRADOR 6
1. El ADN es un polímero compuesto por nucleótidos. Estos consisten en bases de
purina y pirimidina unidas a azucares fosforilados. Las bases nitrogenadas que son
purinas y pirimidinas son Adenina, Guanina, Citosina y Timina. Las bases se ligan a
los azúcares (2’ Desoxirribosa en el ADN) y conforman los nucleósidos. Finalmente,
los nucleótidos tienen uno o más grupos fosfato ligados a su carbono 5’.
El azúcar es un hidrato de carbono y el grupo funcional que constituye el -OH en el
carbono 2’ de la ribosa lo diferencia de la desoxirribosa, que en el ADN presenta
solamente un Hidrogeno.
La polimerización de nucleótidos para formar los ácidos nucleicos implica la
formación de enlaces fosfodiéster entre el 5’ del fosfato de un nucleótido y el 3’
hidroxilo de otro.
2.
a. Las ADN polimerasa sintetizan ADN sólo en sentido 5’ a 3’ añadiendo un dNTP al
grupo 3’ hidroxilo de una cadena creciente y sólo pueden hacerlo en una hebra
cebadora ya existente que esté unida a la hebra molde, ya que las polimerasas no
son capaces de sintetizar de novo. Los primers son fragmentos cortos de ARN
complementarios a la hebra molde a amplificar. Por otro lado, los
desoxinucleotidos trifosfatos funcionan como fuente de energía para la unión de
los sucesivos nucleótidos y también como sustratos.

b. En la PCR se utiliza la temperatura para lograr desnaturalizar la molécula de ADN y

permitir que la polimerasa pueda sintetizar la hebra de ADN de interés, es por ello
que no es necesaria la enzima helicasa para que catalice el desenrollamiento del
ADN.

Por otro lado, los Primers están diseñados para unirse a regiones específicas por la
complementariedad de bases que presenta éste y la hebra de ADN. El fundamento
de la técnica es que si la región complementaria al Primer está presente en el genoma se produzca su
amplificación.
Sin embargo, las primasas también sirven para sintetizar los cebadores de los fragmentos de Okazaki y permitir
su ulterior elongación en condiciones fisiológicas donde habría una hebra rezagada molde en la horquilla de
replicación, lo cual no ocurre en la PCR ya que sólo se sintetiza de manera continua en sentido 5’ a 3’ a partir de
Primers específicos.

c. El objetivo de las variaciones de la temperatura durante la amplificación es permitir la separación de las hebras
del ADN que se quiere amplificar y que posteriormente a temperaturas relativamente más bajas la enzima
polimerasa pueda, en función de si hay hibridación entre el primer y la cadena molde, replicar el ADN de interés.
Haciendo este proceso sucesivas veces se obtiene la amplificación exponencial del ADN.