CARRERA: MEDICINA CÁTEDRA: BIOQUÍMICA

Guía 3. MODULO TEÓRICO PRÁCTICO VI.

METABOLISMO DE HIDRATOS DE CARBONO: DEGRADACIÓN OXIDATIVA DEL

PIRUVATO: CICLO DE KREBS Y CADENA RESPIRATORIA

Objetivos:
Describir enzimas, coenzimas y regulación de conversión de piruvato a acetilCoA.
Explicar el funcionamiento del Ciclo: enzimas y coenzimas involucradas, regulación, balance
energético.
Describir la naturaleza de los componentes de la cadena de transporte electrónico
Justificar la secuencia en que se disponen los componentes de la cadena de transporte
electrónico
Explicar cómo se re-oxida el NADH en condiciones aeróbicas.
Explicar los principios básicos de la hipótesis quimiosmótica
Reconocer el control coordinado de la fosforilación oxidativa, la glucólisis y el Ciclo de Krebs
Describir y justificar el efecto de desacoplantes e inhibidores de la cadena

BIBLIOGRAFIA:

• Blanco, A., QUÍMICA BIOLÓGICA. Editorial El Ateneo. Ediciones 7ª, 8ª, 9ª.
• Devlin, T., BIOQUÍMICA. Editorial Reverté S.A. Barcelona. 3ª y 4ª edición.
• Stryer, Lubert; Berg, Jeremy M.; Tymoczko, John L. BIOQUÍMICA. Editorial Reverté S.A.
2003.
• Voet, Donald; Voet, G. Judith; Pratt, Charlotte W. Fundamentos de Bioquímica La vida a nivel
molecular. Editorial Médica Panamericana 2011. 2a edición.
• Nelson D.L., Cox M. M. LEHNINGER PRINCIPIOS DE BIOQUÍMICA. Editorial Omega, 2ª y 3ª
edición.

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Cuestionario Guía 3 Tema VI (A):

HIDRATOS DE CARBONO II: DEGRADACIÓN OXIDATIVA DEL PIRUVATO

I. Descarboxilación oxidativa del piruvato

1. a) ¿En qué organela tiene lugar la decarboxilación oxidativa del piruvato y cómo llega el
piruvato formado en la glucólisis a este compartimiento subcelular?
b) ¿Qué otras fuentes pueden aportar piruvato? Identifique cuantos carbonos tiene el piruvato.
2. Existe una variedad de trastornos del metabolismo del piruvato. Suponga que el defecto radica
en una deficiencia de Piruvato deshidrogenasa, PDH.
a. Escriba la reacción neta del proceso bioquímico involucrado. ¿Es un proceso reversible?
b. Mencione la composición del complejo enzimático.
c. ¿Cómo se hallarán los niveles plasmáticos de lactato y piruvato en los pacientes con
deficiencia del complejo?
d. Si el piruvato no puede ser convertido en acetil-CoA, ¿qué otra fuente de acetil-CoA utilizarán
los tejidos?
e. ¿Qué tipo de dieta beneficiaría a los pacientes con esta deficiencia enzimática?
f. Reconozca los diferentes mecanismos de regulación del complejo Piruvato Deshidrogenasa:
- Describa la regulación covalente del complejo PDH.
- ¿Cuál es el efecto de la insulina sobre el complejo? ¿Cuál es el efecto del calcio?
- Nombre los principales moduladores positivos y negativos.

II. Ciclo de Krebs o de los ácidos tricarboxílicos

3. Escriba la reacción neta del ciclo e indique cuál de los siguientes metabolitos experimenta una
oxidación neta a través del ciclo: α-cetoglutarato, succinato, citrato o acetil-CoA. Justifique.
4. ¿Por qué se dice que el Ciclo de Krebs es anfibólico y autocatalítico?
5. Explique porqué los siguientes factores afectan la velocidad del Ciclo de Krebs:
a) Disponibilidad de coenzimas oxidadas b) Actividad de la Piruvato deshidrogenasa
c) Transporte y β oxidación de ácidos grasos d) Concentración de ATP
6. a) Complete la siguiente tabla considerando el efecto de los moduladores en la regulación
del ciclo.
b) Indique el mecanismo regulatorio del citrato sobre la Citrato sintasa y el mecanismo
regulatorio del ATP y NADH sobre la Isocitrato deshidrogenasa.

TIPO
ENZIMA MODULADORES MODULACION
+ -

Citrato Sintasa Citrato

Succinil CoA
ATP
Isocitrato NADH
Deshidrogenasa Calcio
ADP
ATP
α-cetoglutarato
Calcio
Deshidrogenasa
Succinil CoA
NADH

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7. ¿Qué destino tienen los NADH y FADH2 producidos en el Ciclo de Krebs? Considere su
respuesta y los mecanismos regulatorios vistos en el ejercicio 6 y responda: ¿el ciclo de Krebs
es aeróbico o puede ocurrir en ausencia de oxígeno? Justifique su respuesta.

III. Cadena de transporte de electrones o cadena respiratoria

8. ¿A qué se denomina cadena respiratoria y como está organizada? (Esquematice).

9. Potencial de reducción. Marque lo correcto y corrija y justifique lo incorrecto:

a- El valor del potencial redox es una medida de la afinidad electrónica del par redox.
b- El valor de potencial de reducción o redox es más positivo cuando mayor es su afinidad
por los electrones.
c- Cuanto menor es la diferencia de potencial redox (∆E) entre dos pares conjugados,
mayor es la energía libre (∆G) liberada en la reacción de óxido-reducción.

10. Ordene las siguientes coenzimas, grupos prostéticos con actividad redox y el oxígeno, en
orden de afinidad electrónica creciente (potencial redox): citocromo a, O2, CoQ, FAD, citocromo
c, NAD+.

11. El complejo I: NADH deshidrogenasa promueve la siguiente serie de reacciones de óxido-

reducción en las cuales el Fe3+ y Fe2+ representan el hierro de los centros ferrosulfurados, CoQ
es la ubiquinona, CoQH2 es el ubiquinol y E es la enzima con FMN como grupo prostético.
a. Para cada una de las tres reacciones catalizadas por dicho complejo que se indican a
continuación, identificar: aceptor y dador de electrones, par redox conjugado, agente reductor y
agente oxidante:

1) NADH + H+ + E-FMN NAD+ + E-FMNH2

2) E-FMNH2 + 2 Fe3+ E-FMN + 2 Fe2+ + 2 H+
3) 2 Fe2+ + 2 H+ + CoQ 2 Fe3+ + CoQH2
NADH + H+ + CoQ NAD+ + CoQH2

b. Considerando la ecuación neta (en negrita) indique quién se oxida y quién se reduce como
consecuencia de todas las reacciones que ocurren en el complejo I de la cadena respiratoria.

IV. Fosforilación oxidativa.

Inhibidores y desacoplantes.
12. ¿Cuál es el mecanismo aceptado sobre el funcionamiento de la fosforilación oxidativa?

13. ¿Qué significa que la cadena de transporte está acoplada a la fosforilación oxidativa?

14. ¿Por qué la oxidación de succinato a fumarato produce una relación P/O de 2 mientras que
la oxidación de malato a oxalacetato produce una relación P/O de 3?

15. Los venenos de serpiente tienen elevada actividad de fosfolipasas y los lisoderivados por
ellas producidos son desacoplantes del tipo ionóforo.
a- ¿Cómo se afectará la formación del gradiente electroquímico planteado en la teoría de
Mitchell?
b- ¿Cómo se alterará el pH del espacio intermembrana?
c- ¿Qué ocurre con la velocidad de la cadena respiratoria mitocondrial?

16. a) El cianuro es uno de los venenos más potentes, explique su mecanismo de acción.

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b) El envenenamiento subletal con cianuro puede revertirse mediante la administración de

nitritos que oxidan la hemoglobina, a metahemoglobina (que tiene alta afinidad por el CN-). ¿Por
qué es efectivo este tratamiento?

17. ¿Por qué se inhibe el Ciclo de Krebs en un paciente que respiró monóxido de carbono CO?
¿Qué ocurre con la descarboxilación oxidativa del piruvato en ese mismo paciente? Justifique.

18. Si se monitorea el transporte electrónico midiendo la velocidad de consumo de O2 en una

suspensión de mitocondrias, dicha velocidad es alta solamente si se agrega un compuesto
oxidable (donador de electrones), ADP y Pi como se observa en la figura A:

I. Los resultados de este experimento demuestran que (marque la/s respuesta/s correcta/s):
a- La velocidad de la respiración mitocondrial se puede controlar por la [ADP]
b- La oxidación y la fosforilación están acopladas
c- La oxidación de succinato puede proceder sin la fosforilación concomitante de
ADP
II. La relación que se establece entre la [ADP] y la [O2] se denomina control respiratorio.
Explique cómo es esta relación en la cadena respiratoria.
III. Considerando las distintas pendientes de la curva, ¿qué estado correspondería a la célula
muscular en reposo y qué estado a la célula muscular en actividad?
IV. Explique los resultados obtenidos por el agregado de oligomicina y por el agregado luego
de 2,4-dinitrofenol que se observan en la figura B.
V. Responda: ¿Qué ocurre con la velocidad del consumo de oxígeno en presencia de un
desacoplante como 2,4-dinitrofenol? Justifique su respuesta.

19. ¿Por qué todas las vías y procesos analizados en esta guía requieren la presencia de O2?
Justifique de manera completa su respuesta.

20. Tanto el infarto de miocardio como la apoplejía son causados por la interrupción del aporte
de sangre (O2) a una porción del corazón o del cerebro, respectivamente.
a. ¿De qué forma es afectado el ciclo de Krebs en estos tejidos?
b. ¿Cómo se afectará la relación ATP/ADP? ¿Qué pasará con las bombas de membrana?
c. Considerando lo respondido en a y b describa el mecanismo por el cual se llega a la muerte
celular debida a isquemia en el músculo cardíaco.