Ciclo de Krebs y Cadena

transportadora de electrones

Óscar R. Fajardo Ramírez, PhD

 El ciclo de Krebs, o ciclo del ácido cítrico,
 Es una secuencia de reacciones químicas que se llevan a cabo en la mitocondria de las células eucariotas
como parte de la respiración celular. También se le llama el ciclo de los ácidos tricarboxílicos, porque el
ácido cítrico posee tres grupos carboxílicos en su estructura.
 El ciclo de Krebs es una ruta metabólica, es decir, una sucesión de reacciones químicas, que forman parte de
la respiración celular en todas las células aerobias, es decir que utilizan oxígeno. En organismos aeróbicos,
el ciclo de Krebs es parte de la vía catabólica que realiza la oxidación de hidratos de carbono, ácidos
grasos y aminoácidos hasta producir CO2, liberando energía en forma utilizable (poder reductor y GTP).
 Este ciclo consiste de 8 pasos. Se inicia con la reacción de oxalacetato, de 4 carbonos, con el acetato
activado en forma de acetil-CoA, para formar citrato o ácido cítrico, una molécula de seis carbonos. En los
pasos siguientes, el citrato pierde electrones y dos moléculas de dióxido de carbono, transformándose de
nuevo en oxalacetato, cerrando el ciclo.
 El acetil-CoA que entra al ciclo del ácido cítrico puede provenir de la glucólisis, siendo la glucosa la materia
prima para este proceso.
 El ciclo Krebs
..recibe su nombre en honor a su descubridor Sir Hans Krebs, quien
propuso los elementos clave de esta vía en 1937. Krebs estaba
estudiando el consumo de oxígeno en músculo pectoral de paloma, un
tejido con alta tasa de respiración, y realizó varias observaciones de
gran relevancia. En primer lugar, el citrato, el isocitrato y el cis-
aconitato estimulaban la oxidación de piruvato y el consumo de
O2, en cantidad desproporcionada respecto a las cantidades añadidas.
En segundo lugar, empleando malonato (inhibidor de la succinato
deshidrogenasa), lograba bloquear la oxidación del piruvato, lo que
indicaba su participación en la vía. Además, observó que las células
tratadas con malonato acumulaban citrato, succinato y α-
cetoglutarato, lo cual sugería que citrato y α-cetoglutarato eran
precursores del succinato. En tercer lugar, la administración al tejido
de piruvato y oxaloacetato provocaba la acumulación de citrato
en el músculo, lo que indicaba que son precursores del citrato. Con
base en estas observaciones experimentales Hans Krebs propuso una
ruta cíclica y su secuencia de reacciones. Este esquema inicial, con
ciertas modificaciones, dio lugar al ciclo de Krebs tal y como hoy lo
conocemos
Piruvato
Al final de la glucólisis nos quedan dos moléculas de piruvato a las que todavía se les puede extraer
mucha energía. La oxidación del piruvato es el siguiente paso en la recolección de energía restante en
forma de , aunque no se genera ATP directamente durante este proceso.

En eucariontes, este paso sucede en la matriz, el compartimento más interno de la mitocondria. En

procariontes, sucede en el citoplasma. En general, la oxidación del piruvato convierte al piruvato, una
molécula de tres carbonos, en acetil-CoA, una molécula de dos carbonos unida a la coenzima A, y
produce una molécula de NADH y una de dióxido de carbono. El acetil-CoA funciona como combustible
del ciclo del ácido cítrico en la siguiente fase de la respiración celular.
 Piruvato deshidrogenasa

Esta reacción es catalizada por un

complejo enzimático llamado
piruvato deshidrogenasa (PDH)
compuesto de tres enzimas:
piruvato deshidrogenasa (E1),
dihidrolipoil transacetilasa (E2),
y dihidrolipoil deshidrogenasa
(E3). La conversión de piruvato en
acetil CoA consta de tres pasos:
descarboxilación, oxidación y
transferencia del grupo acetilo
resultante a la coenzima A.
Piruvato deshidrogenasa
La piruvato deshidrogenasa es inhibida por sus productos, acetil-CoA y NADH. También está regulada
por fosforilación (catalizada por una cinasa) de tres residuos serina sobre el componente piruvato
deshidrogenasa del complejo de múltiples enzimas, lo que da por resultado decremento de la actividad,
y por desfosforilación (catalizada por una fosfatasa) que causa un aumento de la actividad. La cinasa se
activa por incrementos de las proporciones [ATP]/[ADP], [acetil-CoA]/[CoA], y [NADH]/[NAD+]. De
este modo, la piruvato deshidrogenasa y, por ende, la glucólisis, son inhibidas cuando se dispone de
ATP adecuado (y coenzimas reducidas para la formación de ATP), y también cuando los ácidos grasos
se están oxidando. En el ayuno, cuando aumentan las concentraciones de ácido graso libre no
esterificado, hay un decremento de la proporción de la enzima en la forma activa, lo que lleva a una
preservación de carbohidrato. En el tejido adiposo, donde la glucosa proporciona acetil-CoA para
lipogénesis, la enzima se activa en respuesta a insulina.
La función principal del ciclo del ácido
cítrico es captar los electrones que se
liberan de las moléculas al oxidarse
(pierden electrones). Estos electrones
son capturados por moléculas portadoras
para luego transformarlos en
adenosintrifosfato ATP, la molécula de
energía que utiliza la célula para realizar
sus funciones.
 Reactivos/ Productos/
Molécula Enzima Tipo de reacción
Coenzimas Coenzima
I. Citrato 1. Aconitasa Deshidratación H2O
II. cis-Aconitato 2. Aconitasa Hidratación H2O
3. Isocitrato
III. Isocitrato Oxidación NAD+ NADH + H+
deshidrogenasa
4. Isocitrato
IV. Oxalosuccinato Descarboxilación
deshidrogenasa
Descarboxilación NADH + H+
5. α-cetoglutarato NAD+ +
V. α-cetoglutarato oxidativa + CO2
deshidrogenasa CoA-SH
6. Succinil-CoA GDP GTP +
VI. Succinil-CoA Hidrólisis + Pi
sintetasa CoA-SH
7.  FADH2
VII. Succinato Oxidación FAD
Succinato deshidroge
VIII. Fumarato nasa
8. Fumarato Hidratasa Adición (H2O) H2O
9. 
IX. L-Malato Oxidación NAD+ NADH + H+
Malato deshidrogenas
X. Oxaloacetato a 10. Citrato sintasa Condensación
Los productos del ciclo del ácido cítrico
Regresemos un poco para hacer cuentas y seguir el camino de los carbonos que entran al ciclo del ácido
cítrico y calcular la producción de ATP  y acarreadores de electrones reducidos (NADH  y FADH2)
En una sola vuelta del ciclo,
•Entran 2 carbonos del acetil-CoA y se liberan 2 moléculas de dióxido de carbono;
•Se generan 3 moléculas de NADH y 1 de FADH2
•Se produce 1 molécula de GTP

Estas cifras son para una vuelta del ciclo, que corresponde a una molécula de acetil CoA. Cada glucosa
produce dos moléculas de acetil CoA, por lo que debemos multiplicar estas cifras por 2 si queremos conocer
el rendimiento por glucosa.
Regulación
Muchas de las enzimas del ciclo de Krebs son reguladas por retroalimentación negativa, por unión
alostérica del ATP, que es un producto de la vía y un indicador del nivel energético de la célula. Entre estas
enzimas se incluye el complejo de la piruvato deshidrogenasa que sintetiza el acetil-CoA necesario para la
primera reacción del ciclo a partir de piruvato, procedente de la glucólisis o del catabolismo de aminoácidos.
También las enzimas citrato sintasa, isocitrato deshidrogenasa y α-cetoglutarato deshidrogenasa, que
catalizan las tres primeras reacciones del ciclo de Krebs, son inhibidas por altas concentraciones de ATP.
Esta regulación frena este ciclo degradativo cuando el nivel energético de la célula es bueno.
Algunas enzimas son también reguladas negativamente cuando el nivel de poder reductor de la célula es
elevado. El mecanismo de esta inhibición es una inhibición competitiva por producto (por NADH) de las
enzimas que emplean NAD+ como sustrato. Así se regulan, entre otros, los complejos piruvato
deshidrogenasa y citrato sintasa.
Fosforilación oxidativa
La razón por la que necesitas oxígeno es para que tus células puedan usar esta molécula durante la
fosforilación oxidativa, la etapa final de la respiración celular. La fosforilación oxidativa se conforma de
dos componentes estrechamente relacionados: la cadena de transporte de electrones y la
quimiosmosis. En la cadena de transporte de electrones, los electrones se transportan de una molécula
a otra, y la energía liberada cuando se transfieren los electrones se utiliza para formar un gradiente
electroquímico. En la quimiosmosis, la energía almacenada en el gradiente se utiliza para sintetizar ATP.
 Fosforilación oxidativa
•Entrega de electrones por NADH y FADH2. Los acarreadores de electrones (NADH y FADH2)
reducidos en otros pasos de la respiración celular transfieren sus electrones a las moléculas cercanas al
inicio de la cadena de transporte.
•Transferencia de electrones y bombeo de protones. Conforme se mueven los electrones en la
cadena, se desplazan de un nivel de energía más alto a uno más bajo, lo que libera energía. Parte de
esta energía se utiliza para bombear iones de H+, lo que los desplaza fuera desde la matriz hacia el
espacio intermembranal. Este bombeo establece un gradiente electroquímico.
•Separación de oxígeno molecular para formar agua. Al final de la cadena de transporte de
electrones, los electrones se transfieren a una molécula de oxígeno, la cual se rompe a la mitad y
recolecta H+  para formar agua.
•Síntesis de ATP impulsada por un gradiente. Cuando fluyen por el gradiente de regreso hacia la
matriz, los iones de H+ pasan a través de una enzima llamada ATP sintasa, la cual aprovecha el flujo de
protones para sintetizar ATP.
La cadena de transporte de electrones es un
conjunto de proteínas y moléculas orgánicas
incrustadas en la membrana, la mayoría de las
cuales se organizan en cuatro grandes
complejos nombrados del I al IV. En
eucariontes, muchas copias de estas moléculas
se encuentran en la membrana mitocondrial
interna. En procariontes, los componentes de la
cadena de transporte de electrones están en la
membrana plasmática.
Complejos de la Cadena de Transporte de Electrones

Complejo I Complejo III

•NADH: ubiquinona oxidorreductasa •Coenzima Q-citocromo c reductasa
•El complejo enzimático mueve 2 electrones del •4 protones translocados al espacio
NADH a un transportador (ubiquinona) a través de intermembranal
una reacción redox que transloca 4 protones. •Complejo inhibido por el dimercaprol
•Los protones son bombeados desde la matriz al
espacio intermembranal.
Complejo II Complejo IV
•Succinato deshidrogenasa •Citocromo c oxidasa
•Entrega electrones para el grupo de quinonas •4 electrones se transfieren a O2 y producen 2
•Transfiere FAD a la quinona moléculas de H2O.
•8 protones agregados al gradiente de protones
Complejo I
•NADH: ubiquinona oxidorreductasa
 ATP sintasa
La ATP sintasa (ATPasa ó F1/Fo ATPasa ó Complejo V)
es la enzima encargada de acoplar el transporte de
electrones y la síntesis de ATP o fosforilación oxidativa, en
la respiración celular.
El complejo ATP sintasa, es una enzima situada en la
cara interna de la membrana interna de las mitocondrias y
de la membrana de los tilacoides de los cloroplastos
 encargada de sintetizar ATP a partir de ADP y un grupo 
fosfato y la energía suministrada por un chorro de 
protones (H+). Responde a la síntesis de ATP según la
hipótesis quimiosmótica de Mitchell. La síntesis de ATP
gracias a este enzima se denomina fosforilación oxidativa
 del ADP.
Hipótesis quimiosmótica de Mitchell
Las coenzimas reducidas procedentes del Ciclo de Krebs (NADH + H+ y FADH2) atraviesan una serie de
complejos enzimáticos (cadena de transporte de electrones) que producen en ellas sucesivas reacciones de
oxidación-reducción cuyo objetivo es la utilización del flujo de electrones para bombear protones al espacio
intermembrana de la mitocondria o cloroplasto, creando un gradiente electroquímico por el que los protones
tienden a volver al interior del orgánulo, cosa que solo pueden hacer a través de la ATP sintasa. Este paso
conlleva un desprendimiento de energía que se utiliza para que un ADP se una a un grupo fosfato, dando
lugar al ATP. Se ha demostrado que para cada NADH + H+ se obtienen 3 ATP y que cada FADH2 aporta 2
ATP, pero debido a la traslocación de ATP hacia el exterior de la mitocondria, en donde ocurre un gasto extra
de energía, la cantidad neta de ATP producida por cada NADH + H+ es de 2,5 y de 1,5 por cada FADH2.
El ciclo del glioxilato
Es una forma modificada del Ciclo de Krebs que tiene lugar en la mayoría de las plantas, hongos y
microorganismos, pero no ocurre en animales superiores ya que carecen de las dos enzimas clave del
proceso. Este ciclo les permite utilizar los ácidos grasos o el acetato (en forma de Acetil-CoA) como fuente
de carbono para la síntesis de Glucosa. El ciclo del glioxilato ocurre en los glioxisomas, que son
peroxisomas especializados.

Enzimas clave en el ciclo del glioxilato

Las 2 enzimas clave involucradas en el ciclo del glioxilato producen 2 moléculas de malato, que a su vez
producen 2 moléculas de oxalacetato. La molécula de oxalacetato sobrante se utiliza en la gluconeogénesis
para la producción de glucosa. Las 2 enzimas clave son:
Isocitrato liasa: convierte el isocitrato (que contiene 6 carbonos) en succinato (que contiene 4 carbonos) y
glioxilato
Malato sintasa: combina acetil-CoA y glioxilato para producir malato
¿Por qué los animales no pueden sintetizar glucosa a partir de ácidos
grasos?

La dieta de los animales herbívoros incluye plantas que contienen un aporte de carbohidratos y no
necesitan cantidades enormes (comparadas con las necesidades de las plantas de crear celulosa). Por
otro lado, los animales carnívoros usan los aminoácidos presentes en la carne para sintetizar glucosa. De
esta manera, la formación de succinato para posteriormente usarlo en la síntesis de azúcares no es
esencial para los vertebrados superiores y en algún momento de la evolución se perdió esta capacidad
(es decir, se perdieron los genes para la Malato Sintasa y la Isocitrato liasa).