Seminario BIO 266

Oxidación del piruvato-Ciclo de Krebs-Cadena transportadora de electrones y Fosforilación

Oxidativa

1. En relación al siguiente esquema de la reacción catalizada por el complejo Piruvato

Deshidrogenasa (PDH) indique:

a) Ubicación celular y subcelular del complejo enzimático.

b) De donde proviene el piruvato y las coenzimas utilizadas por el complejo PDH
c) Nombre de las enzimas E1, E2 y E3 y que reacción catalizan cada una de ellas
d) ¿Cuáles son los destinos metabólicos del Acetil CoA generado en la reacción?
e) ¿Por qué los individuos con una deficiencia de tiamina en la dieta tienen altos niveles de
piruvato en la sangre?
2. El siguiente esquema muestra la regulación del complejo enzimático

Al respecto responda:
a) ¿Cuáles son los mecanismos de regulación del complejo enzimático?

b) ¿Qué reacción cataliza la PDH quinasa y PDH fosfatasa, cuales son los reguladores de
estas enzimas?

Regular la actividad del complejo PDH

c) Si usted realiza una actividad física aeróbica que sucede con la actividad de este complejo
a nivel muscular

Aumenta su actividad

d) Si ahora hace un ejercicio de corta duración e intenso que espera que suceda con la
actividad de este complejo a nivel muscular

Se inhibe, por la falta de oxigeno en la actividad de alto impacto.

 3. En el ciclo de Krebs participan ocho enzimas, nómbrelas e indique cuál de las siguientes
describe el tipo de reacción que catalizan: condensación (formación de enlace carbono–
carbono), Descarboxilación, deshidratación; hidratación; oxidación-reducción; fosforilación
a nivel de sustrato; isomerización y complete la tabla señalando el nombre del o (las)
coenzimas requerida (s) para cada reacción.

Nombre de Enzima Tipo de reacción Coenzima utilizada

1 Citrato Sintasa Condensación

4. En que reacciones enzimáticas principalmente es regulado el ciclo de Krebs, quienes

participan en esta regulación y de qué manera lo realizan (estimulando o inhibiendo).

5. Explique el significado biológico de cada uno de los siguientes efectos alostéricos:

a) Activación de la isocitrato deshidrogenasa por ADP
b) Activación de la piruvato deshidrogenasa fosfatasa por el Ca 2+
c) Inhibición de la  cetoglutarato deshidrogenasa por succinyl- CoA
d) Inhibición de la isocitrato deshidrogenasa por NADH
e) Activación de la piruvato deshidrogenasa quinasa por NADH
f) Activación de la piruvato carboxilasa por Acetil CoA

6. Indique ¿Por qué el Ciclo de los ácidos tricarboxilicos no funciona en ausencia de oxigeno?

7.- ¿Por qué son de gran importancia las reacciones anapleroticas para el ciclo de Krebs? ¿Cuál
sería la más importante y por qué?

8.- El fluoroacetato (FCH2COO-) es un compuesto tóxico que se encuentra en algunas plantas. Los
animales que las ingieren mueren. Busque una explicación bioquímica.

9. En relación con el siguiente caso clínico responda las preguntas:

Un niño de 7 meses de edad presentaba un deterioro neurológico progresivo, caracterizado por la

pérdida de la coordinación y del tono muscular. Era incapaz de sostener la cabeza y tenía una gran
dificultad para mover las extremidades con cojera. También padecía acidosis progresiva. La
administración de tiamina no produjo resultados.
Los análisis mostraban unas concentraciones elevadas de lactato y de α-cetoglutarato en sangre y
de los aminoácidos de cadena ramificada. En la autopsia se examinaron el hígado, el cerebro, el
riñón, el musculo esquelético y el corazón. Encontrándose actividad normal de todas las enzimas
gluconeogénicas pero deficiencia de la dihidrolipoil deshidrogenasa (E3).
a) ¿Cuál o cuáles son las enzimas defectuosas?
b) ¿Por qué se produce un aumento de la concentración de lactato en la sangre?
c) ¿Que causa el deterioro neurológico?

Cadena transportadora de electrones y Fosforilación oxidativa.

I. Realice un balance energético (señale cantidad de ATP y Coenzimas reducidas) por la

degradación de:

a) Una molécula de glicerol hasta CO2 y agua (utilizando la lanzadera glicerol fosfato)

b) Una molécula de glucosa 6 fosfato hasta CO2 y agua (utilizando la lanzadera glicerol
fosfato)

c) Una molécula de Fructosa 1,6 bifosfato hasta CO 2 y agua.

II. En relación con la intoxicación por Monóxido de Carbono responda las siguientes
preguntas:
a) ¿Por qué ocurre?
b) ¿Cuáles son fuentes exógenas de producción de CO?
c) ¿Cuáles son fuentes endógenas de producción de CO
d) ¿A qué nivel de la cadena respiratoria inhibe el CO?
e) Explique los mecanismos por los que el CO afecta la producción de ATP
f) ¿Cuáles son las manifestaciones clínicas en relación a la intoxicación por CO?.
III.

1. ¿Para qué le sirve la cadena de transporte de electrones a la célula?

2. Determine el impacto de la reacción de la succinato deshidrogenasa en la fosforilación

oxidativa. Considere la oxidación del succinato por el oxígeno molecular en la cadena
transportadora de electrones.

Succinato + ½ O2 Fumarato + H2O

a) Determine el ∆G0´ para esta reacción si E0´(fumarato succinato)=+0,031V y

E0´(½O2 / H2O)=+0,816V)
b) ¿Cuál es la constante de equilibrio para esta reacción?
 c) Determine cuantos ATP teóricos se pueden generar con la energía liberada en esta reac-
ción
d) Considerando que se forman en forma fisiológica 1,5 ATP por la oxidación del succinato,
¿Cuál sería el porcentaje de eficiencia?

3. ¿Por qué el O2 es el último aceptor de electrones en la respiración mitocondrial?

4. ¿Cómo ocurre la transferencia de electrones desde el NADH al O 2? Explicar ayudándose de un

esquema.

5. ¿Cómo los complejos enzimáticos de la cadena transportadora de electrones son capaces de

generar un gradiente de concentración de H+? ¿Cómo ellos son activados?

6. ¿Por qué es importante que se genere un gradiente de H+ para la actividad de la ATP sintasa?

7. ¿Por qué el cianuro es considerado un veneno mitocondrial? Explique donde actúa y que
consecuencia generan en el consumo de O2 y síntesis de ATP.

8. El 2,4 dinitrofenol (DNP) es un agente químico que actúa como desacoplador que provoca que
se filtren protones en la membrana interna de la mitocondria. Hasta 1938 se utilizó el DNP
como un fármaco para bajar de peso.
a) ¿Qué efecto tendría el DNP en la cantidad de ATP producida en la respiración celular?
b) Explique brevemente ¿por qué el DNP hacía perder peso a los pacientes que lo
consumían?, realice un esquema del proceso de fosforilación oxidativa que represente la
acción del fármaco y utilícelo para sustentar su argumento.
c) ¿Por qué crees que lo retiraron del mercado?

9. Analice el gráfico siguiente y responda:

a) ¿Por qué al adicionar ADP + Pi aumenta el consumo de O2 y la síntesis de ATP?

b) ¿Por qué en presencia de oligomicina se afecta el consumo de O2 y la síntesis de ATP?
c) ¿Qué sucede en presencia de 2,4 dinitrofenol?

Preguntas para estudio personal

1. ¿Cómo ocurre la transferencia de electrones desde el FADH al O 2? Explicar ayudándose de un
esquema
2. ¿Cuáles son las similitudes y diferencias entre Fosforilación a nivel de sustrato y fosforilación
oxidativa?

3. Analizando los siguientes gráficos:

 a) ¿Por qué con rotenona disminuye el consumo de O 2 y al adicionar succinato nuevamente
aumenta el consumo de O2 ¿Qué sucede en ambos casos con la síntesis de ATP?
b) ¿Qué sucede con la presión de oxígeno y la síntesis de ATP cuando se realiza un
agotamiento del ADP?

c) ¿Por qué con Antimicina A inhibe el consumo de O2 y con ascorbato nuevamente

aumenta?.
d) ¿Qué sucede con la síntesis de ATP?

4. ¿Cuál es la función de la termogenina? ¿Dónde lo encontramos (órgano y orgánulo)? ¿Cuándo y

cómo lo activamos? ¿Cuál es el efecto de la termogenina sobre la célula?