ANTEPROYECT

O
FACULTAD DE INGENIERÍAS Y CIENCIAS APLICADAS

Título del trabajo experimental: Fecha: 12/01/2023

Proyecto integrador sobre el diseño y aplicación de un
procedimiento para determinación de antioxidantes en Carrera: Ingeniería en
muestras de moras mediante el método Folin-Ciocalteu. Biotecnología

Nombres y apellidos Estudiante: ID Banner:

Mario Pallo A00086345

José Delgado A00084985

Luis Salinas A00895990

1. Introducción:
1.1. Fundamento:
los polifenoles son compuestos bioactivos que se encuentran de forma natural en los alimentos
de origen vegetal como frutas, cacao, café o verduras, dicho componente es usado por las
plantas para protegerse de los patógenos o la radiación ultravioleta, no son nutrientes
esenciales para el funcionamiento del organismo humano, pero debido a sus propiedades
antioxidantes contribuyen a la disminución del número de radicales libres, unas moléculas que
alteran el funcionamiento normal de las células. (Quiñones M, Miguel M, & Aleixandre A,
2012).

Para la cuantificación de estos polifenoles (antioxidantes) se sustenta en el fundamento del

método Folin-Ciocalteu (FC) cuyo ensayo colorimétrico se da por reacciones de oxido-
reducción en un medio alcalino por el cual existirá transferencia de iones, el reactivo FC
mencionado contiene molibdato y tungstato de sodio, que pueden reaccionar con cualquier
tipo de fenol para formar un complejo de fosfomolibdeno-fosfotungsteno. A medida que los
electrones se van transfiriendo se reduce el pH ácido del complejo de fósforo-molibdeno-
fósforo-tungsteno en óxidos, siendo normalmente de color amarillento, pero cuando lo
ponemos en contacto con los compuestos fenólicos son transferidos los electrones al reactivo
de Folin tornándose morado y de acuerdo a su intensidad es proporcional al número de grupos
hidroxilos. (Marina D, Avella G, Alberto C, García O & Cisneros-AM, 2007).
 REACTIVO MATERIALES
DESCRIPCIÓN CANTIDAD
2. Materiales y reactivos.
Tubos de ensayo 10
REACTIVO REACTIVOS
Pipeta de 10 mL 2
DESCRIPCIÓN CANTIDAD
Matraces aforados de 25 mL 10
Ácido gálico 1g
Micropipeta de 1000 uL 1
Carbonato Sódico a 7.5 % 50 mL
Embolo 2
Reactivo de Folin 30 mL
Vasos de precipitación 3
Probeta de 10 mL 1
Matraz aforado de 250 mL 1
REACTIVO MATERIAL AUXILIAR
DESCRIPCIÓN CANTIDAD
Vortex 1

3.Procedimiento experimental:
a) Preparación de disoluciones patrón de ácido gálico:

Se preparará una solución madre de ácido gálico de 100 mg/L, y a partir de esta disolución se
prepararán 10 mL de diluciones seriadas de concentraciones crecientes de ácido gálico entre 0
y 16 ppm, de la siguiente manera:

1. Preparar los tubos de ensayo numerándolos del 0 al 16 respectivamente.

2. Añadir a cada tubo 10.0, 9.8, 9.6, 9.4, 9.2, 9.0, 8.8, 8.6, 8.4 mL de agua destilada (tabla 2).

3. Añadir a cada tubo 0.0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.4, 1.6 ml de la solución madre de ácido
gálico (tabla 2).

4. Agitar en vortex y mantener en oscuridad y en refrigeración durante 15 min

b) Procedimiento Experimental:

1. Tomar 250 μL de cada disolución patrón de ácido gálico y colocarlos en matraces aforados
de 25 mL.

2. Añadir 15 mL de agua destilada y 1,25 mL de reactivo de Folin-Ciocalteau.

3. Homogeneizar el contenido de los matraces y dejar reposar 5 minutos en oscuridad.

4. Transcurrido este tiempo, adicionar a cada matraz 3,75 mL de la disolución de carbonato

sódico al 7,5 % y llevar a un volumen de 25 mL con agua destilada.
 5. Homogeneizar los matraces y mantener en oscuridad a temperatura ambiente durante 1
hora sacudiendo los frascos cada 15 minutos.

6. Medir la absorbancia a 765 nm.

7. Anotar los datos obtenidos y realizar la curva de calibración.

Referencias:

Marina, D., Avella, G., Alberto, C., García, O., & Cisneros, A. M. (2007). Medición de
Fenoles y Actividad Antioxidante en Malezas Usadas para Alimentación Animal.
Universidad Autónoma de Querétaro. México.

Quiñones, M., Miguel, M., & Aleixandre, A. (2012). Los polifenoles, compuestos de origen
natural con efectos saludables sobre el sistema cardiovascular The polyphenols,
naturally occurring compounds with beneficial effects on cardiovascular disease.
Nutricion Hospitalaria, 27(1), 76-89.
https://doaj.org/article/c2de287df8ae43dbbf3b7014ecd3ec0d.