Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
UNIDAD N°: 1
NOMBRE DE LA UNIDAD: BIOQUÍMICA Y MEDICINA
NÚMERO DE HORAS POR UNIDAD: 18 Horas (6 horas Teoría, 12 horas Práctica)
RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA UNIDAD:
Aplica desde el punto de vista teórico científico, las bases moleculares, celulares, los procesos
bioquímicos y fisiológicos del cuerpo humano.
CARRERA Medicina
ASIGNATURA Bioquímica I
CURSO PRIMERO B
PRÁCTICA DE LABORATORIO No: 2
-1-
ESTUDIANTES
APELLIDOS Y NOMBRES CÉDULA FIRMA
COMPLETOS ESTUDIANTE
OBSERVACIONES
CALIFICACIÓN
-2-
1. TEMA: EXTRACCIÓN Y MANEJO DE MUESTRA SANGUÍNEA
2. OBJETIVOS
-3-
10 gasas estériles
1 frasco de jabón líquido
1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)
2 cepillos para lavar tubos de ensayo pequeños (de 5 ml y grandes de 10 ml)
1 par de guantes de uso doméstico
1 frasco con detergente (para lavado de materiales)
1 frasco grande para cortopunzantes con etiqueta (recipiente vacío de los
desinfectantes que reutilice en casa con tapa, grande de plástico grueso)
ROTULAR CON EL CURSO Y EL NUMERO DE GRUPO
4 recipientes de plástico de 100 ml de capacidad con tapas
100 puntas azules
100 puntas amarillas
Tiras multipeg
1 lavacara pequeña
INDIVIDUALES:
-4-
4. GRÁFICO
franelas de 40 cm cada una, frasco de cloro, frasco de agua destilada de 500 ml, frasco estéril
para torundas de algodón, Torundas de algodón, frasco de alcohol, gasas estériles, frasco de
jabón líquido, dermográfico (o marcador de material de vidrio, cepillos para lavar tubos de
ensayo pequeños (de 5 ml y grandes de 10 ml), entre otros)
-5-
FOTOGRAFÍA N° 3 MATERIALES INDIVIDUALES
(tubos al vacío de tapa roja (sin anticoagulante), tubos al vacío con anticoagulante (tapa lila o
celeste), jeringuillas descartables de 10 ml y 2 de 5 ml, agujas vacuntainer tapa verde, lancetas,
2 venditas o curitas, torniquete, cápsula, mascarilla, par de guantes de manejo de látex entre
otros)
-6-
5. FUNDAMENTO TEÓRICO
I. LA SANGRE
La sangre es un tejido líquido que recorre el organismo, a través de los vasos sanguíneos que
transporta las células necesarias para llevar a cabo las funciones vitales como respirar, formar
sustancias y defenderse de agresiones. La cantidad de sangre de una persona está en relación
con su edad, peso, sexo y altura. Una persona adulta tiene entre 4,5 y 6 litros de sangre, es
decir, un 7% de su peso corporal.
La sangre transporta los principios nutritivos desde el aparato digestivo hasta las células, donde
se recogen también las sustancias de desecho para eliminarlas gracias a los riñones, el hígado
y otros órganos de excreción. También es la encargada de regular el transporte de oxígeno y la
eliminación del anhídrido carbónico. Tiene un papel importante en funciones como la
coagulación, la inmunidad y el control de la temperatura corporal.
A) Los glóbulos rojos, también denominados hematíes o eritrocitos, son las células
sanguíneas más numerosas, cuyo característico color rojo se debe a una proteína que se
encuentra en su interior llamada hemoglobina, responsable de ligar el oxígeno para
transportarlo desde los pulmones a todos los tejidos del organismo para que las células
respiren y eliminar el dióxido de carbono que se produce por la actividad celular. Los
glóbulos rojos se forman en la médula ósea, que se localiza dentro de los huesos del
esqueleto, desde donde son liberados al torrente sanguíneo. Su déficit (anemia) provoca
una carencia de oxígeno en los órganos vitales de los enfermos. En este caso deben
administrarse concentrados de hematíes.
B) Los glóbulos blancos, o leucocitos, se encargan de proteger al organismo contra el
ataque de bacterias, virus, hongos y parásitos. Cuando hay una infección aumentan su
número para mejorar las defensas. Unos se forman en la médula ósea y otros en el
sistema linfático (bazo, ganglios, etc.). Los glóbulos blancos están constantemente
atentos a cualquier signo de enfermedad. Cuando aparecen los gérmenes utilizan
diferentes maneras para atacarlos; por ejemplo, produciendo anticuerpos protectores
que inutilizan a los gérmenes; o rodeando y devorando a la bacteria invasora.
-7-
C) Las plaquetas, o trombocitos, son las células sanguíneas más pequeñas. Intervienen
en la coagulación de la sangre impidiendo las pequeñas hemorragias que se producen
habitualmente en las arterias, venas y capilares; además de producir diversas sustancias
que ayudan a la cicatrización de las heridas. Se producen en la médula ósea y viven
entre 6 y 7 días. Su déficit (trombopenia), que es frecuente en enfermedades como la
leucemia, o tras algunos tratamientos del cáncer, provoca la aparición de hemorragias
graves. El tratamiento prioritario en estos casos es la transfusión de concentrados de
plaquetas.
La Albúmina: Es una proteína que ayuda a mantener el agua del plasma en una
proporción equilibrada.
Las Globulinas: Son los anticuerpos encargados de la defensa de nuestro organismo
frente a las infecciones. Su disminución ocasionará una baja de defensas.
Factores de Coagulación: Son imprescindibles para evitar las hemorragias. La ausencia
de algún factor de coagulación puede ocasionar trastornos hemorrágicos ya que se
dificulta la formación del coágulo.
Otras proteínas transportan sustancias necesarias para el normal funcionamiento de las
células (grasas, azúcares, minerales).
1) Punción venosa
2) Punción capilar
3) Punción arterial.
La sangre oxigenada por el pulmón es bombeada por el corazón hacia todos los órganos y
tejidos para cubrir las necesidades metabólicas. Esta sangre arterial tiene prácticamente una
composición uniforme en todo el cuerpo. La venosa varía según la actividad metabólica del
órgano o tejido por lo que el punto donde se extrae la muestra puede influir en la composición
de la sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial también se diferencia por el pH,
por su concentración en Dióxido de Carbono y su hematocrito.
La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se denomina sangre capilar
incorrectamente, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vénulas y capilares por lo
tanto es en parte arterial, y en parte venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace que la
muestra sea más rica en sangre arterial, pero contiene también líquido intersticial e intracelular.
V. ANTICOAGULANTES Y PRESERVANTES
El anticoagulante debe elegirse de acuerdo con las determinaciones que se vayan a realizar,
asegurándose de que su presencia no afecte a la medida. Así, por ejemplo, si se quieren medir
los iones sodio o potasio, no puede utilizarse como anticoagulante ninguna sustancia que
contenga estos iones.
b) El oxalato actúa como anticoagulante por la formación de complejos con el calcio, ion
que es fundamental en el mecanismo de coagulación. La sal más utilizada es el oxalato
potásico, en una concentración de alrededor de 2 mg/ml de sangre. Como en el caso de
la heparina, puede utilizarse como solución o secarse sobre las paredes de los tubos de
recogida. Las sales de oxalato se utilizan como anticoagulantes en las determinaciones
hematológicas de recuentos celulares y hematócrito.
c) El citrato es otro anticoagulante que actúa por formación de complejos con el calcio.
Alrededor de 30 mg/ml de sangre es la concentración que suele utilizarse. El citrato
sódico se emplea para las medidas de velocidad de sedimentación y estudios de
coagulación.
- 10 -
d) El EDTA (etilendiaminotetracetato) sódico o potásico se utiliza en concentraciones de
1a 2 mg/ml de sangre para los recuentos hematológicos. Su acción anticoagulante se
debe también a la formación de quelatos con el calcio.
e) Fluoruro es un preservador que inhibe un gran número de enzimas, por lo que impide
el metabolismo de diversas sustancias sanguíneas. Resulta especialmente útil para las
determinaciones de glucosa cuando entre la toma y la centrifugación de la sangre haya
de transcurrir más de una hora.
6. DISEÑO EXPERIMENTAL
- 11 -
Verificando el funcionamiento adecuado de la jeringuilla tome la misma con los dedos
índice y pulgar descansando el dedo medio en el antebrazo del paciente, formando un
ángulo de 45 grados con la horizontal.
Retire el protector de la aguja.
Atraviese firmemente la piel e introduzca la aguja una distancia aproximada de 1 a 1,5
cm con el bisel hacia arriba dentro del lumen de la vena. En este instante fluye
espontáneamente la sangre.
Ayúdese con el émbolo para extraer la cantidad deseada de sangre; retire el torniquete y
pida que abra el puño.
Coloque una torunda de algodón – alcohol en el sitio de la extracción y retire lentamente
la jeringuilla. Realice una ligera presión para favorecer la hemostasia.
Retire la aguja de la jeringuilla.
En el tubo de recolección de la muestra, forma un ángulo de 30 grados con la jeringuilla,
deslice lentamente la sangre por las paredes laterales del tubo con una presión constante
para evitar hemólisis.
Obtenida la muestra se procede a realizar las diferentes determinaciones.
C) OBTENCIÓN DE SUERO: Una vez obtenida la muestra de sangre, siga los siguientes
pasos:
Formado el coágulo en los tubos de tapa roja, se somete a centrifugación por un
lapso de 5 minutos a 3000 r.p.m. (revoluciones por minuto)
Retirar el líquido sobrenadante por medio de una pipeta manual o semi –automática
para no contaminar la muestra. A otro tubo de ensayo el cual debe tener rotulación.
Establecer características organolépticas factibles en el suero.
- 12 -
Mezclar uniformemente por medio de inversión del tubo en forma lenta, nunca
agitando bruscamente el tubo con la muestra.
Dejar en reposo por pocos minutos.
Llevar el tubo a la centrifuga 5 minutos a 3000 r.p.m.
Retirar el líquido sobrenadante por medio de una pipeta manual o semi –automática
para no contaminar la muestra. A otro tubo de ensayo el cual debe tener rotulación.
Establecer características organolépticas factibles en el plasma.
8. CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores y condiciones influyen en la toma de una muestra sanguínea?
Para la obtención de una muestra sanguínea influyen factores fisiológicos, técnicos o de
procedimiento, como:
- La situación dietética del paciente al igual que si se encuentra en ayunas es importante
para ciertas pruebas.
- La ingestión de alcohol y el fumar induce cambios en la composición de los lípidos
corporales
- Si el paciente está consciente o inconsciente
- La postura durante la toma de sangre, es decir, si su posición es de cubito prono o se
encuentra sentado
- El tiempo de aplicación del torniquete
- El almacenamiento de la muestra sanguínea con el cuidado y la temperatura
correspondiente.
- Edad
- Sexo
- Etnicidad
- Embarazo
- Ciclo Menstrual
- Ejercicio
- 13 -
- Fármacos
- Condiciones psicológicas
Una vez verificadas las condiciones de los materiales serán utilizadas adecuadamente para la
extracción sanguínea. Al momento del almacenamiento se encontrarán debidamente cerradas
y en los tubos adecuados, es decir si es para sangre total y suero se colocará en tubos que
generalmente vienen con tapa de color rojo, mientras que para el plasma se colocará en tubos
con anticoagulante.
El volumen recomendable en cada caso es de 5ml y en caso de no ser utilizada al instante se
almacenará en una heladera a 4 °C hasta el momento de envío al laboratorio.
Cuando se envasa sangre o suero no debe quedar un espacio vacío en el recipiente o jeringa
para evitar las pérdidas de la muestra.
Por otro lado, los recipientes utilizados para colocar sangre entera, plasma o suero no deben
enjuagarse nunca con alcohol ni con ningún otro solvente orgánico.
TRANSPORTE
Es importante tener rotulados correctamente todos los materiales donde se haya recogido la
muestra, en este caso sanguínea, para que el momento de entrar a equipos de laboratorio como
la centrífuga no se confunda la pertenencia.
Estas muestras deberán acondicionarse de buena manera para evitar vuelcos, derrames, roturas
de los recipientes, entre otros, por ello también se recomienda utilizar la indumentaria
respectiva para una bioseguridad.
- 14 -
QUIMICA CLINICA
DETERMINACION ESTABILIDAD ESTABILIDAD TIPO DE MUESTRA
REFRIGERADO A 4ºC FRIZADO A -18ºC
Ácido Úrico 1 semana 6 semanas suero
Las determinaciones de Anticoagulante Lúpico (tambien llamada Inhibidor Lúpico), Proteína C, Proteína S,
Antitrombina III y Resistencia a la proteína C Activada (RPCA) requieren las mismas muestras que las utilizadas
en las pruebas de rutina (TP y APTT), solo que aquí debemos hacer una segunda centrifugación para obtener
un plasma pobre en plaquetas. Una vez separado el plasma podemos guardar las muestras congeladas a -20
ºC por un mes.
La determinación de Fibrinógeno y Dímero D requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de
anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rápidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes
de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4 hs.). El plasma
separado puede guardarse a -20ºC una semana para el Fibrinogeno y un mes para el Dímero D.
- 15 -
3. ¿Qué importancia biomédica, tiene la determinación del tiempo de coagulación?
El diámetro de la aguja está indicado por el calibre de la aguja. Cada calibre tiene una serie de
diferentes longitudes para el uso que ameriten. Hay una serie de sistemas para medir el calibre
de las agujas. Las agujas más comúnmente usadas en el campo médico van en escala desde la
número 7 y la más ancha, hasta la número 33, la más pequeña: el calibre mayor es reservado
para las agujas de menor diámetro. Las agujas de calibre 21 son las que más se usan para la
- 16 -
venopunción, mientras que las de calibre 16 son agujas comúnmente utilizadas para la donación
de sangre, ya que son lo suficientemente gruesas como para permitir que los glóbulos rojos
pasen a través de la aguja sin que se rompan; además, el calibre más grueso permite que más
sangre se recoja o entregue en un período más corto. Aunque las agujas reutilizables tienen
aplicación en situaciones de investigación científica, las agujas desechables son mucho más
comunes en el uso de la Medicina con la finalidad de evitar la transmisión de enfermedades.
El calibre de la aguja también depende de lo espeso que pueda ser el medicamento administrado
si el medicamento es espeso, una aguja con un calibre pequeño y gran diámetro sería la aguja
a elegir. Los medicamentos intramusculares se administran con agujas largas, mientras que los
medicamentos subcutáneos se administran con agujas más cortas.
- 17 -
5. En un mapa conceptual indique la composición y funciones de la sangre.
LA SANGRE
COMPOSICIÓN FUNCIONES
- 18 -
6. Establezca la diferencia entre suero, plasma y sangre total.
Suero: El suero es la parte líquida de la sangre después de la coagulación. Contienen 6-8% de las
proteínas que forman la sangre. Están más o menos, igualmente divididas entre la albúmina y las
globulinas de suero. Cuando la sangre es extraída y dejada a coagular, el coágulo se reduce después
de algún tiempo. El suero es la parte de la sangre que queda una vez que se han eliminado los factores
de coagulación como fibrina.
Plasma: El plasma es un líquido amarillento y claro que es parte de la sangre. También se encuentra
en las linfas o en fluidos intramusculares. Esta es la parte de la sangre que contiene fibrina y otros
factores de coagulación. El plasma hace el 55% del volumen total de sangre. El principal componente
del plasma sanguíneo es el agua. El plasma es la parte de la sangre que contiene ambas, el suero y los
factores de coagulación
Sangre total: Se conoce por sangre total aquella que no ha sido separada en sus diferentes
componentes. Una unidad tiene un volumen de 450 a 500 mL y es recolectada en una solución
con anticoagulante y conservante que permite la supervivencia de sus elementos.
- 19 -
8. Mediante un video grupal con la participación de los estudiantes de los grupos se
demostrará la obtención de sangre y sus derivados, se identificará a la Universidad,
la Facultad, la carrera, asignatura e integrantes. Recuerden que para cada video se
utilizarán los implementos de protección personal.
El video se muestra en el siguiente link:
https://youtu.be/4ZsGg8LfMW0
9. Se realizará una lectura del artículo científico, “Guías para la transfusión de sangre
y sus componentes”. Se establecerán 4 conclusiones de su importancia en el trabajo
de la Bioquímica práctica. Dirección: http://www.scielosp.org/pdf/rpsp/v13n2-
3/15737.pdf?tag=stupides-21
- Tener en cuenta que existe un riesgo, tanto legal para el practicante como de la salud
para el paciente, al momento de realizar una transfusión sanguínea; se debe adquirir un
buen conocimiento en base a las formas de actuar si algo llegase a suceder mal y los
parámetros para que sea exitoso el proceso.
- La transfusión de sangre y sus componentes ha sido un método muy eficiente para
mejorar la calidad de vida de las personas que sufren alguna patología, ya que al ser
receptoras y compatibles con las mismas aportarán a su organismo ciertos componentes
faltantes que alteran al mismo.
- Al realizar una extracción sanguínea debemos tener en cuenta el estado de salud del
paciente, aplicando correctamente el manejo de la aguja al momento de introducirla y
retirarla de la zona que hemos extraído la sangre, para evitar posibles infecciones
causadas por bacterias que están en nuestro medio.
- También debemos cuidar los aspectos de salud, revisar que los materiales que
utilizaremos para realizar la extracción de sangre estén en buen estado, manteniendo
una limpieza adecuada de los mismos.
- 20 -
9. CÁLCULOS Y RESULTADOS
MUESTRA Nº APELLIDOS Y TIEMPO DE SUERO PLASMA
NOMBRES CUAGULACION
DEL (minutos)
PACIENTE
Color: Amarillento Color: Amarillo
4.1 Erik Salas 13.30 Olor: Látex Olor: Látex
ESSO Aspecto: Aspecto:
Trasparente Transparente
APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y
MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Vanessa Gabriela Sánchez Merino
- 21 -
APELLIDOS DEL ESTUDIANTE RESPONSABLE DE LA EXTRACCIÓN Y
MANEJO DE MUESTRA Y OTROS DERIVADOS: Vinueza Loaiza Talisheva Margarita
- 22 -
10. OBSERVACIONES
En la práctica realizada se pudo observar lo siguiente:
- En la muestra 4.2 realizada por el estudiante Erik Salas, perteneciente a la estudiante
Vanessa Sánchez, se presento un inconveniente al momento de realizar la extracción
sanguínea debido a que al momento de el cambio de tubo en el vacuntainer se perdió la
vía ya que el ejecutante no mantuvo firme su mano, por esta razón la muestra del
segundo tubo rojo (sin anticoagulante) fue escasa, además de 10 min de centrifugación
se pudo observar que la muestra tenía aspecto muy turbio y de color rojo obscuro por
acción de la hemolisis, termino usado para describir la ruptura de hematíes por la
liberación de hemoglobina.
- El hierro es uno de los minerales que se encuentran presente en la hemoglobina,
participa en la oxigenación de la sangre, además interviene en la eliminación de dióxido
de carbono. En algunas de las muestras obtenidas observamos que estas eran inodoras,
la razón primordial por la que no presentan olor es porque la cantidad de sangre que se
obtuvo pues fue escasa; pese a la gran cantidad de hierro presente en la misma.
- En cuanto a la realización de las demás extracciones no se presentaron anomalías,
después de la centrifugación de 10 min a 3500rpm se pudo observar que las muestras
no presentaban hemolisis por su correcto manejo a la hora de la extracción, se pudo
observar que varias muestras tenían un aspecto totalmente claro y de otras un poco
turbio en cuanto al plasma. El plasma posee en un 91% agua y el resto se debe a los
electrolitos, proteínas, enzimas, aminoácidos, glúcidos, lípidos, hormonas y urea.
11. CONCLUSIONES
- 23 -
- Al momento de la extracción sanguínea fue preciso seguir todas las indicaciones previas
mencionadas por nuestra docente.
- Es importante tomar en cuenta todos los consejos mencionados ya que de esto depende
el resultado de los análisis clínicos; para así evitar falsos resultados o realizar
nuevamente la extracción.
- Luego de la extracción sanguina se procedió a la extracción de suero y plasma, el mismo
que se realizó a través de un proceso cuidadoso, es decir tomando en cuenta el tiempo
de coagulación.
3. Finalmente, para dar cumplimiento el segundo objetivo específico se realizó lo
siguiente:
- Una vez que las muestras sanguíneas se encontraran en los tubos se realizó movimientos
leves para mezclar el líquido sanguíneo con los anticoagulantes y así obtener sus
derivados (suero y plasma).
- Posterior a esto se procedió a tomar el tiempo de coagulación el mismo que sirvió para
establecer las condiciones de salud en la que se encontraba el paciente. El tiempo de
coagulación de las muestras sanguíneas se encontraba en un rango 8 a 13 minutos
respectivamente.
1. RECOMENDACIONES
2. BIBLIOGRAFIA
1. Mauricio, S (S.F). SCielo. Guías para la transfusión de sangre y sus componentes.
Brasil.
2. Mauricio, M (1995). Ministerio de Salud Presidencia de la Nación. Guía para la
obtención, conservación y transporte de muestras para análisis toxicológicos.
Argentina.
Video
https://youtu.be/4ZsGg8LfMW0
- 25 -
3. ANEXOS
NEXOS
Foto Nº1: Desinfección de la zona de trabajo Foto Nº2: Selección de materiales a utilizar
Elaborado por: Grupo Nº4 Elaborado por: Grupo Nº4
Foto Nº3: Aseo correcto de manos Foto Nº4:Ordenar los materiales para fácil acceso
Elaborado por: Grupo Nº4 Elaborado por: Grupo Nº4
Foto Nº5: Selección de la vena de buen calibre Foto Nº6: Aplicación de torniquete y preparación
Elaborado por: Grupo Nº4 de los materiales a usar
Elaborado por: Grupo Nº4
- 26 -
Foto Nº8: Maquina de centrifugado Foto Nº8: Recolección de resultados
Elaborado por: Grupo Nº4 Elaborado por: Grupo Nº4
- 27 -