UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MÉXICO.

Integrantes del equipo: Bizarro García Saúl Enrique, Escamilla Izquierdo Renata, Fuentes Jacal
Juan Pablo, García Gaona Arely y Rendón Piedra Judith Anel.

Desarrollado en la asignatura: Microbiología Médica.

PRÁCTICA 03: “Coprocultivo”

Licenciatura QFBT

Periodo 2022-23

Fecha de entrega: 08/ Oct / 22

Asesor de proyecto: Paniagua Castro María de los Angeles.

INTRODUCCIÓN:

El coprocultivo es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces (materia fecal)
que puedan causar enfermedad y síntomas gastrointestinales [Medline Plus. 2022].

Para realizar un coprocultivo, se necesita una muestra de materia fecal, para recolectar la muestra,
puede hacerse en una bolsa de plástico, se coloca la bolsa sobre la taza del inodoro de forma tal que
se sostenga con el asiento, luego, se coloca la muestra en un recipiente limpio suministrado por su
proveedor de atención médica. De igual forma en un equipo para recolección de la muestra que trae
una gasa especial que se usa para recogerla, se coloca en un recipiente limpio suministrado por su
proveedor. No se debe mezclar orina, agua ni papel higiénico con la muestra. En el laboratorio, un
técnico coloca una parte de la muestra en un recipiente especial. Entonces, este recipiente se llena
con un gel que estimula la multiplicación de bacterias u otros microorganismos. Si se presenta
proliferación de ellos, se identifican los microorganismos, el técnico del laboratorio también puede
realizar más exámenes para determinar el mejor tratamiento. Además del coprocultivo, a menudo se
hacen otros exámenes de las heces tales como: Tinción de Gram en heces; Frotis fecal, bien;
Examen de huevos y parásitos en las heces [ADAM 2020]. Los principales agentes causantes son
Salmonella, Shigella, Campylobacter y Escherichia coli entre las bacterias, Entamoeba y Giardia
entre los parásitos y, entre los virus, Rotavirus, Adenovirus y un aumento reciente debido a Norovirus.
E. coli contiene numerosas serovariedades que causan la enfermedad por diferentes mecanismos
patogénicos. Una de esas categorías es E. coli productor de toxina de Shiga (STEC). Éste es
frecuente en nuestro país porque se encuentra en el intestino de bovinos y porcinos, ya que somos
un país ganadero, y llega al paciente a través de hamburguesas y otros alimentos cárnicos y
verduras pudiendo causar una temible complicación: el síndrome urémico hemolítico. Los casos que
pueden requerir tratamiento antimicrobiano: los casos de diarrea acuosa moderada en un niño bien
nutrido son autolimitados y no deben recibir antimicrobianos. En los casos de diarrea con heces
mucosanguinolentas o los casos de diarrea en niños febriles, desnutridos o deshidratados, se deben
estudiar los principales agentes que producen diarrea disenteriforme como Shigella, Campylobacter y
en ocasiones Salmonella, que pueden requerir antimicrobianos. Aunque hay casos que no deben
recibir tratamiento antimicrobiano, a veces el estudio de materia fecal ayuda al médico a conocer
rápidamente el diagnóstico de aquellos casos que no recibirán tratamiento antimicrobiano. Es el caso
de Norovirus, Rotavirus, Adenovirus y STEC. Últimamente ha adquirido gran importancia en todo el
mundo Norovirus como causante de casos de diarrea y brotes alimentarios [Cibic Laboratorios].

OBJETIVOS

● Aislar microorganismos por medio del coprocultivo.

● Identificar los tipos de microorganismos contenidos en la muestra.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

Diferentes agentes infecciosos (virus, bacterias y parásitos) pueden causar diarrea por diversos
mecanismos. A nivel mundial, las infecciones gastrointestinales siguen siendo una de las causas más
importantes de morbilidad y mortalidad entre los lactantes y los niños.

JUSTIFICACIÓN:

Esta práctica se realiza con el fin de poder observar cómo es que es la morfología de cada una de las
colonias y poder observar sus distintas características de cada una. Así como su identificación por
medio de otros medios.

HIPÓTESIS:

Si se consigue una muestra de material fecal de algún paciente, entonces podremos aislar e
identificar las distintas colonias y observar su morfología. Por lo tanto, seremos capaces de
observarlas en el microscopio.

METODOLOGÍA

Examen macroscópico de la muestra

1. Se comprueba su olor, consistencia, presencia de mucus, sangre, restos de alimentos sin digerir.

Examen en fresco. Observación en el microscopio: lugol- fresco:

1. Colocamos una gota diluida en agua destilada de la muestra en un portaobjetos y colocamos un
cubre encima.
Se realiza una dilución en un tubo de ensayo con una pequeña cantidad de heces recogida con la
ayuda de un asa de siembra desechable y se le añade un poco de agua destilada, se agita un poco y
se obtiene una gota de esta dilución. Dicha gota la colocamos en un portaobjetos y añadimos una
gota de Lugol donde colocaremos un cubreobjetos encima para su posterior observación al
microscopio.
Otro método de observación es realizando el mismo procedimiento pero sustituyendo el lugol por el
negro sudan. Esta tinción está indicada para la observación de grasa.

Siembra en medios de cultivo para el aislamiento de Salmonella y Shigella:

Se toma una muestra con el asa calibrada de las heces previamente diluida en SSF y se siembra en
agar McConckey y agar sangre. Se incuban por 48 h. Seleccionar las colonias típicas de Salmonella
o Shigella.
Si no se observa crecimiento de colonias lactosa negativas típicas de Salmonella y Shigella pasar al
método de enriquecimiento colocando 0.2 ml de la dilución de heces en 5 ml de caldo selenito y dejar
incubar 37oC durante 24 h.
Posteriormente, tomar una asada del crecimiento en medio selenito y sembrar por estría cruzada en
los medios Salmonella y Shigella, Verde brillante, Sulfito de bismuto, Hecktoen y XLD e incubar por
48 h. Seleccionar las colonias típicas del crecimiento de Salmonella y Shigella se deberá comprobar
por medio de pruebas bioquímicas las cuales vienen en el apartado de material de esta práctica.

RESULTADOS:
Fig. 1. Siembra en placa. Agar verde brillante.
Fig. 2. Siembra en placa. Agar entérico Hektoen.
Fig. 3. Siembra en placa. Agar sulfito bismuto.
Fig. 4. Siembra en tubo. Agar fenilalanina.
Fig. 5. Siembra en tubo. Agar TSI.
Fig. 6. Siembra en tubo. Agar LIA.

ANÁLISIS DE RESULTADOS:
El agar verde brillante (VB) es un medio altamente selectivo, se pudieron observar colonias amarillas
en la figura 1. Esto podría ser una posible E.coli. En el agar entérico Hektoen se observaron colonias
amarillas, lo cual indica la presencia de microorganismos fermentadores de la lactosa. En este caso,
también podría ser posible E.coli debido a que Salmonella, Shigella y Yersinia no fermentan la
lactosa. En el agar sulfito bismuto se observó la producción de SH2 de color negro, podría ser posible
Salmonella debido a que está es productora de ácido sulfhidrico. Para tener mayor precisión y poder
confirmar, se llevaron a cabo pruebas bioquímicas (LIA, TSI y agar fenilalanina). En el tubo de agar
fenilalanina la prueba dió negativa a P.mirabilis, y Morganela morganii. En cuanto a la prueba TSI dió
positiva a Escherichia coli. Finalmente se realizó la prueba LIA, la cuál dió un resultado negativo.

CONCLUSIONES:

Al elaborar esta práctica se analizó la muestra de excremento de un infante de 9 meses, realizándose

un cultivo en diferentes tipos de agares, aislando la muestra se logró observar la presencia de E.Coli,
Logrando observar que ell estudio de las heces permitió identificar en forma inmediata un agente
parasitario, este patógeno se logro observar en los tubos, gracias a las pruebas bioquímicas. El bajo
porcentaje de retorno positivo de coprocultivo nos impulsa a tomar recaudos al momento de la toma
de muestra correcta a fin de potenciar esta herramienta diagnóstica eficaz.

BIBLIOGRAFÍA:

ADAM (2020). “Coprocultivo”. A.D.A.M. [Web]. Recuperado de:

http://thnm.adam.com/content.aspx?productid=618&pid=5&gid=003758

Cibic Laboratorios. (2014). “Enfermedades diarréicas infecciosas: cuando efectuar un coprocultivo”.

Cibic Laboratorios. [Web]. Recuperados de:
https://www.cibic.com.ar/noticias/enfermedades-diarreicas-infecciosas-cuando-efectuar-un-coprocultiv
o/

MedlinePlus. (2022). “Coprocultivo”. MedlinePlus. [Web]. Recuperado de:

https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003758.htm