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UNIVERSIDAD NACIONAL INTERCULTURAL DE LA AMAZONIA

FACULTAD DE INGENIERÍA Y CIENCIAS AMBIENTALES

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

Informe 03

Siembra y asilamiento de bacterias

Asignatura : Microbiología Agroindustrial

Docente : Ing. Estacio Albornoz, Darwin Josué

Alumno : xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

Código de Alumno xxxxxxxxxxxxxx

Año y Semestre : 2022-2

Yarinacocha – Ucayali

Perú – 2022
I. INTRODUCCION

En el planeta tierra existe diferentes tipos de microorganismos que no se


encuentran aislados, sino que ellos estas unidos en conjuntos ya sea en el suelo,
aire, agua y alimentos expuestos en su mayoría.

Para llevar a cabo el estudio de estos microorganismos y de sus propiedades, es


necesario trabajar con especies aisladas, consiguiendo cultivos puros que contiene
un sólo tipo de microorganismo y que proviene de una sola célula, este crecimiento
o desarrollo se origina en medio sólido, una masa de células que es visible lo cual
lleva por nombre colonia.

Para conseguir estos cultivos puros se da a partir de una población microbiana, lo


cual se utiliza las técnicas de siembra y aislamiento de bacterias.

II. OBJETIVOS
2.1.Objetivo general
- Conocer la siembra y asilamiento de bacterias
2.3. Objetivo especifico
- Conocer los diferentes tipos de siembra
- Reconocer los instrumentos para realizar la siembra
- Conocer el procedimiento de siembra para el aislamiento de bacterias

III. REVISION BIBLIOGRAFICA


3.1. Bacteria
Microrganismo unicelular, que tienen un tamaño de 0,5 y 5 um. Son de varias
formas (cocos, espirales y bacilos, etc). Procariotas, no presentan núcleo
están compuestos de peptidoglicano y flagelos para moverse (Steward 2019).

3.2. Bacterias Gram positivas


Tiene una capa gruesa de peptidoglicano y no tienen una membrana lipídica
externa, mediante tinción de gram va adquirir un color purpura (Steward
2019).

3.3. Bacterias Gram negativas


Tienen una capa delgada de peptidoglicano y tienen una membrana lipídica
externa, mediante la tinción de gram va adquirir un color rojizo (Steward
2019).
3.4. Material para realizar la siembra
Cuadro 1. Material para empezar con la siembra
Asa de siembra Agua destilada
Estufa de laboratorio Rotulador
Mechero bunsen Guantes latex
Papel secante Agar agar
FUENTE: Capital (2021).
3.4.1. Inoculación de muestras
Las muestras pueden ser frutas, hortalizas, carne, aves, alimentos y
bebidas lo cual son realizados por métodos y uno de ellos es el de
hisopado (algodón), se utiliza humedecido con solución diluyente para
facilitar la recuperación bacteriana, en el muestreo de superficies,
después es llevado a un líquido para tener la solución, para luego
convertirse en la muestra a inocular en la placa Petri o tubo de ensayo
con los medios de cultivo ya solidificado (Barrero 2021).

3.4.2. Medio de cultivo


Técnica de laboratorio que consta de una solución con los nutrientes
necesarios para lograr condiciones favorables de pH y temperatura, el
crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales
(barrero 2021).

3.5. Técnicas de siembra para placas Petri

a. Agotamiento o estría cruzada


Se debe quemar el asa al rojo vivo en la flama del mechero antes y
después de usarla con el asa previamente quemada y enfriada en el área
de esterilidad, siembre, la bacteria en una placa de agar nutritivo, por
siguiente siembre en estría cruzada en la placa girando para ir rayando
con el fin de ir diluyendo el inoculo. Al final de la siembra las bacterias
quedarán bien separadas unas de otras., por otro lado, no olvide quemar
el asa de nuevo después realizado la siembra, por último, no olvide rotular
cada placa para identificarla (Urzua 2013).
b. Estría recta
Se empela para observar algunas características metabólicas o algún
efecto antagónico (Urzua 2013).
c. Estría continua
Se coloca el asa inoculada se coloca en una forma ligeramente inclinada,
en un punto de la periferia de la placa distribuiremos el inoculo con estrías
cerradas hasta cubrir hasta cubrir una tercera parte de la superficie del
medio y sin separar el asa lo colocamos de manera vertical y continuamos
las estrías más separas hasta cubrir toda la superficie (Urzua 2013).
d. Estría en cuadrantes
Se traza la placa de Petri en cuatro partes, después se toma el inoculo con
el asa y lo colocamos en un punto de la periferia del primer cuadrante,
procedemos a trazar las estrías trazadas sin tocar las líneas divisorias,
tapamos la caja y flameamos y enfriamos para volver a inocular y colocar
al siguiente cuadrante y así sucesivamente hasta terminar los cuatro
cuadrantes (Urzua 2013).
e. Inmersión
Se coloca el inoculo en una placa o caja de Petri y sobre el mismo se
vierte el medio de cultivo posteriormente fundido. Este método se utiliza
para microorganismos aerobios (Santambrosio 2009).

3.6. Técnicas de siembra en tubos


a. Siembra por estría ondulada
Se emplea para tener un desarrollo abundante del microorganismo y para
conservarlos por periodos cortos.

Se realiza introduciendo el asa ya esterilizada con el inoculo de siembra al


tubo después se empieza a distribuir en forma de estrías cerradas de
forma onduladas hasta cubrir toda la superficie del medio, después
sacamos el asa para luego flamear la boca del tubo para ser tapado y
pasar a la gradilla y así sucesivamente los demás tubos (Urzua 2020).
 Los materiales a empleados
- Asa bacteriológica
- Mechero
- Medios de cultivos en tubo
- Cultivos de bacterias y levaduras en placa
b. Siembra por picadura y estría
Se hace para algunas pruebas metabólicas se utiliza una combinación de
técnicas que es por picadura y estría. Tomamos el inoculo con la aguja de
siembra lo introducimos en forma vertical se realiza la siembra de estría
recta, debemos evitar romper y tocar a los costados para no perder el
inoculo, en cambio por picadura evitar llegar en la parte interna del tubo ya
inoculada (Urzua 2020).
- Los materiales utilizados
- Aguja de siembra
- Cultivos de bacterias en placa
- Medios de cultivos en tubos
- Mechero
3.4. Procedimiento para sembrar y aislar bacterias
3.4.1.Siembra por estría por agotamiento
Se consigue una buena separación de las colonias y aislarlas fácilmente,
para ello se funde el medio de cultivo, se vuelca la placa Petri ya rotulada
yse deja solidificar por unos minutos.
- Se desinfecta el lugar a trabajar
- Nuestro inoculo ya esta preparada quiere decir en microorganismo
que queramos encontrar.

- Antes sembrar se flamea el asa e hilo de siembra hasta que este


incandescente en el mechero, una vez fría se pasa a coger la colonia
y se tapa.

- Pasamos a inocular en nuestra Petri al lado del mechero para realizar


las estrías y por cada cuadrante se vuelve a flamear antes y después
(Flores2015).
IV. MATERIALES Y METODOS
4.1. Materiales
4.1.1. Material experimental
- Placa Petri
- Tubo de ensayo
- Medio de cultivo
- Asas de siembra
- Mechero
- Gradilla
- Algodón
4.2. Métodos
a. La práctica realizada de manera virtual, se procedió a escuchar y visualizar
atentamente, las técnicas de siembra y aislamiento de bacterias.

b. Donde daban a conocer cada técnica tanto para el tubo de ensayo y placas
Petri.
c. Después se procedió A tomar nota todo el procedimiento y aquellos puntos
que considere importante y que mostraron relación con los objetivos de la
presente práctica.

d. Con la información dada, se elaboró el presente informe de prácticas.

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
5.1. Resultado
Se conoció los instrumentos para la siembra y el procedimiento de siembra y
aislamiento de bacterias, por otro lado, también se conoció las técnicas de
siembra en el cual tenemos a estrías, cada 45°C, estrías cuadrantes, estrías
continuas, estrías extremo en placas Petri y en los tubos de ensayo lo que es
la siembra en forma inclinada o vertical con el hilo.

5.2. Discusión
Según capital (2021) nos menciona que los materiales a utilizar son asa de
siembra, estufa de laboratorio, entre otros materiales, pero en el video
brindado en la práctica nos menciona Savunisevilla (2012) que los materiales
para realizar la siembra de microrganismos son asa de siembra, hilo de
siembra, espátula de digralsky ya realizando la práctica recién menciona los
inóculos dentro del tubo de ensayo y placas Petri, mas no menciona como un
material a utilizar dentro de lasiembra de microrganismos.

Según Barrero (2021) nos menciona que las muestras para obtener la colonia
son de microrganismo presente en las alimentos y bebidas lo cual dará la
colonia para inocular al medio de cultivo, pero en la práctica Savunisevilla
(2012) no nos menciona la colonia (microorganismo) de inoculación para
realizar la siembra en los medios de cultivos solidificados, lo cual hubiera sido
de gran importancia que nos menciones el nombre de medio de cultivos y que
microrganismos se podría sembrar en ellos.

Según Barrero (2021) nos menciona que el medio de cultivo es una solución
con nutrientes necesarios para lograr el crecimiento favorable de
macroorganismo, y en el video brindado con lo cual se realizó la practica
Savunisevilla (2012) no menciona el medio de cultivo utilizado para la
demostración de la siembra en los tubos de ensayo y placas Petri lo realiza
por un inoculo que se desconoce, ya que si lo mencionara al menos
pudiéramos tener conocimiento en nutriente esencial del medio de cultivo
para el desarrollo de dicha bacteria que se desconoce .
Según Santambrosio (2009) nos menciona las técnicas de siembra en placas
Petri los cuales son de suma importancia para realizar la siembra entre ellas
tenemos estría cruzada, estría recta, estría continua, entre otras y en el video
brindado en la práctica Savunisevilla (2012) nos menciona las técnicas de
siembra en placas de Petri son las siguientes estrías continuas, estrías de un
extremo a otro de la placa, estrías cada 45° y estrías por cuadrantes pero no
menciona la técnica de estrías rectas y por inmersión lo cual obteniendo
todas estas técnicas nos damos cuenta que hay más técnicas para realizar la
siembra .
VI. CONCLUSION
Se logro conocer la siembra y aislamiento de bacterias, los procedimientos para
aplicar las técnicas de siembra y aso poder también aislar bacterias de interés, y
los diferentes instrumentos a utilizar durante el proceso.
VII. BIBLIOGRAFIA

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Trabajo presentado en el XII Congreso Nacional Forestal CONAFOR, Lima, PE.

5. Arenas, C; Fernández, J; Jordano, B. 2015. Estructura de edades, tamaños y


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propiedades de la madera de angiospermas mexicanas Universidad y Ciencia, vol.
21, núm. 42, dic, 2005, p. 45-55 Universidad Juárez Autónoma de Tabasco
Villahermosa, México

VIII. ANEXO

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