Está en la página 1de 10

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin

Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

I. INTRODUCCIN:
Las
tcnicas
de
aislamiento,
permiten
la
obtencin
de
microorganismos a partir de muestras complejas (suelo, agua,
alimentos, etc.) en las que hay una gran diversidad microbiana, as
como para comprobar la pureza de los cultivos obtenidos.
Para el estudio e identificacin de microorganismos estos deben
aislarse o separarse a partir de un cultivo mixto o de poblaciones que
se encuentran en la naturaleza. Existen varias tcnicas para el
aislamiento de microorganismos y la obtencin de cultivos puros.
Para el estudio e identificacin de microorganismos stos deben aislarse o separarse a
partir de un cultivo mixto o de poblaciones que se encuentran en la naturaleza. Existen
varias tcnicas para el aislamiento de microorganismos y la obtencin de cultivos puros,
dentro de las ms utilizadas se encuentra:
a. Siembra por estras en caja de Petri o tubo de ensayo.
b. Aislamiento de bacterias con una varilla angular de vidrio.

II. OBJETIVOS:

Con esta prctica se pretende estudiar las diferentes tcnicas


de aislamiento de un microorganismo.
Aprender la tcnica fundamental
empleada para la
transferencia.
Explicar el fundamento de diferentes medios de cultivo y
condiciones
de
incubacin
para
el
aislamiento
de
microorganismos con caractersticas especficas.
Aislar bacterias por siembra en estras.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

III. MATERIALES:
tubos de ensayo con agar
macConkey.

.Asa de Kolle.

caja Petri con agar macConkey.

Asa

digralsky.

Mechero

. Muestra mixta de agua

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

IV. MARCO TEORICO

TCNICA ASPTICA:

Limpiar perfectamente la mesa de trabajo con alcohol.


Lavarse las manos con
jabn y despus
frotrselas con un algodn
con alcohol.
Colocarse las mascarillas
y
guantes
quirrgicos a fin de evitar
contaminacin
al
medio de cultivo.
Colocar los tubos y dems
material
en
una
posicin adecuada en la que
se puedan alcanzar
sin dificultad y si n peligro de
quemarse.

Trabajar
siempre
junto
al mechero, ya que
este
proporciona
una
zona
de esterilidad de
aproximadamente 20 cm. de radio.
Antes de realizar cualquier siembra, esterilizar el
asa o aguja a fuego directo hasta el rojo vivo,
enfriar cerca del mechero, sembrar y volver a
esterilizar.
Durante la siembra, deben permanecer cerradas
las puertas y ventanas y no se debe hablar.

V. PROCEDIMIENTO

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

SIEMBRA DE MEDIO SOLIDO:


1.

Tomar una muestra de agua residual


domstica.

2.

3. Colocar la
muestra en
de ensayo

un tubo

4. Tomar la caja Petri, reposarla


sobre la palma de la mano, abrir
la tapa con el pulgar y el dedo
medio.

5. Colocar el inoculo en el borde


del agar y hacer una estra
inicial sin despegar el asa,
presionando, sin perforar el
agar, hasta cubrir la cuarta
parte de la caja.

6. Bajar la tapa de la caja y esterilizar el asa.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

7. Girar la caja Petri un cuarto de vuelta,


levantar la tapa y con el asa hecha el
agua residual domstico.

8. Tapar la caja y repetir. Marcar con plumn


.Incubar la caja de manera invertida.

METODO DISEMINADO (SOLIDOS):


1. Con la pipeta sacamos la muestra de
agua residual domstica.

2. Vaciamos 0.2ml a
la caja Petri.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

3. Con el asa Digralsky dejamos que


enfri.

4. implantamos a la caja Petri gotas y


esparcimos,

PROCESO FINAL
Colocar las muestras inoculadas con el
agua residual en la incubadora a una
temperatura de 38C

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

VI.
CONCLUCIONES
En la prctica pudimos observar formas de tcnicas de aislamiento
bacteriano, cada una con caractersticas especficas, siempre con las
medidas de bioseguridad para el manejo de los medios de cultivo y la
muestra que se tendr contacto directo, para evitar la aparicin de
otros microorganismos en nuestros cultivos sembrados.
Se coloc los cultivos preparados en la incubadora a una temperatura
condicionada para su crecimiento, la temperatura fue de 38 C.

VII. Bibliografa:
http://www.plagasydesinfeccion.com/desinfeccion/generador-de-ozono-parahttp://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen
/uni_02/56/cap309.htmn
https://www.google.com.pe/search?
q=aislamiento+de+microorganismos&biw=1366&bih=667&tbm=isch&imgil
=7cYr2EknDxaBLM%253A%253BuGocSLyKtAStrM%253Bhttp%25253A
%25252F%25252Fwww.faba.org.ar%25252Ffabainforma
%25252F429%25252FABCL.htm&source=iu&pf=m&fir=7cYr2EknDxaBLM
%253A%252CuGocSLyKtAStrM%252C_&usg=__y8aWSbvnMAAStAnIUlljqmTWGY
%3D&ved=0ahUKEwjzoZ3CuNLMAhWJRiYKHTTdDkYQyjcIRQ&ei=r10zV7OOH
4mNmQG0uruwBA#imgrc=bs7ghzJC-ZdEnM%3A

VIII. CUESTIONARIO:
1. A qu temperatura se encuban las muestras sembradas?

se encuban a una temperatura de 35C por 48 horas

2. Por q se flamea el instrumento de inoculacin antes y despus


de cada inoculacin?
Se utiliza para la esterilizacin de asas e hilos de siembra, La incineracin se
emplea para destruir microorganismos presentes en el ambiente y evitar que
tengan contacto con nuestra siembra y no alterarla.
y as no observar otro tipo de microorganismos de los que se sembr.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

Tcnicas de
aislamiento.
Se realiza un aislamiento de los
microorganismos presentes en un
cultivo mixto en caldo ordinario,
sobre agar nutritivo. Se siembran
dos placas de agar nutritivo, una
mediante la tcnica
del agotamiento de asa y otra
mediante la de estrias escocesas.
Estas tcnicas pretenden diluir la
carga microbiana que se deposita
sobre el medio de cultivo de forma
que, en los ltimos trazos de la siembra, haya tan pocas clulas que queden suficientemente
separadas unas de otras y puedan desarrollar colonias independientes.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

Tcnica de aislamiento y recuento: el banco de diluciones. Se realizan una serie de


diluciones seriadas a partir del cultivo mixto Con esta tcnica conseguimos adems de aislar
colonias, obtener un recuento del nmero de bacterias que tenemos en el cultivo.

Mtodo de aislamiento por


siembra por estra en placa.
Para obtener un cultivo
axnico: (a) esterilizar un asa
de siembra por flameado en la
llama de un mechero, (b)
introducirla en la suspensin
bacteriana para recoger una
muestra, (c) sembrar haciendo
estras sobre la superficie de
un medio slido en una placa
Petri, y (d) volver a esterilizar
el asa, tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo
grupo de estras en una regin nueva de la placa. Repetir el proceso
una tercera y una cuarta vez, hasta conseguir que los grupos de
clulas se diluyan y se separen clulas aisladas. (e) Despus de la
incubacin, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que
el cultivo es puro, repetir el proceso entero; para ello tomar una
colonia aislada y sembrar por estras una segunda placa.

Mtodo de vertido en placa.

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental

Universidad Nacional Daniel Alcides Carrin


Facultad de Ingeniera
Escuela de formacin profesional de Ingeniera Ambiental

Para obtener un cultivo axnico mediante este mtodo, (a) hacer diluciones
seriadas de la suspensin bacteriana hasta obtener una muestra con slo unos
pocos cientos de bacterias, (b) verter la muestra en un tubo con agar a sobrefusin,
mezclar y verter el contenido en una placa Petri. (c) Despus de la incubacin, se
desarrollan colonias en el agar (ms pequeas) y en su superficie (ms grandes).

Microbiologa-- Tcnicas de aislamiento Bacteriano-Escuela de Formacin Profesional de Ingeniera Ambiental