FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

PRÁCTICA N°4
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE NEUMONIA BACTERIANA, TUBERCULOSIS Y SARS-CoV-2

I. OBJETIVOS
1. Identificar, fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para
neumonía bacteriana
2. Identificar, fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para tuberculosis
3. Identificar a Streptococcus pneumoniae y Mycobacterium tuberculosis

II. MATERIALES
● Esputo fresco recién emitido (muestra externa)
● Set de coloración Ziehl Neelsen
● Set de coloración Gram
● 3 asas bacteriológicas, 3 mecheros
● Láminas portaobjeto
● Mascarilla, guantes

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA: DIAGNÓSTICO DE NEUMONÍA.

1. Realizar la coloración Gram con los esputos purulentos o mucopurulentos, observar al
microscopio realizando la lectura de las láminas.
2. La calidad del esputo expectorado es importante determinar. Se debe admitir los
esputos que contengan menos de 10 células epiteliales por campo (x100 aumentos),
si tiene más la muestra está formada por secreciones de la boca o garganta y el
cultivo no es pertinente por que suele ser engañoso. Se aceptan esputos que
contengan más de 10 neutrófilos polimorfonucleares (PMN) por cada célula epitelial; o
que tengan 25% o más de leucocitos PMN por campo, junto con unas pocas células
epiteliales escamosas, aseguran una excelente calidad de la muestra.
3. Realizar cultivos en agar sangre y agar MacConkey.
4. Las placas de agar sangre incubar con CO2 10% y Mac Conkey sin CO2, todas a 35 - 37 ºC.

5. Realizar la lectura de los cultivos a las 24 horas.

6. La muestra depende del órgano afectado, puede ser esputo, orina, LCR, biopsia, etc.
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7. Para vías respiratorias inferiores, se requiere los esputos de pacientes con tos productiva
por más de 15 días (sintomático respiratorio). Recolectar la muestra de esputo en
recipiente nuevo, estéril y de boca ancha, con tapa ajustada y segura de rosca.
8. Colorear con la técnica de Ziehl Neelsen, observando las medidas de bioseguridad:

a) Extender con mucho cuidado el esputo en lámina nueva y fijar la muestra al

calor suave.
b) Colocar fucsina fenicada de Ziehl Neelsen, que cubra la lámina.
c) Calentar hasta el desprendimiento de vapores (3 veces)
d) Lavar y decolorar con alcohol ácido
e)Colocar azul de metileno por 3 minutos, como colorante de contraste
f) Lavar, secar y observar a inmersión
g) Esquematizar las observaciones

9. La observación de bacilos ácido alcohol resistentes (b.a.a.r.) de color fucsina en la

muestra nos indica la presencia del bacilo tuberculoso.
Hacer la lectura por campo microscópico según el número de bacilos que contenga la muestra:

(-) : Si no se observan b.a.a.r.

( : Si se observa de 0 - 1 b.a.a.r. por campo microscópico

en 100 campos.
( : Si se observa de 1 - 10 b.a.a.r. por campo en 50 campos
microscópicos
(+++) : Si se observa más de 10 b.a.a.r por campo microscópico en 20
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DIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS: COLORACION DE ZIEHL NEELSEN (Baciloscopia)
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IV. CONCLUSIONES

V. EVALUACIÓN

VI. BIBLIOGRAFÍA
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DIAGNÓSTICO DE SARS-COV-2 (COVID-19)

El diagnóstico microbiológico de la infección por SARS-CoV-2 permite determinar la infección en

pacientes con infección respiratoria aguda leve, moderada o grave por SARS-CoV-2. La detección

del virus identifica a los pacientes que estarían contagiando para poder aislarlos, analizar los

contactos y cortar así la cadena de transmisión. El diagnóstico oportuno es fundamental como

estrategia de control de la pandemia COVID-19. En la época de las infecciones respiratorias es

frecuentemente indistinguibles de COVID-19, es necesario integrar la detección de SARSCoV-2 en

el algoritmo diagnóstico junto con los virus estacionales. Existen pruebas moleculares, antigénicas

y serológicas y se aplican según la etapa de la infección. En esta práctica se va a llevar a cabo las

pruebas serológicas que involucra menor riesgo para el procesamiento en el laboratorio, a

diferencia de las pruebas antigénicas o moleculares. Las pruebas serológicas tienen por finalidad

determinar la magnitud del brote o la amplitud de una infección en una población dada. Los

estudios de seroprevalencia ofrecen un panorama más completo de la manera como se ha

infectado esa población e identifica casos que no se detectaron al inicio de la infección.

I. OBJETIVOS
1. Identificar, los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2
2. Fundamentar los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2
3. Interpretar los métodos de diagnóstico para SARS-CoV-2

II. MATERIALES
● 6 lancetas
● Algodón
● Alcohol
● Kit de reactivos para Pruebas Rápidas Inmunocromatográficas para SARS
CoV-2 (6 cassettes)
● Mascarilla, guantes

III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

1. Colocar 10 uL de muestra sangre total, suero o plasma en el pocillo de muestra
del dispositivo.
2. Añadir 2 gotas del buffer
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3. Esperar 10 minutos el resultado

4. Realizar la lectura e interpretar los resultados

● Video diagnóstico de Covid-19: https://www.youtube.com/watch?v=HzBFGGMWk1Y

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● Video Pruebas rápidas Covid-19: https://www.youtube.com/watch?v=C_8_rDbkEC4

Diagnóstico de laboratorio:
A: las técnicas de análisis directo detectan componentes del virus en la muestra del
enfermo (secreciones respiratorias). La RT-PCR permite detectar secuencias específicas
del genoma viral; los inmunoensayos identifican antígenos del virus, para lo que se usan
anticuerpos monoclonales específicos.
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B:las técnicas de análisis indirectos buscan los anticuerpos específicos que el sistema
inmune del enfermo produce en respuesta a los antígenos virales
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IV. CONCLUSIONES

V. EVALUACIÓN

VI. BIBLIOGRAFÍA
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PRIMERA EVALUACIÓN PARCIAL

I. OBJETIVO
1. Evaluar los conocimientos adquiridos por los estudiantes durante las sesiones
prácticas de laboratorio.
2. Afianzar la aplicación de los fundamentos y técnicas aprendidas mediante la
evaluación práctica.

II. MATERIALES
● Microscopio
● Baño maria
● Guantes
● Alcohol de 70%
● Alcohol yodado.
● Láminas portaobjetos
● Medios de cultivo preparados: 3 tubos de caldo Nutritivo, 3 placas de agar
Mueller - Hinton, 3 placas de agar MacConkey y 3 placas de agar Sabouraud.
● KOH 20%
● Azul de lactofenol
● Peroxido de hidrogeno
● Cultivo de bacterias. (muestra externa)
● Muestras biológicas de secreciones de piel y esputo, uñas micoticas, frutas
con hongos. (muestra externa)
● 3 mecheros.
● 3 asas bacteriológicas
● Discos para antibiograma
● Set de coloración Gram.
● Set de coloración Ziehl Neelsen

III. EVALUACIÓN
❖ Normas de bioseguridad, lavado de manos clínico y quirúrgico, uso
del microscopio.
❖ Fundamentos de los medios de cultivo, Técnicas de siembra microbiológica.
❖ Efectos de los agentes físicos y químicos sobre los microorganismos,
fundamentos del antibiograma.
❖ Técnicas para determinación de dermatofitos, tinción gram y tinción
de Ziehl Neelsen.