Evaluación de enterobacterias presentes en

agua estancada

RESUMEN
El agua dulce es uno de los recursos no renovables mas importantes, debido a que es
indispensable para nuestro el desarrollo y supervivencia. Si no pasa por los contrales adecuados
el agua puede presentar enfermedades de trasmisión hídrica por lo que al ser tan importante para
nosotros es fundamental realizar los controles necesarios para que su consumo no produzcas
efectos nocivos a nuestra salud. Para el análisis de agua se emplean distintos métodos para la
detección de coliformes y el empleado en este trabajo fue el del Número más probable, que es un
sistema cualitativo que nos permite estimar un aproximado de una población de enterobacterias
en una muestra de agua. Se empleo esta técnica para evaluar las bacterias fecales que contenían
una muestra de agua estancada, obteniéndose un amplio crecimiento en los medios de cultivo y
pudiéndose presumir la presencia de una Escherichia coli, microorganismo perteneciente a la
familia de las enterobacterias.

INTRODUCCIÓN

Se considera agua potable a toda agua dulce que tras haber pasado por una serie de controles
físicos, químicos y microbiológicas se considera apta para el consumo humano, es decir, no
supone un riesgo para la salud. Esta debe cumplir ciertas características para poder calificarla
como agua capaz de consumirse sin generar repercusiones en el consumidor. Debe ser limpia y
segura, ser incolora, gozar de un sabor aceptable, libre de contaminantes orgánicos, inorgánicos
o radiactivos y en especial no debe contener microorganismos patógenos que puedan poner en
peligro la salud. 

El descubrimiento de numerosas enfermedades que tienen como medio de transmisión al agua,

ha llevado al desarrollo de exámenes que garanticen la calidad del agua que será destinada para
el consumo, ya sea para ser ingerida o para el tratamiento de alimentos. Para poder llevar un
control rápido y simplificado de la calidad del agua se buscan en estas, microrganismos fecales,
presentes en las heces e intestino del hombre y animales de sangre caliente, estos
microorganismos son los llamados Indicadores de contaminación fecal. La presencia o ausencia
de estos seres vivos nos sirve para regular que tan buena es la calidad que del agua se analiza, ya
que al estar presentes nos indicarían una contaminación fecal

El número más probable o también llamada técnica de dilución en tubo, es un sistema

cuantitativo antiguo que nos proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana
presente en una muestra. Para llevar a cabo la técnica, se emplean una serie de diluciones en
serie de la muestra de cultivo, en un medio líquido el cual sea el adecuado para el crecimiento de
dichos microorganismos, con el uso de un volumen diez veces mayor. Luego, se proceden a
incubar las muestras de esos tubos y luego de haber trascurrido un periodo de tiempo, se
examinan los tubos. Se tomarán como resultados positivos (para enterobacterias) aquello con
turbidez y gas (presencia de burbuja en la campan de Durham) y como negativos (para
enterobacterias) aquellos tubos sin turbidez o aquellos que presentarán turbidez, pero carecerán
de una burbuja en la campana de Durham.

MATERIALES Y MÉTODOS
Para el siguiente trabajo practico se utilizó una muestra de agua estancada proveniente de un
charco. La muestra fue cultivada en un medio líquido, en grupos de tres tubos, prestando cada
triplete de tubos una dilución diferente de muestra. Se tomaron como resultados positivos (para
enterobacterias) aquello con turbidez y gas (presencia de burbuja en la campan de Durham) y
como negativos (para enterobacterias) aquellos tubos sin turbidez o aquellos que presentaron
turbidez, pero carecen de una burbuja en la campana de Durham.

Para poder diferenciar los microorganismos que podríamos encontrar en la muestra, sembramos
un poco de esta en un medio selectivo y diferencial EMB Levine, y también en un agar nutritivo
para asegurarnos de que hubiera crecimiento.

RESULTADOS
 Después de haber dejado los tubos incubando por al menos 24 horas en la estufa a 37° , los
resultados obtenidos fueron los siguientes:

Fig 1. Dilución muestra 0.1 mL Fig 2. Dilución muestra 1 mL Fig 3. Dilución muestra 10 mL

 En todos los casos de los tres tubos con diferentes diluciones de la muestra, solo uno de
los tubos dio positivo para enterobacteria, se puede inferir esto debido a la presencia de
burbujas en la campana de Durham.

Volumen 0.1 0.1 mL 0.1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 10 mL 10 mL 10 mL

de muestra mL
Turbidez + + + + + + + + +
Gas - + - - + - - + -

Posteriormente de haber incubado las placas con la muestra por al menos 24 horas a 37° en la
estufa, se obtuvo lo siguiente:
 Fig. 4. Muestra en Agar nutritivo Fig. 5. Muestra en Agar EMB Levine

 Se pudo apreciar un gran crecimiento en ambos cultivos. En la placa con medio de

cultivo EMB Levine se obtuvo una colonia de E. Coli, esto lo podemos inferir debido al
característico color negro con brillo metalizado que este tipo de microrganismo presenta
en este medio de cultivo selectivo y diferencial.

CONCLUSIÓN Y DISCUSIÓN
Tras el análisis podemos observar que hubo un crecimiento en todos los tubos que contenían
distintas cantidades de la muestra de agua, pudiéndose confirmo esto gracias a la turbidez que
cada uno de los tubos presentó. A su vez se pudo obtener que, en varios tubos aparecieron
burbujas en la campana de Durham lo cual nos daría un indicio para la presencia de alguna
enterobacteria. Pudiéndose inferir que la enterobacteria generadora de ese positivo fue
Escherichia coli que, gracias al medio selectivo y diferencial, el EMB Levine, se contempló una
colonia de este microorganismo que habitualmente está presente en materia fecal. Se puede
deducir que la muestra tomada de agua estancada tiene un alto porcentaje de microrganismo y
algunos patógenos c como Escherichia coli, por lo que se recomienda el evitar la manipulación
de este tipo de agua, para así evitar algún riesgo que perjudique de nuestra salud.