Universidad Autónoma de San Luis Potosí

Facultad de Ciencias Químicas

Ingeniería de Bioprocesos
Semestre 4
Laboratorio de Bioquímica I

"Cuestionario Pre-Laboratorio Determinación de ADN y ARN por difenilamina

y orcinol"

Angela Sofía García González

Sesión de laboratorio: Determinación de ADN y ARN por difenilamina y orcinol

Contesta las siguientes preguntas:

1. Escriba la estructura de los nucleótidos que conforman el ADN y ARN

Un nucleótido consta de una molécula de azúcar (ya sea ribosa en el ARN o

desoxirribosa en el ADN) unida a un grupo fosfato y a una base nitrogenada.
Las bases que se utilizan en el ADN son la adenina (A), citosina (C), guanina
(G) and timina (T). En el ARN, la base uracilo (U) toma el lugar de la tiamina.

2. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de difenilamina con el ADN y ARN?

Cuando se trata el ADN con difenilamina en condiciones ácidas, se forma un

compuesto azul con una absorción definida máxima a 595 nm. Esta reacción la
dan en general las 2-desoxipentosas y no es específica para el ADN. En
solución ácida, la estructura lineal de una desoxipentosa se convierte a la forma
b- hidroxilevulinoaldehído altamente reactiva y que reacciona con difenilamina
para dar un complejo azul.

3. ¿Qué otras moléculas pueden reaccionar con la difenilamina, dando falsos

positivos en la identificación de ácidos nucleicos?

El grupo fosfato se identifica por la reacción para fósforo inorgánico, en medio

ácido, con el molibdato (reactivo 1) da fosfomolibdato, color amarillo, que es
reducido luego por el ácido ascórbico (reactivo 2) a azul de molibdeno, color
azul verdoso. El reactivo 3 (arsenito/citrato) se combina con el exceso de
molibdato impidiendo su reacción posterior con otros fosfatos.
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Ingeniería de Bioprocesos
Semestre 4
Laboratorio de Bioquímica I

Bibliografía

1. Nucleótido [Internet]. Genome.gov. Available from: https://www.genome.gov/es/genetics-

glossary/Nucleotido#:~:text=Un%20nucle%C3%B3tido%20consta%20de%20una
2. Edu.ar. [citado el 22 de agosto de 2022]. Disponible en:
http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-content/uploads/2010/08/2011-TP-8-
Extracci%C3%B3n-y-caracterizaci%C3%B3n-de-DNA.pdf