Informe de Laboratorio Bioquimica

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD
ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA

201103 – BIOQUÍMICA
INFORME DE LABORATORIO
BIOQUÍMICA
PRESENTADO POR
NEYY DÁVILA - Código: 27143005
Correo: dana_samuel@hotmail.com
Celular: 3127966590
Tutor virtual. Alberto García
Grupo.201103-25
ROSA DELGADO – Código: 59825315

Correo. dialvid@gmail.com
Celular. 3206915802
Grupo. 201103-26
YURANY ZAMUDIO – Código:

Correo. Mayerliz2011@hotmail.es
Celular. 3128976338
GRUPO: 201103_29
WALTER BOLAÑOS – Código: 1.085.687.645

Correo. walterbolaos@hotmail.com
Celular.3128567916
Grupo.201103-29
DIANA PINTA – Código: 1086330751

Correo. anaid93@live.com
Celular. 3137740010
GRUPO: 201103_29
PRESENTADO A:
LUCILA RIASCOS FORERO
Tutora Laboratorio
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

CEAD PASTO
Mayo, 2015
PRÁCTICA LABORATORIO 1: MÉTODOS CUALITATIVOS PARA LA

IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
INTRRODUCCION
En este laboratorio fue muy importante saber trabajar en equipo, para realizar las
diferentes pruebas con cuidado teniendo un buen manejo de los reactivos con el
fin hacer un buen trabajo para identificar las proteínas.
Las proteínas son principios inmediatos orgánicos constituidos por largas cadenas
de aminoácidos los cuales se une entre sí mediante enlaces peptídicos. La
existencia del enlace peptídico, de aminoácidos azufrados, puede ponerse de
manifiesto en el laboratorio mediante una serie de reacciones coloreadas
específicas que sirven para la identificación de proteínas. Para esta práctica se
realizan las diferentes pruebas como lo son la de biuret, millón, xantoproteica,
grupos SH, reacción de la ninhidrina, prueba del nitro prusiato, precipitación
acídica, precipitación acídica, solventes orgánicos, desnaturalización por calor,
metales pesados, en todas estas obtuvimos diferentes resultados que fueron muy
interesantes.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
 Identificar por medio de las diferentes pruebas en el laboratorio la tinción de

aminoácidos y proteínas.
 Conocer las diferentes reacciones que hubo con la leche, huevo, y jugo en
las pruebas xantoproteica, prueba de biuret, millón, grupos SH, reacción de
la ninhidrina, prueba de nitropruasiato, precipitación acídica, solventes
orgánicos, desnaturalización por calor, metales pesados
OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Hacer un uso adecuado de los elementos de trabajo del laboratorio.

 Seguir paso a paso las medidas para que las pruebas salgan positivas.
 Realizar cada prueba con cuidado.
 Determinar la solubilidad de las proteínas.
MARCO TEORICO
Por la estructura peptídica y la presencia de determinados grupos (grupos R),
las proteínas pueden reaccionar con una variedad de agentes originándose
productos coloreados. Estas reacciones son la base para la determinación
cuantitativa y cualitativa de las proteínas y enzimas. Por presentarse variaciones
en la composición de los aminoácidos delas diferentes proteínas, se manifiestan
diferentes colores y grados de intensidad para una misma reacción,
íntimamente relacionado con la naturaleza de la proteína analizada.
PRUEBA DE LA NINHIDRINA (HIDRATO DE TRICETOHIDRINDENO).
Todas aquellas sustancias que presentan al menos un grupo amino y uno
carboxilo libre, reaccionaran con la ninhidrina. La positividad se manifiesta por la
aparición de un color violáceo o amarillo. Debido a que las proteínas y los
aminoácidos, poseen esta característica, la reacción sirve para identificarlos.
Algunas soluciones de amonio y aminas, dan la coloración característica,
aparentemente debido a una oxidación y reducción intermolecular de la ninhidrina
en presencia de amoníaco. Los aminoácidos porina e hidroxiprolina, que no
poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un color rojo que pasa rápidamente a
amarillo.
REACCION DE LA PRUEBA DE LA NINHIDRINA
PRUEBA DE BIURET
Es una prueba general para polipéptidos y proteínas ya que sirve para reconocer
las uniones peptídicas. La positividad se manifiesta por la aparición de una
coloración violeta. La formación de un complejo de coordinación entre los cationes
cúpricos en medio alcalino con las uniones peptídicas.
REACCION DE LA PRUEBA DE BIURET
PRUEBA DE SULFATO DE AMONI
O
Las proteínas, como otro coloide son precipitadas por soluciones concentradas de
sales de amonio [NaCl. (NH4) 2SO4 y NaSO4]. Aparentemente la precipitación se
debe a la neutralización y deshidratación de la molécula, seguida de agregación y
precipitación.
PRUEBA XANTOPROTEICA
Es una reacción que reconoce los aminoácidos que poseen el grupo bencénico
(tirosina, fenilalanina, triptófano). Las proteínas que tienen en su composición
estos aminoácidos también darán la reacción. La positividad se reconoce por la
aparición de un color amarillo o verde debido a la formación de nitrocompuestos.
PRUEBA DE LOS GRUPOS SH
Es una prueba para identificar aminoácidos azufrados y las proteínas que los
contienen, se reconocen por la formación de una coloración negra o gris. La figura
siguiente muestra dicha reacción.
REACCION DE LOS GRUPOS SH
PRUEBA DE MILLÓN
La reacción es debida a la presencia del grupo hidroxifenílico (-C6H4OH) en la
molécula proteica. Cualquier compuesto fenólico no sustituido en la posición 3,5,
como la tirosina, fenol y timol, dan positiva la reacción. El mecanismo de la
reacción es poco conocido, posiblemente se deba a la formación del complejo
oxido de mercurio y fenol
DESNATURALIZACIÓN POR CALOR
Una pérdida de la estructura tridimensional suficiente para causar pérdida de la

función se llama desnaturalización. Se forma un conjunto de cadenas poli
peptídicas con distinto grado de plegamiento. La desnaturalización no significa
que siempre se obtenga la cadena poli peptídica totalmente desplegada. Los
productos de desnaturalización en solución se agregan físicamente y según las
condiciones de pH y fuerza iónica, precipitan.
El objetivo de elegir un paso de purificación desnaturalizante es crear las
condiciones donde la proteína de interés no se desnaturalice mientras que los
otros componentes se desnaturalicen y precipiten.
PRUEBA PARA METALES PESADOS

Los metales pesados tienen el efecto de precipitar proteínas de sus soluciones
creando enlaces entre los grupos amino libres y los grupos carboxilo libres.
Los iones más comúnmente usados para detectar la presencia de proteínas

Incluyen Zn2+, Fe3+, Cu2+, Sb3+, Ag1+, Cd2+, and Pb2+
Entre los metales, Hg2+, Cd2+, and Pb2+ tienen una alta toxicidad. Estos pueden
causar serios daños a las proteínas (especialmente enzimas) desatorándolas.
Victimas que han ingerido iones de mercurio o plomo (Hg2+ o Pb2+) se tratan con
un antídoto de algún alimento rico en proteínas. La proteína se combina con los
iones de mercurio y plomo minimizando la absorción de tales iones. Los alimentos
más usados son leche y clara cruda de huevo. La proteína que se precipita es
removida inmediatamente del estómago mediante un lavado estomacal.
PRÁCTICA 1: MÉTODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE
AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS EN HUEVO, LECHE Y JUGO.
PROCEDIMIENT CANTID
O AD
RESULTADO
PRUEBA EN UN TUBO DE A IMAGEN
OBTENIDO
ENSAYO ADICION
COLOCAR: AR
HUEVO 2 ml
NaOH al 30%
(cuidado, provoca 2 ml
quemaduras
Mezclar e ir
añadiendo gota a
gota el
Coloración violeta
sulfato cúprico al
es positivo para
1% (CuSO4),
proteínas por la
BIURET agitando
coloración que se
Después de cada
obtuvo.
adición, hasta la
aparición de un
color violeta, azul
o amarillo. El
color
violeta indica la
reacción positiva
HUEVO 2ml
REACTIVO DE
0.5 ml
MILLÓN MILLÓN
Al llevarlo a baño
Llevar a baño de
maría da un color
agua hirviendo
rojo formando un
por
precipitado
5min.Un color
rojo oscuro es
resultado
positivo.
HUEVO
2 ml
HNO3
concentrado por
las paredes del se obtuvo un color
1mL
tubo, (cuidado, amarillo fuerte,
XANTOPROTEICA
provoca precipitado de
quemaduras). consistencia más
Mezclar bien, dura que la
calentar a la baño precipitación de la
leche
maría y observar
un color amarillo
claro. Adicionar
solución de
NaOH al 40%
2 ml
lentamente sin
agitar y observar
un naranja
intenso como
resultado
positivo.
GRUPOS SH HUEVO 1 ml Negativo para

Hidróxido de 1 ml carbohidratos.
sodio al 40 %
(NaOH),
(cuidado, provoca
quemaduras).
Acetato de Plomo 1 ml
al 0.5 %
Mezclar bien,
calentar a baño
de agua hirviendo
por 4 min, un
precipitado negro
es prueba
positiva.
HUEVO 1ml positivo
AJUSTAR PH A
REACCIÓN DE 7.0
LA Solución de 1ml
NINHIDRINA ninhidrina, hervir
a baño maría por
2 min. Observar
coloración violeta
o morado intenso
PRUEBA DEL HUEVO 0.5 ml En la parte de
NITROPRUSIA Solución de nitro arriba amarillo
TO prusiato de sodio claro casi
Mezclar con el 2 ml transparente y al
extracto fondo
problema transparente.
Adicionar
Hidróxido de 0. 5 ml
amonio (cuidado,
provoca
quemaduras y es
irritante para
Piel y fosas
nasales), deje
reposar por 5
min.
PRECIPITACI HUEVO 2 ml se observa la
ÓN ACÍDICA ácido acético al 0.5 ml sustancia
30% transparente pero
Agite y observe la en el medio hay
formación una partícula
precipitado blanca espesa
(enturbiamiento)
Solución 1 ml
saturada de
Cloruro de sodio
(NaCl)
Mezclar bien y
calentar a la
llama por 1 min.
se
presenta un
enturbiamiento
más o menos
intenso
que persiste al
enfriamiento,
también puede
Observarse
pequeños
grumos en las
paredes del tubo.
Observe el tubo
sobre un fondo
oscuro.
SOLVENTES HUEVO 2ml Precipitado,

ORGÁNICOS Etanol al 95%. 2ml espeso blanco en
Observe la la parte de arriba y
formación de abajo liquido
precipitado amarillo claro.
(enturbiamiento)
HUEVO 2ml precipitado turbio
SOLVENTES Acetona 2ml
ORGÁNICOS Observe la
formación de
precipitado
(enturbiamiento)
DESNATURAL
Precipitado de
IZACIÓN HUEVO 2ml
color blanco
POR CALOR
Caliente en agua
hirviendo durante
10 minutos
asegurándose
que la
temperatura
interna llegue
a los 95 – 100ºC. 2ml
Observe la
formación de
Precipitado
(enturbiamiento).
HUEVO 2 ml
Gotas del metal 5 gotas Se forma un
METALES Calentar precipitado de
PESADOS suavemente a color blanco
baño maría si no
observa reacción
inmediata.
PROCEDIMIENT CANTID
O AD
RESULTADO
OBTENIDO
ENSAYO ADICION
COLOCAR: AR
JUGO 2 ml No es positivo
NaOH al 30% para proteínas.
(cuidado, provoca 2 ml
quemaduras
Mezclar e ir
añadiendo gota a
gota el
sulfato cúprico al
1% (CuSO4),
BIURET agitando
Después de cada
adición, hasta la
aparición de un
color violeta, azul
o amarillo. El
color
violeta indica la
reacción positiva
JUGO 2ml
REACTIVO DE
0.5 ml
MILLÓN MILLÓN
Llevar a baño de Se obtuvo color

agua hirviendo amarillo en la parte
por de arriba y abajo
5min.Un color transparente
rojo oscuro es
resultado
positivo.
JUGO 2 ml Precipitado de
HNO3 color amarillo claro
concentrado por
las paredes del
1mL
tubo, (cuidado,
XANTOPROTEICA
provoca
quemaduras).
Mezclar bien, 2 ml
calentar a la baño
maría y observar
un color amarillo
claro. Adicionar
solución de
NaOH al 40%
lentamente sin
agitar y observar
un naranja
intenso como
resultado
positivo.
GRUPOS SH JUGO 1 ml
Hidróxido de
sodio al 40 %
(NaOH), 1 ml
(cuidado, provoca
quemaduras).
Acetato de Plomo Positiva para
1 ml
al 0.5 % carbohidratos.
Mezclar bien,
calentar a baño
de agua hirviendo
por 4 min, un
precipitado negro
es prueba
positiva.
JUGO
AJUSTAR PH A 1ml
7.0
Solución de
negativo
ninhidrina, hervir
REACCIÓN DE
a baño maría por
LA NINHIDRINA 1ml
2 min. Observar
coloración violeta
o morado intenso
PRUEBA DEL JUGO Se ve un color
NITROPRUSIAT Solución de nitro 0.5 ml anaranjado casi
O prusiato de sodio transparente abajo
Mezclar con el y en la parte de
extracto 2 ml arriba anaranjado
problema oscuro
Adicionar .
Hidróxido de 0. 5 ml
amonio (cuidado,
provoca
quemaduras y es
irritante para
Piel y fosas
nasales), deje
reposar por 5
min.
PRECIPITACIÓN JUGO 2 ml
ACÍDICA ácido acético al 0.5 ml
30%
Agite y observe la
formación
precipitado
(enturbiamiento)
Solución 1 ml
saturada de
Cloruro de sodio
(NaCl)
Mezclar bien y
calentar a la
llama por 1 min. anaranjado en la
se parte de arriba y
presenta un abajo transparente
enturbiamiento
más o menos
intenso
que persiste al
enfriamiento,
también puede
Observarse
pequeños
grumos en las
paredes del tubo.
Observe el tubo
sobre un fondo
oscuro.
SOLVENTES JUGO 2ml No se ningún

ORGÁNICOS Etanol al 95%. 2ml cambio
Observe la
formación de
precipitado
(enturbiamiento)
SOLVENTES JUGO 2ml No se nota ni

ORGÁNICOS Acetona 2ml ninguna reacción.
Observe la
formación de
precipitado
(enturbiamiento)
JUGO 2ml
Caliente en agua
hirviendo durante
10 minutos
asegurándose Se nota un color
DESNATURALIZ
que la claro pero no tubo
ACIÓN
temperatura 2ml reacción de
POR CALOR
interna llegue precipitación.
a los 95 – 100ºC.
Observe la
formación de
Precipitado
(enturbiamiento).
JUGO 2 ml
Gotas del metal 5 gotas
Se forma un
precipitado, su
espesor está en la
METALES Calentar parte de arriba y
PESADOS suavemente a liquido casi
baño maría si no transparente en la
observa reacción parte de abajo
inmediata.
PROCEDIMIENT CANTID
O AD
RESULTADO
OBTENIDO
ENSAYO ADICION
COLOCAR: AR
LECHE 2 ml positivo para
NaOH al 30% proteínas
(cuidado, provoca
quemaduras
2 ml
Mezclar e ir
BIURET añadiendo gota a
gota el
sulfato cúprico al
1% (CuSO4),
agitando
Después de cada
adición, hasta la
aparición de un
color violeta, azul
o amarillo. El
color
violeta indica la
reacción positiva
LECHE 2ml
REACTIVO DE
0.5 ml
MILLÓN MILLÓN
Llevar a baño de
agua hirviendo Se obtuvo un
por precipitado
5min.Un color
rojo oscuro es
resultado
positivo.
LECHE 2 ml Precipitado de
HNO3 color amarillo
concentrado por
las paredes del
1mL
tubo, (cuidado,
provoca
quemaduras).
XANTOPROTEICA
Mezclar bien, 2 ml
calentar a la baño
maría y observar
un color amarillo
claro. Adicionar
solución de
NaOH al 40%
lentamente sin
agitar y observar
un naranja
intenso como
resultado
positivo.
GRUPOS SH LECHE 1 ml
Hidróxido de
sodio al 40 %
(NaOH), 1 ml
(cuidado, provoca
quemaduras).
Acetato de Plomo
1 ml
al 0.5 % Positiva para
Mezclar bien, carbohidratos.
calentar a baño
de agua hirviendo
por 4 min, un
precipitado negro
es prueba
positiva.
LEHCE
AJUSTAR PH A 1ml
7.0
Solución de
negativo
REACCIÓN DE ninhidrina, hervir
LA a baño maría por
1ml
NINHIDRINA 2 min. Observar
coloración violeta
o morado intenso
PRUEBA DEL LECHE Precipitado de
NITROPRUSIA Solución de nitro 0.5 ml color degradado,
TO prusiato de sodio predomina el
Mezclar con el blanco al fondo,
extracto 2 ml seguido de
problema amarillo oscuro y
Adicionar amarillo claro en
Hidróxido de 0. 5 ml poca cantidad.
amonio (cuidado, .
provoca
quemaduras y es
irritante para
Piel y fosas
nasales), deje
reposar por 5
min.
PRECIPITACIÓ LECHE 2 ml
N ACÍDICA ácido acético al 0.5 ml
30%
Agite y observe la
formación
precipitado
(enturbiamiento)
Solución 1 ml
saturada de
Cloruro de sodio
(NaCl)
Mezclar bien y
calentar a la Precipitado de
llama por 1 min. color blanco, más
se espeso en la parte
presenta un de arriba.
enturbiamiento
más o menos
intenso
que persiste al
enfriamiento,
también puede
Observarse
pequeños
grumos en las
paredes del tubo.
Observe el tubo
sobre un fondo
oscuro.
SOLVENTES LECHE 2ml No se ningún

ORGÁNICOS Etanol al 95%. 2ml cambio
Observe la
formación de
precipitado
(enturbiamiento)
LECHE 2ml Se obtuvo un color
SOLVENTES Acetona 2ml blanco con una
ORGÁNICOS Observe la franja amarilla en
formación de la parte de abajo y
espeso. Arriba
blanco menos
espeso
precipitado
(enturbiamiento)
LECHE 2ml
Caliente en agua
hirviendo durante
10 minutos precipitado de
asegurándose color amarillo
que la claro, su espesor
DESNATURALI temperatura está en la parte de
ZACIÓN interna llegue abajo y arriba, en
2ml
POR CALOR a los 95 – 100ºC. el medio se
Observe la encuentra un
formación de líquido
Precipitado transparente
(enturbiamiento).
LECHE 2 ml
Gotas del metal 5 gotas
precipitado blanco
Calentar de espesor en la
METALES
suavemente a parte de arriba y
PESADOS
baño maría si no abajo, se nota
observa reacción liquido en el centro
inmediata.
CONCLUSIONES
 Si no se realiza las pruebas con sus respectivos pasos la prueba tiende a

no salir positiva, por lo tanto tocaría volver a intentarlo.
PRÁCTICA DE LABORATORIO 2
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
INTRODUCCIÓN
La realización de esta actividad nos permitió ver el cambio que sufre las enzimas
por factores como la temperatura, el tiempo que transcurre para que la enzima se
desnaturalice, o se cataliza la degradación del almidón.
El almidón en presencia del Lugol presenta una coloración azulada debido a la

interacción física entre el yodo y las moléculas de almidón. Cuando la amilasa
degrada el almidón, elimina esa propiedad de interactuar con el yodo por lo tanto
presenta coloración azulada.
Se trata de determinar cuál es la temperatura y pH óptimos de esta enzima. Se

realizan diferentes pruebas para determinar sus cambios.
Teniendo en cuenta que las enzimas son macromoléculas, como las proteínas,
siendo estas las catalizadoras de las reacciones bioquímicas. Es importante
destacar que las enzimas no modifican el balance energético ni el equilibrio de
aquellas reacciones en las que intervienen: su función se limita a ayudar a
acelerar el proceso. Esto quiere decir que la reacción bajo el control de una
enzima alcanza su equilibrio de manera mucho más rápida que una reacción no
catalizada.
MARCO TEÓRICO
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA:
La sustancia sobre la cual actúa una enzima se llama sustrato. Los sustratos son
específicos para cada enzima:
El grado de especificidad de las enzimas es muy alto, pueden distinguir incluso

entre diferentes tipos de isómeros. Se cree que la especificidad de la enzima es
debido a la forma particular de una pequeña parte conocida como sitio activo, la
cual se fija a la contraparte complementaria en el sustrato.
Factores que afectan la actividad enzimática
Concentración del sustrato.- A mayor concentración del sustrato, a una

concentración fija de la enzima se obtiene la velocidad máxima. Después de que
se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentración del sustrato no tiene
efecto en la velocidad de la reacción.
Concentración de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un

aumento en la concentración de la enzima aumenta la velocidad enzimática hacia
cierto límite.
Temperatura.- Un incremento de 10°C duplica la velocidad de reacción, hasta

ciertos límites. El calor es un factor que desnaturaliza las proteínas por lo tanto si
la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su actividad.
pH.- El pH óptimo de la actividad enzimática es 7, excepto las enzimas del

estómago cuyo pH óptimo es ácido.
Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean

activadores o coenzimas para funcionar adecuadamente. Para las enzimas que
tienen cofactores, la concentración del cofactor debe ser igual o mayor que la
concentración de la enzima para obtener una actividad catalítica máxima.
Los resultados que obtuvimos nos demostraron que la velocidad enzimática se ve

afectada por la presencia de enzimas que hay en la solución.
La amilasa es una enzima que actúa en los procesos de digestión de

carbohidratos, especial mente actúa sobre el almidón, es una enzima glucolítica, y
se presenta en las glándulas salivales en el ser humano.
OBJETIVOS
OBEJTIVO GENERAL
 Demostrar la acción de la amilasa salival sobre el almidón
Identificar que la amilasa es una enzima proteica que se encuentra en la

saliva humana y cataliza la degradación del almidón, que
es un polisacárido de reserva vegetal.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival.
 Determinar características básicas de la reacción de hidrólisis del almidón

catalizada por la amilasa salival.
 Asociar el efecto de la concentración de la enzima, la temperatura y el pH

sobre la reacción de degradación de almidón.
 Dentro del proceso digestivo es necesario degradar las biomoléculas a nivel
es más sencillos para poder absorbidas, reacciones en las cuales actúan
diversas enzimas, entre las que se cuenta la Amilasa Salival o ptialina, que
participa en la degradación de Almidón, obteniéndose Maltosa y Glucosa.
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo
Gradilla para tubos
Erlenmeyer de 100 ml
Plaquetas de porcelana
Pipetas de 5 ml
1 probeta de 100 ml
Papel indicador de pH
Solución de almidón al 0,5% + NaCl al 0,25%
Amortiguadores de pH: (3,0) (5,0) (7,0) (10,0)
Baño de 37 °C
Baño de agua hirviendo
Baño de hielo
1 beaker de 50 ml
1 termómetro
Mechero
Agua
Papel absorbente.
Saliva de un estudiante.
1. Estimule el flujo de saliva y colecte 10ml en una probeta de 100 ml.
2. Con ayuda de una probeta y depositando las soluciones en el Erlenmeyer de

100ml realice una serie de diluciones de la saliva con agua de la llave:
3. Mida la actividad de las cuatro diluciones de saliva de la siguiente manera:
a. En las placas de porcelana agregue una gota a casa pozo de solución de yodo.
b. En un tubo de ensayo (tubo 1) vierta 2 ml de amortiguador de pH 7.0 y 2 ml de

la suspensión de almidón al 0.5%. Pruebe la presencia de almidón sacando una
gota de la suspensión de este tubo y agréguela en uno de los pozos de la placa de
porcelana. Verifique que dé el color azul intenso característico como “blanco de
reacción”
c. En otro tubo (tubo 2) vierta 1 ml de solución de saliva al 10%.

d. Registre el tiempo cero (0) en su cronometro e inmediatamente vierta el

contenido del tubo con el almidón (tubo 1) en el tubo que contiene la saliva al 10%
(tubo 2), agite y comience la medición del tiempo de la reacción; para ello cada 10
segundos saque una gota del tubo de la mezcla y colóquela en un pozo con yodo
de la plaqueta de porcelana.
e. Continúe la prueba cada 10 segundos hasta que el color sea igual al de la

solución de yodo, este será el indicio de que la reacción ha terminado. Escriba el
dato del tiempo en minutos transcurrido desde el comienzo hasta el final de la
reacción y calcule la velocidad como el inverso del tiempo 1/t en min–1.
4. Repita el mismo procedimiento con las demás diluciones de saliva (5%, 2%,
1%). Dependiendo de las velocidades de reacción, se pueden alargar los
intervalos de tiempo entre las pruebas.
5. Registre cada uno de los datos obtenidos tanto en minutos como en min-1.
Velocidad de Reacción vs. Temperatura

1. Determine los tiempos de reacción de la hidrólisis del almidón a pH 7.0, para
ello utilice la saliva de concentración del 5% a diferentes temperaturas: baño de
hielo, temperatura ambiente, 37ºC, 60ºC y baño de agua hirviendo.
2. Prepare una placa de porcelana con gotas de yodo.
3. Para ello en un tubo de ensayo (tubo 1) vierta 2 ml de amortiguador de pH 7.0 y

2 ml de la suspensión de almidón al 0.5% y mantenga estos dos tubos en el baño
de la temperatura a evaluar por 5 minutos.
4. Manteniendo siempre los tubos de reacción en el baño de temperatura a

evaluar registre el tiempo cero (0) en su cronometro e inmediatamente vierta el
contenido del tubo con el almidón (tubo 1) en el tubo que contiene la saliva al 5%
(tubo 2), agite y comience la medición del tiempo de la reacción; para ello cada 10
segundos saque una gota del tubo de la mezcla y colóquela en un pozo con yodo
de la plaqueta de porcelana.
5. En las temperaturas extremas (0 grados y ebullición) la reacción puede

transcurrir muy lentamente, realice estos ensayos de manera simultánea con
intervalos de 1 a 5 minutos y por un máximo de 20 minutos.
6. Registre los datos obtenidos en cada reacción tanto en minutos como en min-1.
Velocidad de Reacción vs. pH

1. Siguiendo el mismo procedimiento de los experimentos anteriores determine el
tiempo de reacción a pH de 3.0, 5.0, 7.0, 8.0 y 10.0 utilizando la solución de saliva
al 5% a temperatura ambiente.
2. A los valores de pH extremos, la reacción puede ser muy lenta. Realice estos
ensayos de manera simultánea con intervalos de 1 a 5 minutos y por un máximo
de 20 minutos.
3. Registre los datos obtenidos en cada reacción tanto en minutos como en min-1.
Desarrollo de la Práctica
PRÁCTICA PORCENTAJE RESULTADO IMAGÉN

%
10ml de saliva 10% 120 seg. Se
+ 90ml de agua activó la enzima
50 ml de 5% 3min. Se activó
solución al 10% la enzima
+50 ml de agua
10 ml de 1% 5 min. Se activó
solución al 10% la enzima.
+ 90 ml de agua
PRÁCTICA PROCEDIMIENTO
AGUA HIRVIENDO Colocamos la solución en baño
maría por 5min. Después lo
mezclamos y comenzamos el
proceso.
La enzima no se activó sobre el
almidón y la temperatura.
Pasados 7min. No aclaro o sea no
hay degradación.
A TEMPERATURA BAJA (Hielo) Colocamos la solución en hielo por

5min.
Pasados los 3 min. No hubo
reacción.
A TEMPERATURA 37°C Colocamos la solución por 5min. En
agua a temperatura 37°C y esta
prueba se degrado a los 30 seg.
REACCIÓN pH 5.0 Colocamos la solución pH 5.0 y la
reacción fue a los 3min.
REACCIÓN pH 10.0 Colocamos la solución en pH 10.0 y
en esta el proceso es más lento por
el pH es alto o sea es básico. Y la
enzima no se activó.
CONCLUSIONES.
 Diferentes factores ambientales como la variación de pH, temperatura o

presencia de inhibidores pueden afectar a la actividad enzimática.
 Las enzimas son los catalizadores biológicos muy importantes ya que casi
todos los procesos en las células los necesitan para que ocurran a unas
tasas significativas.
 La amilasa requiere de una temperatura de 37°C para tener una óptima

actividad enzimática.
 Las enzimas dependen de dos factores importantes para su actividad

enzimática como la temperatura y el pH medios en los que reacciona.
REFERENCIAS BIBLIÓGRAFICAS
Recuperado de: Definición de enzima - Qué es, Significado y Concepto
http://definicion.de/enzima/#ixzz3bGTVpc81
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/352001/MODULO_BM_UNAD_UNIDAD_1.
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Informe de Laboratorio Bioquimica

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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA

ROSA DELGADO – Código: 59825315

YURANY ZAMUDIO – Código:

WALTER BOLAÑOS – Código: 1.085.687.645

DIANA PINTA – Código: 1086330751

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

PRÁCTICA LABORATORIO 1: MÉTODOS CUALITATIVOS PARA LA

 Identificar por medio de las diferentes pruebas en el laboratorio la tinción de

 Hacer un uso adecuado de los elementos de trabajo del laboratorio.

Una pérdida de la estructura tridimensional suficiente para causar pérdida de la

PRUEBA PARA METALES PESADOS

Los iones más comúnmente usados para detectar la presencia de proteínas

GRUPOS SH HUEVO 1 ml Negativo para

SOLVENTES HUEVO 2ml Precipitado,

Llevar a baño de Se obtuvo color

SOLVENTES JUGO 2ml No se ningún

SOLVENTES JUGO 2ml No se nota ni

SOLVENTES LECHE 2ml No se ningún

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Se trata de determinar cuál es la temperatura y pH óptimos de esta enzima. Se

El grado de especificidad de las enzimas es muy alto, pueden distinguir incluso

Factores que afectan la actividad enzimática

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Concentración de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un

Temperatura.- Un incremento de 10°C duplica la velocidad de reacción, hasta

pH.- El pH óptimo de la actividad enzimática es 7, excepto las enzimas del

Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean

Los resultados que obtuvimos nos demostraron que la velocidad enzimática se ve

La amilasa es una enzima que actúa en los procesos de digestión de

 Demostrar la acción de la amilasa salival sobre el almidón

Identificar que la amilasa es una enzima proteica que se encuentra en la

 Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival.

 Determinar características básicas de la reacción de hidrólisis del almidón

 Asociar el efecto de la concentración de la enzima, la temperatura y el pH

Gradilla para tubos

Solución de almidón al 0,5% + NaCl al 0,25%

Amortiguadores de pH: (3,0) (5,0) (7,0) (10,0)

Baño de agua hirviendo

1. Estimule el flujo de saliva y colecte 10ml en una probeta de 100 ml.

2. Con ayuda de una probeta y depositando las soluciones en el Erlenmeyer de

3. Mida la actividad de las cuatro diluciones de saliva de la siguiente manera:

b. En un tubo de ensayo (tubo 1) vierta 2 ml de amortiguador de pH 7.0 y 2 ml de

c. En otro tubo (tubo 2) vierta 1 ml de solución de saliva al 10%.

d. Registre el tiempo cero (0) en su cronometro e inmediatamente vierta el

e. Continúe la prueba cada 10 segundos hasta que el color sea igual al de la

Velocidad de Reacción vs. Temperatura

2. Prepare una placa de porcelana con gotas de yodo.

3. Para ello en un tubo de ensayo (tubo 1) vierta 2 ml de amortiguador de pH 7.0 y

4. Manteniendo siempre los tubos de reacción en el baño de temperatura a

5. En las temperaturas extremas (0 grados y ebullición) la reacción puede

Velocidad de Reacción vs. pH

PRÁCTICA PORCENTAJE RESULTADO IMAGÉN

A TEMPERATURA BAJA (Hielo) Colocamos la solución en hielo por

 Diferentes factores ambientales como la variación de pH, temperatura o

 La amilasa requiere de una temperatura de 37°C para tener una óptima

 Las enzimas dependen de dos factores importantes para su actividad

Recuperado de: Definición de enzima - Qué es, Significado y Concepto

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