Está en la página 1de 8

Universidad Autnoma de Ciudad Jurez

Ingeniera Biomdica




Laboratorio de Bioqumica






Prctica #5: Reacciones de
identificacin de aminocidos





Profesor: lvaro Torres

Alumna: Jennifer Alejandra Muoz Valdez
131449



Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


Prerrequisitos:
1. Conocer las caractersticas diferenciales de la estructura de los
aminocidos. Los aminocidos se clasifican habitualmente segn las
propiedades de su cadena lateral:
Neutros polares, polares o hidrfilos: serina (Ser, S), treonina (Thr,
T), cistena (Cys, C), glutamina (Gln, Q), asparagina (Asn, N),
tirosina (Tyr, Y).
Neutros no polares, apolares o hidrfobos: alanina (Ala, A), valina
(Val, V), leucina (Leu, L), isoleucina (Ile, I), metionina (Met, M),
prolina (Pro, P), fenilalanina (Phe, F), triptfano (Trp, W) y glicina
(Gly, G).
Con carga negativa o cidos: cido asprtico (Asp, D) y cido
glutmico (Glu, E).
Con carga positiva o bsicos: lisina (Lys, K), arginina (Arg, R) e
histidina (His, H).
Aromticos: fenilalanina (Phe, F), tirosina (Tyr, Y), triptfano (Trp, W)
y prolina (Pro, P) (ya incluidos en los grupos neutros polares y
neutros no polares).
2. Identificar las diferencias y semejanzas de los aminocidos con otros
monmeros (por ejemplo: carbohidratos y lpidos).
Todos los macronutrientes son compuestos orgnicos compuestos por
carbono, hidrgeno, oxgeno y a veces otros elementos. Como posibles
fuentes de caloras, pueden ser oxidados para producir ATP, la moneda
energtica del cuerpo.
3. Identificar las propiedades qumicas en base a su polaridad.
La polaridad es una propiedad de las molculas que representa la
separacin de las cargas elctricas en la misma Esta propiedad est
ntimamente relacionada con otras propiedades como la solubilidad, el
punto de fusin, el punto de ebullicin, las fuerzas intermoleculares, etc.

Objetivo:
Al trmino de esta prctica el alumno ser capaz de diferenciar a los aminocidos
utilizando tcnicas colorimtricas ms comunes para identificarlos, as como,
relacionar la estructura de los aminocidos con su reactividad y sus funciones en
el organismo.

Introduccin:
Los aminocidos son las unidades qumicas o elementos constitutivos de las
protenas que a diferencia de los dems nutrientes contienen nitrgeno.
Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


Los aminocidos son biomolculas formadas por (C) Carbono, (H) Hidrogeno, (O)
Oxgeno y (S) Azufre.
Estos, son la nica fuente aprovechable de nitrgeno para el ser humano, entre
las mltiples funciones que desarrollan los aminocidos en las clulas vivas, est
la de servir como las unidades o monmeros a partir de los cuales se construyen
las cadenas polipeptidicas de protenas y son precursores de otros compuestos
nitrogenados.



En el interior celular los aminocidos predominan en forma de ion dipolar o
zwitterion (del alemn ion hbrido). En la forma dipolar el grupo carboxilo se
encuentra disociado (-COO-) y el grupo amino protonado (-N+H3), pero la carga
de la molcula es neutra. Un zwitterion puede actuar como un cido o como una
base cediendo o aceptando protones.
La protonacin o desprotonacin de los grupo amino y carboxilo depende del pH.
Para la glicina el pKa para el grupo carboxilo y amino es respectivamente 2,3 y
9,6, esto significa que a pH inferiores a 2,3 los grupos carboxilo y amino estarn
protonados, la carga neta de la molcula ser positiva. A pH entre 2,3 y 9,6 el
grupo carboxilo esta desprotonado y el grupo amino protonado, siendo la carga
neta del aminocido cero. A pH superiores a 9,6 ambos grupos estarn
desprotonados, siendo la carga neta negativa.
Dado que los grupos ionizables de los aminocidos son cidos relativamente
dbiles podemos aplicar la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para calcular la
fraccin de cada grupo que se encuentra ionizada a un determinado pH.
El cuerpo humano es incapaz de sintetizar los 20 aminocidos requeridos para la
formacin de todas las protenas y por lo cual partiendo de esta base, los
aminocidos se dividen en: esenciales; porque es necesario que el individuo
ingiera en la dieta y no esenciales; los cuales son producidos por el propio
organismo y por lo tanto no es crtico si el individuo no los consume en su dieta.
Cabe hacer notar, que los 20 aminocidos son importantes para el buen desarrollo
del organismo.
Universidad Autnoma de Ciudad Jurez



Metodologa:
Material.-
1.-15 tubos de ensaye
5.-pipetas de 5.0 ml
2.-gradilla
6.-pipeta de 10.0 ml
3.-pipetas de 1.0 ml
7.-bureta
4.-pipetas Pasteur
Experimento No.
Prueba de Sullivan

REACTIVOS BLANCO PATRON PROBLEMA
AGUA 0.5 ----------- --------
CISTEINA ---------- 0.5 ---------
NH4OH 2 gotas 2 gotas 2 gotas
NaCN 0.5 0.5 0.5
NITROPRUSIATODE 2 gotas 2 gotas 2 gotas
SODIO
Sol. Problema ------------ ---------- 0.5

Experimento No. 2
Reaccin de identificacin de fenoles para-sustituidos (tirosina)

REACTIVOS BLANCO PATRON PROBLEMA
AGUA 1.0 --- ---
TIROSINA --- 1.0 ---
PROBLEMA --- --- 1.0
Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


NITROSONAFTOL 2 gotas 2 gotas 2 gotas

Mezclar y calentar en bao a ebullicin durante 5 minutos.

ACIDO NITRICO 2 gotas 2 gotas 2 gotas

Experimento No. 3
Reaccin de identificacin de aminocidos con ninhidrina
La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) es un agente oxidante que reacciona
con todos los alfa aminocidos dando un color purpura. La prolina e hidroxiprolina
da un color amarillo.

REACTIVOS BLANCO PATRON PROBLEMA

AMINOACIDO --- 1.0 ---

PROBLEMA --- --- 1.0

NINHIDRINA 1.0 1.0 1.0

AGUA 1.0 --- 1.0

Mezclar y calentar en bao de agua hirviendo durante 10 min.
La aparicin de un color azul violceo es positiva con excepcin de la prolina y la
hidroxiprolina.

Resultados:

Tubo EXP.No.1 EXP.No.2 EXP.No.3
Agua Negativo Negativo Negativo
Patrn Positivo Positivo Positivo
Problema Negativo Positivo Positivo
Extra Negativo Negativo Positivo

Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


1.- Mencione 5 diferencias fundamentales tanto qumicas como bioqumicas
que permiten diferenciar a los aminocidos de los carbohidratos y de los
lpidos.
Un aminocido, como su nombre indica, es una molcula orgnica con un
grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-COOH; cido).
Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas, la mayora
biomolculas, compuestas principalmente por carbono e hidrgeno y en
menor medida oxgeno.
Los carbohidratos, hidratos de carbono o sacridos son molculas
orgnicas compuestas por carbono, hidrgeno y oxgeno
Los carbohidratos son la forma biolgica primaria de almacenamiento y
consumo de energa.
Los aminocidos forman enlaces peptdicos.

3.- Cmo se calcula el punto isoelctrico de un aminocido?
Para calcularlo se deben utilizar los pK
a
.

4.- Cual es el fundamento de la reaccin de Pauly.
El reactico es cido sulfanilico diazoado y produce un color rojo en un medio
alcalinizado con carbonato de sodio, que pasa al amarillo al acidificar.

5.- Que importancia mdica tiene la identificacin de los aminocidos.
Los aminocidos son la base de todo proceso vital ya que son absolutamente
necesarios en todos los procesos metablicos. Sus funciones ms importantes
son el transporte ptimo de nutrientes y la optimizacin del almacenamiento de
todos los nutrientes.

6.- Cul es el mecanismo de identificacin de aminocidos al utilizar
ninhidrina.
La Ninhidrina decarboxila y deamina los aminocidos primarios formando el
compuesto prpura conocido como Prpura de Ruhemann.

7.- Cul es la funcin del cianuro de sodio en la reaccin del nitroprusiato?
El cianuro de sodio es el que suministra grupos cianuro para formar el complejo
llamado azul de prusia NaFe(CN)6 que tiene un color azul oscuro, este color es
por lo general la prueba positiva.

Discusin:

Experimento 1, reacciones para cistena y cistina: Cuando los aa y las protenas
que contienen grupos tilicos se calientan en medio fuertemente alcalino, el azufre
presente reacciona para formar sulfuros. Los Aminocidos azufrados como
Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


Metionina, Cisteina y Cistina se reconocen por la formacin de precipitados de
Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman cuando reacciona
con Acetato de Plomo en medio alcalino
Los grupos tioles tambin reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de un
exceso de amonaco para dar un complejo de color rojo.

Experimento 2, prueba de fenoles: Los aa, que contienen un ncleo aromtico
forman nitro derivados de color amarillo cuando se calientan con cido ntrico
concentrado. Las sales de estos derivados son de color naranja intenso en medio
alcalino. La fenilalanina, la tirosina y en cierto grado el Triptfano, as como todas
las protenas que los contienen, dan positiva la prueba.

Experimento 3, Reaccin con la ninhidrina: Los grupos amino libres de los
aminocidos, de los pptidos y las protenas reaccionan con la ninhidrina a un pH
entre 4 y 8, para dar un compuesto de intenso color azul prpura. La prueba
tambin es positiva con aminas primarias y amonaco pero sin desprendimiento de
CO
2
.

Reaccin con la prolina:
Los aminocidos prolina e hidroxiprolina dan un color amarillo en lugar del color
prpura con la ninhidrina.
Debido a que se trata del nico aminocido proteinognico cuya -amina es
una amina secundaria en lugar de una amina primaria. La prolina en realidad es
un iminocido, pues su cadena lateral es cclica y est compuesta por 3 unidades
de metileno; estos quedan unidos al carbono alfa y al grupo amino, el cual pasa a
llamarse imino.

Conclusiones:
Los aminocidos son la base de todo proceso vital ya que son absolutamente
necesarios en todos los procesos metablicos.
Sus funciones ms importantes son:
el transporte ptimo de nutrientes y
la optimizacin del almacenamiento de todos los nutrientes (es decir, agua,
grasas, carbohidratos, protenas, minerales y vitaminas).
La mayora de las enfermedades de la sociedad actual son debidas a nuestro
estilo de vida, tales como: obesidad, colesterol, diabetes, insomnio, disfuncin
erctil o la artritis. Todas ellas son atribuibles a trastornos metablicos bsicos y lo
mismo ocurre con la prdida de cabello o las arrugas profundas.

Universidad Autnoma de Ciudad Jurez


El carcter nico de cada aminocido se debe a la estructura del grupo R. En los
polipptidos los grupos R de los aminocidos a menudo se denominan cadenas
laterales y pueden variar desde un tomo de hidrgeno, hasta estructuras
complejas como el grupo guanidina.
Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en el organismo
ya que cumplen muchas funciones
Las protenas estn constituidas por aminocidos por los cuales los mtodos se
basan en el reconocimiento de los aminocidos.
Durante el experimento en el que utilizamos el reactivo de Ninhidrina, pudimos
observar que todos los contenidos de los tubos de ensayo cambiaban su color a
uno violeta debido a que stos son a-aminocidos.

Bibliografa:

D. M. Vasudevan, S. Sreekumari. Texto de Bioquimica para Estudiantes de
Medicina JP Medical Ltd, Oct 1, 2012. 657 pp.

Murray R.K. et al. Harper Bioqumica Ilustrada, 28va Edicin. Editorial
McGraw Hill, Mxico D.F. 2006, 687 pp.

Freifelder D. Tcnicas de Bioqumica y Biologa Molecular, Editorial
Reverte, Espaa; Barcelona, 2003, 635 pp.

Nelson D.L., Cox M.M. Lehninger Principios de Bioqumica, 4ta Edicin,
Editorial Omega, Espaa: Barcelona, 2005, 1264 pp.

Sin Autor, ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS,
Colombia: Universidad de Bogot Jorge Tadeo Lozano [Online], disponible en:
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/
guia_9_aminoacidos.pdf

Pea, Arroyo, Tapia, Gmez. Bioqumica, 2da Edicin. Editorial Limusa, Mxico
D.F., 2004, 411 pp.