MEDICINA HUMANA

BIOQUIMICA Y NUTRICION HUMANA

ENZIMOLOGIA

Blgo. MsC. Milagros Violeta Mogollón García

 ENZIMAS
• Definición
– Catalizadores biológicos Enzima ↑ Vel.

• Función Ciclofilina 106

– Viabilizar la actividad celular por su participación

Anhidrasa 107
carbónica

en todas las reacciones biológicas Triosa, P isomerasa 109

Carboxipeptidasa A 1011
– Incrementan la velocidad de reacción de 106 a 1012 Fosfoglucomutasa 1012
respecto a la no catalizada y varias veces las catalizadas Succinil CoA 1013
por químicos transferasa
Ureasa 1014

• Naturaleza química Ornitin MP

descarboxilasa
1017

– Proteinas globulares principalmente

– RNA con propiedades catalíticas: Ribozimas
MODELO BÁSICO DE ACCIÓN ENZIMATICA
E+S [ES] [EP] P+E
Estado de transición

Energia de activación sin enzima

Energia de activación con

S enzima

P Formular ahora un concepto de enzima basado en la figura

Las enzimas disminuyen

la energía de activación
Reacción para superar el estado de
transición

Y si no hubiera alguna enzima, la reacción continuaría?. Justifique

ESTRUCTURA DE LAS ENZIMAS Y TIPOS ESPECIALES

Estructura Holoenzima
básica

Tipos especiales Proteína Cofactor

Apoenzima
Apoproteína Coenzima
- Nucleotidos
Grupo Prostético - Comp. Vit. B
Ribozimas
RNA Abzimas Enzimas de
Anticuerpos restricción
Granzimas
Telomerasa
Actividad citotóxica
(apoptosis)
 ENZIMAS ESPECIALES
• Telomerasa
– Repara los telómeros de los cromosomas, disminuyendo las
microdeleciones
• Ribozimas
– Útiles para el tratamiento de enfermedades que en la
actualidad no cuenta con una terapia eficaz, como las de
origen viral y genético (terapia génica)
– Su ventaja es su alta especificidad
• Ejemplo: evitar la entrada del VIH I a las células inmunitarias, bloquear la infección
por virus de hepatitis B y C, tratar cánceres de mama, cervicouterinos y colorrectal.
ENZIMAS ESPECIALES
• Abzimas
• Anticuerpos con actividad catalítica (producidas por
Linfocitos B  plasmocitos)
• Se puede presentar de manera natural, tal como:
– autoanticuerpos antipéptido intestinal vasoactivo
– autoanticuerpos que se unen al DNA y lo hidrolizan, por ejemplo en Lupus
eritematoso (LUE)
• Se pueden obtener constructos, combinando un anticuerpo
(especificidad) y la enzima (propiedad catalítica)
• Son herramientas potenciales de biotecnología
• Existe la posibilidad de usar para tratar a personas infectadas con
VIH, cocainonómanos
ENZIMAS ESPECIALES
Granzima A
Granzima B
GRANZIMA A

Granzima B, y perforina, son proteínas liberadas por células efectoras (LT

citotoxicos)
Inducen apoptosis en células blanco formando poros transmembrana y el
clivaje de efectores de caspasas, tal como caspasa-3, aunque la apoptosis
puede lograrse independiente de granzima B.

Al secretarse al espacio intercelular eliminan las células del huésped

transformadas e infectadas por Virus
 ENZIMAS ESPECIALES
• ENZIMAS DE RESTRICCION
• Son endonucleasas que cortan enlaces fosfodiester del DNA en
secuencias nucleotídicas especificas
• Pueden ser abruptos o cohesivos
• Reconocen secuencias palindrómicas
• Esta limitada a procariontes como material de defensa
MODELOS DE ACCION ENZIMATICA
Modelo de llave – cerradura
(Fisher)
Modelo del acoplamiento (encaje) inducido
(Koshland)
 ¿según el tipo de reacción, como se clasifican las
enzimas?
1. Oxidoreductasas: Transfieren electrones (e-, H+) LDH, PDH, G-6-P-DHG
2. Transferasas: Transfieren grupos funcionales, tal
Glucoquinasa, ALT, AST
como glicosilo, metilo, fosforilo (no agua)
3. Hidrolasas: Catalizan reacciones hidrolíticas (con
Lactasa, Lipasa
adición de agua), separa C-O, C-S, C-N, y otros E
J
4. Liasas: Al lisar sustratos generan dobles enlaces, o E
catalizan la adición de un sustrato a un doble enlace M
Piruvato Descarboxilasa
P
de un segundo sustrato. L
5. Isomerasas:Transfieren grupos dentro de las O
S Fosfoglucomutasa
moléculas para generar diversos isómeros.
6. Ligasas: Catalizan formación de enlaces C-C, C-S, Citrato Sintasa, Glutamina
C-O y C-N acopladas a hidrólisis de energía, por Sintetasa
ejemplo ATP
Murray, R. y col. Harper Bioquímica Ilustrada. 30a ed. McGraw-Hill Interamericana. 2016.
 Isoenzimas
Lactado deshidrogenasa (LDH)
HHHH
Estudiar más NADH+ NAD+
LDH
ejemplos de Piruvato Lactato
interés médico HMMM

P. Lezama - UPAO
HHMM

MMMM
HHHM
Isoenzimas
Creatin kinasa (CK) o Fosfocreatin kinasa (CPK)

MM
MB
BB
Resumen de los Factores de regulación enzimática
1. Temperatura 5. Moduladores
• Positivos
2. pH • Activadores
3. Concentraciones de: • Inductores
• Enzima • Negativos
• Sustrato • Inhibidores
Regulación
• Producto • Represores de
(retroalimentación actividades

negativa) • Especiales
• Alostérica
4. Localización • Covalente
• Zimógenos
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
Constante de Micahelis - Menten
v = Vmax [S]
v Km
v = Vmax

¿Cuando se alcanza la
Vmax velocidad máxima?
2

Km [S]
¿Qué es la constante de Michaelis-Menten?
¿Cual es su significado?
Inhibición - Tipos
S El sustrato se El Inhibidor (I)
une al sitio se ubica en el
catalítico de la I sitio catalítico,
enzima para impidiendo el
E una reacción E acceso del
óptima Sustrato

Reaccion [ES] óptimo

Inhibición competitiva

El inhibidor se El Inhibidor (I)

S une a cualquier
I I se incorpora al
lugar de la momento de
I enzima mas no formarse el
en el sitio complejo [ES],
E catalítico, e E impidiendo el
impide el ingreso progreso de la
del S reaccion
Inhibición No competitiva Inhibición Acompetitiva
ALGUNOS EJEMPLOS DE INHIBIDORES
COMPETITIVA NO COMPETITIVA ACOMPETITIVA
AINEs Litio
Β lactámicos (penicilina) Plomo
Sulfas (~PABA) EDTA
IECAs (Captopril, enalapril)
Alopurinol
Fluorouracilo

Organofosforados

REVISAR EN LA LITERATURA OTROS EJEMPLOS

Ejemplo de inhibición competitiva
Angiotensinógeno
Hipotensión,
hipovolemia Renina

Angiotensina I

IECA
Captopril
Enzima convertidora X
Análogo del
de Angiotensina, ECA estado de
transicion

Angiotensina II

Aumento de la presión arterial

Ejemplo de inhibición competitiva
NUCLEOTIDOS NUCLEOTIDOS
DE GUANINA DE ADENINA

Xantina

xantina X alopurinol
oxidasa
Acido Urico
Inhibidores basados en su mecanismo
Inhibidores son compuestos
que disminuyen la tasa de
reacción enzimática

Inhibidores
Reveribles Irreversibles
suicidas

Se unen a las enzimas

Forman enlaces
mediante interacciones
covalentes o Sufren una reacción
no covalentes (Puentes
extremadamente parcial y forman
de hidrógeno, las
fuertes con grupos inhibición irreversible
interacciones
funcionales en el sitio en el sitio catalítico
hidrofóbicas y los
catalítico
enlaces iónicos)

Ejem. Penicilina, forma un

Ejem. Diisopropilfosfofluoridato
(organofosforado) es el
prototipo del sarin, forma
enlaces con Serina
compuesto que no puede
disociarse de glucopeptidil
transpeptidasa bacteriana 
inhiben síntesis de pared

Ejem. El Acido acetilsalicílico

(aspirina) forma enlaces por
acetilación de Serina en el sitio Ejem. Alopurinol, inhibe a la
catalítico de prostagañlndin xantina oxidasa
endoperoxido sintasa (Ciclo
oxigenasa, COX)
 DIAGNOSTICO TRATAMIENTO

PARA QUE SE USAN LAS ENZIMAS EN CAMPO

MÉDICO

SCREENING
PRONOSTICO
USOS FUNDAMENTALES
Marcadores
enzimáticos
Uso en • Enzimopatías Ejm anemia
hemolítica (G, 6PDH, Pyr
diagnóstico cinasa)
• Marcadores tumorales Ejm
enolase neuroespecifica

Algunas enzimas se Otras enzimas son

usan como fármacos blanco de fármacos
Agentes • Factores de la coagulación, • Cox, Xantina oxidasa, ECA,
lactasa transcriptasa inversa
terapeúticos

Herramientas
(Reactivos) Glucosa oxidasa
(glicemia), ELISA,
de LDH, CK
diagnóstico
MARCADORES ENZIMATICOS
• Auxiliares para el diagnóstico de enfermedades
agudas o crónicas, genéticas o infecciosas
• Se puede trabajar en fluidos, extractos celulares,
biopsias
• Relaciona la actividad enzimática con alteraciones
que afectan células, tejidos, órganos

Usar la literatura adecuada e identificar marcadores hepáticos, cardiacos,

musculares, pancreáticos, oseos, prostáticos, renales.
Por ejemplo Hicks, Bioquimica 4ta edi. Cap. 7
Características de los marcadores enzimáticos
Secretorias Intracelulares

Actúan
Producido por Ejem. Hígado intracelularmente y
tejidos/órganos, Lipoprotein lipasa carecen de acción en
actuan en plasma (LPL) plasma

Se localizan en: membrana (ALP,

γGT), citosol (ALT, AST, LDH, MDH),
Mitocondrias (AST), lisosomas
(ACP)

Otros son producidos por

tejidos/organos específicos Hígado
(G, 6Pasa), Pancreas (amilasa),
Corazón (LDH1)
Niveles plasmáticos de enzimas intracelulares
Otros usos
Tratamiento de Eliminación de Eliminación selectiva
deficiencias metabolitos tóxicos de nutrientes
metabólicas por malfuncionamiento específicos de células
congénitas de órganos malignas

Catalasa, para el tratamiento Asparaginasa y

Ureasa y uricasa en
de acatalasemia glutaminasa en la
caso de mal
Fenilalanina hidroxilasa y eliminación de L-
funcionamiento renal
fenilalanina amoniaco liasa asparagina y L-
(para eliminar urea y
(Fenilcetonuria) glutamina durante el
ácido úrico)
tratamiento de leucemia
Galactosa, 1- P uridil
transferasa (Galactosemia)

UDP glucuronil
transferasa y bilirrubina
oxidasa (eliminación de
bilirrubina) en casos de
ictericia

Anhidrasa carbónica y
catalasa en intercambio
gaseoso de O2 y CO2 en
respiradores artificiales
ALGUNAS ENZIMAS CON VALOR DIAGNOSTICO
COMPROBADO
NOMBRE
• Lactato deshidrogenasa (LDH)
• Glutamato deshidrogenasa (GLDH)
• ϒ-Glutamiltransferasa (ϒ GT)
• Aspartato aminotransferasa (ASTT)
Glutamato oxalacetato transaminasa (GOT)
• Alanina aminotransferasa (ALT)
Glutamato piruvato transaminasa (GPT)
• Creatin quinasa (CPK)
• Lipasa pancreática
• Colinesterasa (CHE)
• Fosfatasa alcalina (AP)
• Fosfatasa ácida (ACP)
• α-Amilasa
• Fructosa, 1,6 bifosfato aldolasa (ALD)
• Glutamato descarboxilasa (GAD)
ALTERADO EN
Isquemia miocárdica, anemia perniciosa
Ictericia obstructiva, Tumores hepáticos
Cirrosis alcohólica, tumores hepáticos
Enfermedades hepáticas, isquemia miocardica
Enfermedades hepáticas, isquemia miocardica
Isquemia miocárdica, lesiones del músculo
esquelético
Pancreatitis aguda
Hígado graso, intoxicación alcohólica aguda
Ictericia obstructiva, tumores
Carcinoma de próstata
Pancreatitis aguda
Trastornos musculares
Trastornos de páncreas endocrino
 INFARTO AL MIOCARDIO HEPATITIS
LDH ALT(GPT)

Analizar AST(GOT)
CK
AST (GOT)

γ GT
Preguntas ??