Diagnóstico y tratamiento de

las enfermedades genéticas

Diagnóstico y tratamiento de las enfermedades
genéticas
I. Diagnóstico prenatal
Indicaciones
Técnicas no invasivas
Imagen
Biomarcadores
Técnicas invasivas

II. Tratamiento de las enfermedades genéticas

Generalidades
Terapia génica
En células somáticas
De reposición de genes
Terapia anti sentido
Terapia con ribozima
Diagnóstico y tratamiento de las enfermedades
genéticas
III. Diagnóstico genético
Hibridación in situ fluorescente (FISH)
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Secuenciación
Sanger
De alto rendimiento o “next generation” NGS
Enzimas de restricción y electroforesis
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Generalidades
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Generalidades
• Identificar la causa genética de una enfermedad permite
realizar investigaciones para el tratamiento.

• Terapia Génica: Introducción de material genético a las

células de un individuo con el fin de producir un beneficio
terapeútico (prevenir o curar una enfermedad)

• Comenzó a utilizarse en 1990. Para finales del 2008 se

habían aprobado casi 1,500 protocolos de terapia génica
con más de 100 genes
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Generalidades
• Remplazar el gen mutado.

• Inactivar un gen mutado que está funcionando

inadecuadamente (cáncer).

• Introducir un nuevo gen para ayudar a

contrarrestar la enfermedad.
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica

Gen Célula Vía de

Vector
terapeútico Blanco administración
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
Utilidad: enfermedades mono génicas.

Inmunodeficiencia combinada severa

Hipercolesterolemia familiar
Hemofilia B
Deficiencia de alfa-1-antitripsina
Fibrosis quística
Epidermólisis bullosa
Distrofia muscular de Duchenne
Adrenoleucodistrofia
Amaurosis congénita de Leber
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
En células somáticas

• Somática: se realiza la transferencia genética en

células somáticas del cuerpo.

• Germinal: se realizaría sobre las células germinales

del paciente, por lo que los cambios generados por
los genes terapéuticos serían hereditarios. Por
cuestiones éticas y jurídicas, ésta clase de terapia
génica no se lleva a cabo hoy en día.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

• Hay numerosas técnicas para introducir genes en las

células, la más estudiada es la de la utilización de
virus como vector.

• Los virus deben ser geneticamente alterados para

dejar de ser patógenos y portar el gen de interés al
organismo.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

• Que permita la inserción de material genético sin límite de tamaño.

• Que sea reproducible y estable.
• Que reconozca y actúe sobre células específicas.
• Que la expresión del gen terapéutico pueda ser regulada.
• Que carezca de elementos que induzcan una respuesta inmune.
• Que no tenga efectos secundarios o que sean mínimos.
• Que sea fácil de producir y almacenar.
• Que el costo sea razonable.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

• Ex vivo. Se extraen células del paciente, se manipulan

fuera del cuerpo, se introduce el gen terapeútico y
posteriormente se vuelven a introducir ya modificadas en
el organismo del paciente.

• In vivo. El gen de interés se introduce directamente en el

organismo a través de un vector (virus). Puede causar
reacciones inmunológicas.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes
• Retro virus.

• El virus una vez que infecta a la célula, introduce su ARN, lo

convierte en ADN y lo inserta en forma permanente a la
célula.
• Ventaja: El gen terapéutico queda de forma permanente y es
pasado a las células hijas.
• Desventaja: el material genético puede ser insertado en
cualquier parte del genoma, lo que puede causar que quede
cerca de un protooncogén al que puede modificar y
convertirlo en un oncogén: Cáncer
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

Deficiencia de Aminosin desaminasa

• Causa inmunodeficiencia combinada severa.

• Enfermedad de herencia AR
• 1 en cada 200.000-1.000.000 de nacidos.

• La aminosindesaminasa (ADA) se produce en tejidos linfáticos.

• Las mutaciones altera el metabolismo de las Purinas,
ocasionando la disminución de los linfocitos T.

• Sin tratamiento es mortal antes de los 2 años de edad.

• Tx: Transplante de MO y Terapia Génica
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

Primera paciente que recibió la terapia génica para combatir la

Inmunodeficiencia combinada severa. Pasó de ser una “niña
burbuja” a vivir con una calidad de vida normal.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

• Adenovirus.

• Cuando el virus infecta a la célula huésped el ADN

permanece libre en el núcleo celular y se transcribe de forma
independiente.
• Ventaja: no se inserta al ADN del huésped, lo que puede
evitar la alteración de un protooncogén.
• Desventaja: el gen terapéutico no se pasa a las células hijas.
• El tamaño puede ser hasta de 36 kb.
 II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes
Deficiencia de Ornitina Carbamil Transferasa
• Locus: Xp21
• Herencia ligada al X dominante
• Frecuencia de 1:80,000

• Aumento de las concentraciones de amoniaco en el organismo

• Síntomas: hiperamonemia, Encefalopatía, confusión, ataxia,
coma, muerte.

• Tratamiento: Dieta hipoproteínca, suplementos con arginina y

Benzoato de Sodio.
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes
Agentes no virales
Liposomas: Microesferas compuestas por una membrana de
lípidos. En el interior llevan el gen terapeútico.

• Los liposomas se fusionan con la membrana celular

permitiendo que el ADN se introduzca en la célula.

• Ventaja: no tiene proteínas, por lo que no genera respuesta

inmune.

• Desventaja: En ocasiones se degrada en el citoplama y no llega

al núcleo.
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
De reposición de genes

Agentes no virales

ADN desnudo: Consiste en inyectar directamente plásmidos de

ADN, sin utilizar ningún vector.

La mayoría de las veces es repelido por las membranas celulares,

pero en ocasiones entra a la célula, escapa a la degradación y
produce proteínas temporalmente.

Nano partículas de oro o biobalística

II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
Terapia anti sentido, de bloqueo o inhibición

Para mutaciones ganancia de función.

Oligonucleótido con una secuencia de ADN complementaria

a la secuencia del ARN mensajero.

El oligonucleótido se une al ARNm anormal evitando la

traducción de la proteína dañina.
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
Terapia anti sentido, de bloqueo o inhibición

• Oligonucleótidos antisentido “salto por exón”.

– Se diseñan los oligonucleótidos que permiten saltar la
mutación en el momento de la Traducción. En diciembre
de 2007 se publicaron los primeros resultados en 4
pacientes (8-16 años) con distrofia muscular de
Duchenne.
– A cada paciente se les administró una única inyección
intramuscular de 0,8 mg de oligonucleótidos antisentido
PR0051 y se constató la presencia del 3 a 12% de
distrofina funcional en la biopsia muscular realizada en
el lugar de la inyección 28 días después. No se observó
ningún efecto adverso.
II. Tratamiento de las enfermedades genéticas
Terapia génica
Terapia con ribozima

Las ribozimas son moléculas de ARN, capaces de escindir el

ARNm. Éstas pueden ser manipuladas para que escindan
secuencias de ARNm específicas que contienen una mutación no
deseada, destruyéndola antes de su traducción a proteínas.
III. Diagnóstico genético
Hibridación in situ florescente (FISH)
III. Diagnóstico genético
Hibridación in situ florescente (FISH)
III. Diagnóstico genético
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
III. Diagnóstico genético
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
III. Diagnóstico genético
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Kary Mullis el inventor de la PCR

III. Diagnóstico genético
Secuenciación: Sanger
III. Diagnóstico genético
Secuenciación: de alto rendimiento “next generation” NGS
 III. Diagnóstico genético
Secuenciación: de alto rendimiento “next generation” NGS
Abnormal
cell growth
a

Hyperproliferation Adenomatous High-grade dysplasia Adenocarcinoma Invasive cancer

polyps
of Texas - Houston Academy of Medicine on 07/08/15. For personal use only.

b
4
3 Cell 1
2
1
Human Genet. 2015.16. Downloaded from www.annualreviews.org

0
4
3 Cell 2
2
1
0
4
3 Cell 3
2
1
0
4
3 Cell 4
2
1
0
4
3 Cell 5
2
1
0
4
3 Cell 6
2
1
0
4
3 Cell 7
2
1
0
4
3 Cell 8
2
1
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X Y

Chromosome
c
4
III. Diagnóstico genético
Enzimas de restricción y electroforesis
III. Diagnóstico genético
Enzimas de restricción y electroforesis
 Bibliografía

• Peter Turnpenny, Sian Ellard. Emery´s Elements of

Medical Genetics. 15° ed. ELSEVIER. 2017; pagina 303.

• https://youtu.be/4YKFw2KZA5o

https://www.youtube.com/watch?v=vj1Zx5gttAc
https://www.youtube.com/watch?v=PPRyEjTvT7k
https://www.youtube.com/watch?v=mlf-XEEAiUY
https://www.youtube.com/watch?v=TlRPGWssMKE