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Licenciatura en QFB
CARACTERÍSTICAS TINTORIALES
Equipo: 1
Integrantes:
Durante cerca de 3,000 millones de años, todos los organismos siguieron siendo
microscópicos, siendo probablemente bacterias y arqueas las formas de vida
dominantes. Aunque existen fósiles bacterianos, por ejemplo los estromatolitos, al
no conservar su morfología distintiva que no se pueden emplear para estudiar la
historia de la evolución de los organismos de las procariotas.
ÁMBITO CIENTÍFICO
El adjetivo procariota se le dio en el año de 1925 por Édouard Chatón que nació en
1883-1947. La palabra procariota se compone, etimológicamente, del prefijo pro que
significa ‘antes de’, y karyo que se refiere a ‘núcleo’.
MEMBRANA PLASMÁTICA
PARED CELULAR
Consiste en una capa resistente y rígida que brinda soporte, lo que le confiere tener
una forma definida a la célula y una capa adicional de protección.
CITOPLASMA
NUCLEOIDE
RIBOSOMAS
Debido a que la síntesis de proteínas es una función esencial de todas las células,
los ribosomas se encuentran en prácticamente cualquier tipo de célula de los
organismos multicelulares, así como en los procariontes como las bacterias.
COMPARTIMIENTOS PROCARIONTAS
CÁPSULA
PERIPLASMA
PLÁSMIDOS
Cocos
Bacilos
Bacterias del tipo Bacilos que forman parte de la flora bacteriana, beneficiosa para
los animales:
● Lactobacillus casei.
● Lactobacillus acidophilus.
● Lactobacillus bifidus.
Espirilos.
Muchos de los representantes del género Vibrio no son “coléricos”, es decir, no son
patógenos. Sin embargo, de la gran diversidad de especies que lo conforman cerca
de 12 causan afecciones en el hombre. Los representantes de la familia
Vibrionaceae son bacterias no entéricas, es decir, su hábitat frecuente no es el
intestino de los animales y el hombre, siendo en general de vida libre.
Los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por
ciertos materiales celulares, impartiéndoles color.
· Azul de metileno
· Cristal violeta
· Safranina
❖ Eosina
Tiñe de color rosa o rojo el citoplasma celular, dependiendo del tiempo de la tinción
y de los lavados que se le dé a la muestra.
Rojo congo
Lugol (Mordente)
Solución diluida de yodo. Actúa como mordente debido a que refuerza la unión entre
un colorante y un sustrato. Se utiliza dentro de la tinción de Gram.
Verde de malaquita
Nigrosina
La nigrosina es un colorante aniónico negro incapaz de penetrar en las bacterias,
porque es repelido por la pared bacteriana. En consecuencia, la tinción con
nigrosina es una tinción simple negativa (se tiñe el fondo y no la bacteria).
TINCIONES
Tinción diferencial:
El colorante utilizado pone de manifiesto diferencias entre células bacterianas o
entre partes de una misma célula. Estas técnicas utilizan más de un colorante o bien
ciertos reactivos complementarios para la tinción.
Ejemplos: Tinción de Gram, Tinción de Ziehl-Neelsen, etc
Hematoxilina-eosina
Es la más utilizada y ayuda a identificar los componentes ácidos (basófilos) y los
básicos (acidófilos) de las muestras. Se emplean dos colorantes (hematoxilina y
eosina) por lo que también se le conoce como H-E o H y E.
La tinción H-E es muy útil porque permite diferenciar entre los dos compartimentos
más importantes de la célula: el núcleo y el citoplasma
Tinción de Gram
Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen, primero con una solución
de cristal violeta (otros colorantes básicos no son tan efectivos) y son lavadas
después para quitar el exceso de colorante. En este estado, todas las células, tanto
las grampositivas como las gram negativas, están teñidas de azul.
El portaobjetos se cubre entonces con una solución de yodo-yoduro potásico.
El ingrediente activo es aquí el I2; el KI simplemente hace soluble el I2 en agua. El
I2
entra en las células y forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. De
nuevo tanto las células grampositivas como las gramnegativas se encuentran en la
misma situación.
Se lleva a cabo después la decoloración,
usando una mezcla de alcohol-acetona,
sustancias en las que es soluble el complejo
I2-cristal violeta. Algunos organismos
(grampositivos) no se decoloran, mientras
que otros (gramnegativos) lo hacen. La
diferencia esencial entre esos dos tipos de
células está por tanto en su resistencia a la
decoloración; esta resistencia se debe
probablemente al hecho de que en el caso de
bacterias gram-negativas, la mezcla de alcohol/acetona es un solvente lipídico y
disuelve la membrana exterior de la pared de la célula (y también puede dañar la
membrana citoplásmica a la que se une peptidoglicano). La delgada capa de
peptidoglicano es incapaz de retener el de complejo cristal violeta-yodo y la célula
se decolora. Las células grampositivas, a causa de sus paredes celulares más
espesas
(tienen más peptidoglicano y menos lípido), no son permeables al disolvente,
provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la
pared celular. Después de la decoloración las células grampositivas son todavía
azules, pero las gram negativas son incoloras.
Tinción de Esporas
• Tinte primario- Verde Malaquita, requiere calor para la
penetración de este tinte.
• Agente decolorante- Agua, remueve el exceso de
tinte, decolora la
célula vegetativa.
• Contratinte- Safranina, tiñe las células vegetativas.
• Note: De obtener una coloración roja al final del proceso de tinción
observando bajo el microscopio, solo se puede determinar que se
tienen células vegetativas. No se puede concluir que es Gram -, eso
sería otro procedimiento a realizar si se quisiera determinar si es
Gram + o -.
Tinción de Cápsulas
-Tinte primario- Cristal Violeta 1%- tiñe todo el frotis
color oscuro
- Decolorante y Contratinte- Sulfato de Cobre 20%-se
usa para enjuagar el
tinte primario. No se enjuaga con agua porque la
cápsula es soluble en agua
-Función de decolorante. El CuSO4 es absorbido en el
material de la cápsula que ha sido decolorada
-Función de contratinte. La cápsula aparece azul clara en un fondo oscuro
Tinciones selectivas
Las tinciones selectivas sirven para hacer evidentes biomoléculas específicas en los
tejidos o en las células. Entre ellas localizan:
imagen 1
imagen 2
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