DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE INGENIERIA INDUSTRIAL

CAMPUS LIMA NORTE

INFORME
LABORATORIO N° 3 DE MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL
“TÉCNICA DE TINCIÓN DIFERENCIAL GRAM”
Apellidos y Nombres Código
Abarca Alban Joselin U18103405
Medina Olivares Jandery Nicole U19301956
Mescco Arias Jakeline Solange U18302071
Ramirez Huauya Angie Gabriela U19218926
Vela Cardoza Chirstian Alexis U17200455

I. Descripción de las actividades en el laboratorio. (2 puntos)

Procedimiento:
En una lámina porta objetos se coloca una gota de agua destilada,
luego se debe esterilizar un asa de siembra en la llama, teniendo ello
preparamos una suspensión bacteriana. Extender la gota junto con
las bacterias, se realiza un secado con la ayuda del mechero,
cuidando que este no se acerque a la llama, puesto que puede
quemarse. Cuando se tenga seca la muestra se realizará el proceso
de coloración.
- Se coloca durante 1 minuto el cristal violeta sobre la muestra.
- Se aclara con agua destilada, realizando un lavado.
- Colocamos durante 1 minuto el Lugol.
- Se aclara con agua destilada.
- Decolorar con alcohol de 96° durante 15 segundos.
- Aclaramos con agua destilada.
- Se coloca el colorante de contraste safranina.
- Aclaramos con agua destilada.
Realizar el secado de la muestra usando el mechero o con papel
filtro sin frotar la muestra. Observamos al microscopio haciendo uso
del aceite de inmersión para el lente de mayor aumento. Finalmente
se obtiene los siguientes resultados:
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II. Presentación de resultados obtenidos. (5 puntos)

Como se puede apreciar en la imagen, luego de realizar el experimento

se denota que dentro de la muestra se halló bacterias que son GRAM
POSITIVAS ya que bajo el microscopio de ven cocos teñidos de color
purpura, esto debido al cristal violeta. Por otro lado, también se
encontraron bacilos que vendrían a ser los GRAM NEGATIVOS ya que
se han teñido de color rosado consecuencia de la safranina.

III. Análisis e interpretación de resultados. (10 puntos)

Redactar aquí lo correspondiente al numeral III…..

IV. Conclusiones y recomendaciones. (3 puntos)

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Conclusiones:

● La tinción de Gram nos permite diferenciar dos clases de bacterias las

cuales son: Gram positivas y Gram negativas.
● Para realizar la tinción se tiene que tener microorganismos sembrados.
● Se puede observar para realizar el proceso de tinción se utiliza
diferentes reactivos tales como: cristal violeta , lugol , mezcla de alcohol
y la safranina
● En el proceso de tinción del lugol fija el colorante a las bacterias , en el
alcohol elimina el cristal violeta de las gram negativa, en la safranina tiñe
a las gram negativas ,ya que están decoloradas.
● Se puede concluir al realizar este proceso ,se identificó las bacterias
gram positivas y gram negativas mediante la tinción , lo cual aportaría en
nuestro conocimiento los diferentes tipos de tinción que se cambian
debido a su pared celular , como por ejemplo en la gram positiva el color
es azul o morado ya que su pared celular es más gruesa y en la gram
negativa el color es rojo o rosado porque es más delgado su pared
celular.

Recomendaciones:
● Siempre para que pueda abrir la placa tienen que estar en condiciones
de esterilidad .
● Se tiene que esperar 1 minuto cada vez que se añade un reactivo a la
muestra , luego de ello se tiene que lavar con agua destilada.
● Se tiene que decolorar por un tiempo determinado,ya que si lo hacen
más tiempo , no se podría diferenciar las bacterias unas de otras.
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