María José Solís - 1041320

PARTE A:
23 – ejercicio 27.4
 ¿Por qué algunos compuestos capaces de absorber radiación fluorescen mientras
que otros no lo hacen?
o La fluoresencia se da cuando se absorbe la energía de la luz ultravioleta e
inmediatamente emite la radiación luminosa.
24 - ejercicio 27.6
 Explique por qué la fluorescencia molecular ocurre comúnmente a una longitud de
onda más grande que la radiación de excitación.
o Se observa que las bandas de fluorescencia molecular están formadas
principalmente por bandas que tienen longitudes de onda más largas y , por
tanto, energías menores que la banda de radiación responsable de su
excitación. Este desplazamiento hacia longitudes de onda mayores se llama
desplazamiento de Stokes. En aquellos casos en los que la radiación
absorbida sea emitida sin cambio en la longitud de onda (misma energía) se
conoce como radiación de resonancia o resonancia fluorescente.
25 – ejercicio 27.7
 Describa los componentes de un fluorómetro de filtro y de un espectrofluorómetro.
o Fluorómetro de filtro: consta de una lampara de mercurio como fuente de
excitación, un filtro primario para transmitir la longitud de onda excitacional
deseada y la cubeta portamuestras. En tubo fotomultiplicador mide la
emisión fluorescente. El filtro secundario, entre la muestra y el fotodetector,
se elige para transmitir la fluorescencia y para absober la radiación de
excitación dispersada.
o Espectrofluorómetro: contiene 4 partes principales; la fuente de radiaciones,
que puede ser un láser, un monocromador de excitación,que selecciona la
longitud de onda adecuada para la excitación de la muestra, un
monocromador de emisión, que analizará las emisiones producidas por la
fluorescencia de la muestra, y un fotomultiplicador, que recibirá las ondas
lumínicas y las transformará en un número medible de cuentas relacionadas
con la intensidad de la luz.
26 - ejercicio 27.10
 La forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina (nadh) es una
coenzima muy importante y altamente fluorescente. Tiene un máximo de absorción
a 340 nm y un máximo de emisión a 465 nm. Un conjunto de soluciones estándar de
nadh produjo las siguientes intensidades de fluorescencia.
a) Construya una hoja de cálculo y utilícela para dibujar una curva de
calibración para nadh.
b) Encuentre la pendiente y la intersección por mínimos cuadrados para la
gráfica en a).
 c) Calcule la desviación estándar de la pendiente y la desviación estándar sobre
la regresión para la curva.
d) Una muestra desconocida exhibe una intensidad de fluorescencia relativa de
11.34. Utilice la hoja de cálculo para calcular la concentración de nadh.
e) Calcule la desviación estándar relativa para el resultado en el inciso d).
f) Calcule la desviación estándar relativa para el resultado en el inciso d) si la
lectura de 12.16 es la media de tres mediciones. 27.11 Los volúmenes de una
disol

27 – ejercicio 27.12
 La quinina en una tableta contra la malaria de 1.664 g se disolvió en suficiente HCl
0.10 M para producir 500 mL de disolución. Una alícuota de 15.00 mL se diluyó
posteriormente a 100.0 mL con el ácido. La intensidad de fluorescencia de la
muestra diluida a 347.5 nm produjo una lectura de 228 en una escala arbitraria. Una
disolución estándar de 100 ppm de quinina registró 180 cuando se midió en
condiciones idénticas a las de la muestra diluida. Calcule la masa de quinina en
miligramos en la tableta.
o Cq = 100 ppm * 288/180 = 160 ppm
o 160 ppm*(100ml/15ml)*(1 mg quinina/1x103 g solución)*(1g
solución/1ml)*500 ml = 533 mg quinina