1.

MÉTODOS ÓPTICOS
DE ANÁLISIS
Espectrofotometría
• La espectrofotometría es el conjunto de técnicas que utilizan la luz
para medir concentraciones químicas.
• Es un procedimiento espectrofotométrico usado por los químicos
para medir azúcares.
Propiedades de la luz
• Es conveniente describir la luz tanto en términos de partículas como
de ondas.
• Las ondas de la luz constan de campos eléctricos y magnéticos que
oscilan en planos perpendiculares entre sí.
Figura. Radiación electromagnética (REM=rem)
• Longitud de onda (λ)
La longitud de onda, es la distancia entre las crestas de dos ondas.

• Frecuencia (ν)
La frecuencia, es el número de oscilaciones completas de una onda en un
segundo. La unidad de frecuencia es el inverso de los segundos, s ^-1 . Una
oscilación por segundo también se llama hercio (Hz).
c: velocidad de la luz
c = 2,998*10^8 m/s en el vacío
c = 3*10^8 m/s
• Desde el punto de vista de la energía, es más conveniente concebir la luz
como partículas llamadas fotones. Cada fotón transporta la energía (E)
Figura. Espectro electromagnético. El espectro visible va desde una
longitud de onda de 380 a 780 nm (1 nm =10^-9m)
Figura. Espectro electromagnético, donde aparecen los procesos moleculares
representativos que ocurren cuando se absorbe luz en cada una de sus regiones.
Absorción de luz
Cuando una molécula absorbe un fotón aumenta la energía de la
molécula. Se dice que la molécula ha pasado a un estado excitado. Si
una molécula emite un fotón, disminuye la energía de la molécula.
El estado de mínima energía de una molécula se llama estado
fundamental.
Figura. Cuando una molécula absorbe luz, aumenta su energía. Al
emitir luz disminuye su energía.
• La radiación de microondas estimula el movimiento rotacional de las
moléculas cuando absorben esa radiación.
• La radiación de IR (Infrarrojo) estimula el movimiento vibracional de
las moléculas cuando la absorben,
• Las radiaciones visible y UV hacen que los electrones pasen a
orbitales de mayor energía.
• Los rayos X y la radiación UV de longitud de onda corta rompen
enlaces químicos e ionizan a las moléculas.
• Los rayos X que se utilizan en medicina pueden ser perjudiciales para
el cuerpo humano, y deben ser reducidos al mínimo.
Ejemplo 1.
¿En cuántos kilojulios por mol aumenta la energía de O2 cuando
absorbe radiación UV de longitud de onda de 147 nm?
¿Qué aumento de energía experimenta el CO2 cuando absorbe
radiación infrarroja de número de onda 2300 cm^-1?
Datos:
¿Qué aumento de energía experimenta el CO2 cuando absorbe
radiación infrarroja de número de onda 2300 cm^-1?
Ejemplo 2.
¿En cuántos kilojulios por mol aumenta la energía de O2 cuando
absorbe radiación UV de longitud de onda de 197 nm?
¿Qué aumento de energía experimenta el CO2 cuando absorbe
radiación infrarroja de número de onda 4500 cm^-1?
¿Qué aumento de energía experimenta el CO2 cuando absorbe
radiación infrarroja de número de onda 4500 cm^-1?
Transmitancia (T).
La transmitancia, T se define como la fracción de la luz incidente que
pasa a través de la muestra.
Po: Irradiancia del haz que entra en la muestra
P: Irradiancia del haz que sale de la muestra
Irradiancia, es la energía del haz de luz por unidad de tiempo y de área,
sus unidades son, vatios por metro cuadrado (W/m^2)
Por lo tanto la Transmitancia (T) puede valer de 0 a 1. El porcentaje de
transmitancia puede valer de 0 a 100 %

Absorbancia (A).
Se define como
Ley de Lambert-Beer o Ley de Beer.
Donde la Absorbancia (A) es directamente proporcional a la concentración

c: concentración (mol/L)
b: camino óptico (cm)
ε (épsilon)
ε: absortividad molar M^-1cm^-1
La absortividad molar es la característica de una sustancia que nos dice
cuánta luz absorbe a una longitud de onda determinada
Ejemplo 3.
Hallar la absorbancia y transmitancia de una disolución 0,00240 M de una
sustancia que tiene una absortividad molar de 313 M^-1 cm^-1, en una
cubeta de 2,00 cm de camino óptico.
Ejemplo 4.
Hallar la absorbancia y transmitancia de una disolución 0,00170 M de
una sustancia que tiene una absortividad molar de 280 M^-1 cm^-1, en
una cubeta de 30,0 mm de camino óptico.
Cromóforo
• Es la parte de una molécula responsable de la absorción de la luz
• La sustancia absorbe ciertas longitudes de onda de la luz blanca, y
nuestros ojos detectan las longitudes de onda que no se absorben
Casos en los que no se cumple la ley de Beer
Esta ley se aplica a la radiación monocromática, y funciona muy bien
con disoluciones diluidas (<= 0,01 M)
Medida de la Absorbancia
Espectrofotómetro, Es un equipo o aparato para medir la absorbancia
de la luz. (Mide la luz que sale de la muestra).
La ley de Beer en el análisis químico
• Para poder determinar un compuesto por espectrofotometría éste
debe de absorber luz, y la absorción debe poder distinguirse de las
otras sustancias que pueda haber en la muestra.
• Generalmente se usa el espectro visible.

Análisis colorimétricos
Son aquellos análisis espectrofotométricos que emplean radiación
visible.
Ejemplo 5. Determinación de benceno en hexano
a) El hexano puro apenas presenta absorbancia en el ultravioleta por
encima de 200 nm. Una disolución preparada disolviendo 25,8 mg de
benceno (C6H6) en hexano, y diluyendo a 250,0 mL, presenta un pico de
absorción a 256 nm, y una absorbancia de 0,266 en una cubeta de 1,000
cm. Hallar la absortividad molar del benceno a dicha longitud de onda.
b) Una muestra de hexano contaminada con benceno dio una
absorbancia de 0,070 a 256 nm en una cubeta de 5,000 cm de paso de
luz. Hallar la concentración del benceno en miligramos por litro.
Ejemplo 6. Determinación de tolueno en hexano
a) El hexano puro apenas presenta absorbancia en el ultravioleta por
encima de 200 nm. Una disolución preparada disolviendo 45,9 mg de
tolueno en hexano, y diluyendo a 350,0 mL, presenta un pico de
absorción a 298 nm, y una absorbancia de 0,325 en una cubeta de
1,000 cm. Hallar la absortividad molar del tolueno a dicha longitud de
onda.
b) Una muestra de hexano contaminada con tolueno dio una
absorbancia de 0,095 a 256 nm en una cubeta de 5,000 cm de paso de
luz. Hallar la concentración del tolueno en miligramos por litro.