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Esterilización y desinfección
La esterilización se define como el proceso en el que se eliminan todos los microorganismos vivos, incluidas
las esporas bacterianas.
La esterilización se puede lograr por medios físicos, químicos y fisicoquímicos. Productos químicos
utilizados como esterilizantes.
Los agentes se denominan quimioesterilizantes.
La desinfección es el proceso de eliminación de la mayoría de los microorganismos patógenos (excluidas las
esporas bacterianas) en
objetos inanimados. La desinfección se puede lograr mediante métodos físicos o químicos. Productos
químicos utilizados en la desinfección.
se llaman desinfectantes. Los diferentes desinfectantes tienen diferentes rangos objetivo, no todos los
desinfectantes pueden matar a todos
microorganismos. Algunos métodos de desinfección, como la filtración, no matan las bacterias, las separan.
La esterilización es una condición absoluta, mientras que la desinfección no lo es. Los dos no son sinonimos.
La descontaminación es el proceso de eliminación de microorganismos patógenos contaminantes de los
artículos por un
proceso de esterilización o desinfección. Es el uso de medios físicos o químicos para eliminar, inactivar o
destruir
organismos vivos en una superficie para que los organismos ya no sean infecciosos.
La higienización es el proceso de limpieza química o mecánica, aplicable en los sistemas de salud
pública. Usualmente usado
por la industria alimentaria. Reduce los microbios en los utensilios para comer a niveles seguros y aceptables
para la salud pública.
La asepsia es el empleo de técnicas (como el uso de guantes, filtros de aire, rayos ultravioleta, etc.) para
lograr
medio ambiente.
La antisepsia es el uso de productos químicos (antisépticos) para hacer que la piel o las membranas
mucosas estén libres de patógenos.
microorganismos.
La bacteriostasis es una condición en la que se inhibe la multiplicación de bacterias sin matarlas.
Bactericida es ese químico que puede matar o inactivar bacterias. Dichos productos químicos pueden
denominarse de diversas formas según
en el espectro de actividad, como bactericida, virucida, fungicida, microbicida, esporicida, tuberculicida o
germicida.
Los antibióticos son sustancias producidas por un microbio que inhibe o mata a otro microbio. A menudo se
usa el término. A menudo se usa el término más generalmente para incluir agentes antimicrobianos sintéticos
y semisintéticos.

MÉTODOS FÍSICOS DE ESTERILIZACIÓN:

Luz solar : La actividad microbicida de la luz solar se debe principalmente a la presencia de rayos
ultravioleta en ella. Es responsable
para esterilización espontánea en condiciones naturales. En los países tropicales, la luz solar es más eficaz
para matar los gérmenes.

debido a la combinación de rayos ultravioleta y calor. Al matar las bacterias suspendidas en el agua, la luz
solar proporciona
método de desinfección de cuerpos de agua como tanques y lagos. La luz solar no es esporicida, por lo que no
esteriliza.
Calor: Se considera que el calor es el método más confiable de esterilización de artículos que pueden
soportar el calor. El calor actúa por
efectos oxidativos así como desnaturalización y coagulación de proteínas. Aquellos artículos que no soportan
alto
Las temperaturas aún se pueden esterilizar a temperaturas más bajas prolongando la duración de la
exposición.

Los factores que afectan la esterilización por calor son:

o Naturaleza del calor: el calor húmedo es más efectivo que el calor seco
o Temperatura y tiempo: la temperatura y el tiempo son inversamente proporcionales. A medida que la
temperatura aumenta el tiempo
disminuciones tomadas.
o Número de microorganismos: A mayor número de microorganismos, mayor temperatura o mayor
duración requerida.
o Naturaleza del microorganismo: Depende de la especie y cepa del microorganismo, la sensibilidad al calor
puede variar.
Las esporas son muy resistentes al calor.
o Tipo de material: Los artículos que están muy contaminados requieren una temperatura más alta o una
exposición prolongada.
Ciertos artículos sensibles al calor deben esterilizarse a una temperatura más baja.
o Presencia de material orgánico: Los materiales orgánicos como proteínas, azúcares, aceites y grasas
aumentan el tiempo
requerido
Acción del calor:
El calor seco actúa mediante la desnaturalización de las proteínas, el daño oxidativo y los efectos tóxicos de
los niveles elevados de electrolitos. los
el calor húmedo actúa por coagulación y desnaturalización de proteínas. El calor húmedo es superior al calor
seco en acción.
La temperatura requerida para matar microbios por calor seco es mayor que el calor húmedo. El tiempo de
muerte térmica es el mínimo
tiempo necesario para matar una suspensión de organismos a una temperatura predeterminada en un entorno
específico

CALOR SECO:
Calor rojo: artículos como asas bacteriológicas, alambres rectos, puntas de fórceps y espátulas abrasadoras se
esterilizan mediante
sosteniéndolos en la llama Bunsen hasta que se pongan al rojo vivo. Este es un método simple para la
esterilización efectiva de tales
artículos, pero se limita a aquellos artículos que se pueden calentar hasta enrojecer en llamas.
Flameado: este es un método para pasar el artículo sobre una llama Bunsen, pero sin calentarlo hasta que se
enrojezca. Artículos como
Los escalpelos, la boca de los tubos de ensayo, los matraces, los portaobjetos de vidrio y los cubreobjetos se
pasan a través de la llama unas cuantas veces. Incluso
aunque la mayoría de las células vegetativas mueren, no hay garantía de que las esporas también mueran con
una exposición tan corta.
Este método también se limita a aquellos artículos que pueden exponerse a las llamas. Puede producirse el
agrietamiento de la cristalería.
Incineración: este es un método para destruir material contaminado quemándolo en un incinerador. Artículos
como
apósitos sucios; Los cadáveres de animales, material patológico y ropa de cama, etc. deben someterse a
incineración. Esta
La técnica da como resultado la pérdida del artículo, por lo que es adecuada solo para aquellos artículos que
deben desecharse. Incendio
de materiales de poliestireno emite humo denso y, por lo tanto, no deben incinerarse.
Horno de aire caliente: este método fue introducido por Louis Pasteur. Los artículos que se van a esterilizar
están expuestos a altas
temperatura (160 o C) durante una hora en un horno calentado eléctricamente. Dado que el aire es un mal
conductor de calor,
Un ventilador logra una distribución uniforme del calor en toda la cámara. El calor se transfiere al artículo por
radiación, conducción y convección. El horno debe estar equipado con un control de termostato, indicador de
temperatura,
estantes mallados y deben tener un aislamiento adecuado.
Artículos esterilizados: instrumentos metálicos (como fórceps, escalpelos, tijeras), artículos de vidrio (como
placas de Petri, pipetas,
matraces, jeringas de vidrio), hisopos, aceites, grasas, vaselina y algunos productos farmacéuticos.
Proceso de esterilización: Los artículos a esterilizar deben estar perfectamente secos antes de colocarlos en el
interior para evitar roturas.
Los artículos deben colocarse a una distancia suficiente para permitir la libre circulación de aire entre
ellos. Bocas de matraces, prueba
Los tubos y ambos extremos de las pipetas deben taponarse con algodón. Los artículos como placas de Petri y
pipetas pueden
dispuestas dentro de botes de metal y luego colocadas. Los artículos de vidrio individuales deben estar
envueltos en papel kraft o
láminas de aluminio.
Ciclo de esterilización: toma en consideración el tiempo que tardan los artículos en alcanzar la temperatura de
esterilización,
mantenimiento de la temperatura de esterilización durante un período definido (tiempo de mantenimiento) y
el tiempo que tardan los artículos en
enfriarse. Las diferentes relaciones temperatura-tiempo para el tiempo de mantenimiento son 60 minutos a
160 o C, 40 minutos a 170 o C y
20 minutos a 180 o C. Incrementar la temperatura en 10 grados acorta el tiempo de esterilización en un 50 por
ciento. El aire caliente
El horno no debe abrirse hasta que la temperatura interior haya descendido por debajo de los 60 o C para
evitar la rotura de los artículos de vidrio.
Control de esterilización: existen tres métodos para comprobar la eficacia del proceso de esterilización, a
saber, físico, químico
y biológico.

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▪ Físico: registrador gráfico de temperatura y termopar.
▪ Químico: tubo de Browne n. ° 3 (mancha verde, el color cambia de rojo a verde)
▪ biológica: 10 6 esporas de Bacillus subtilis niger var o Clostridium tetani en tiras de papel se coloca en el
interior
sobres y luego se coloca dentro del horno de aire caliente. Una vez completado el ciclo de esterilización, las
tiras se
retirados e inoculados en caldo de tioglicolato o medio de carne cocida e incubados a 37 o C durante 3-5
dias. La esterilización adecuada debe matar las esporas y no debe haber ningún crecimiento.
Ventajas: Es un método eficaz de esterilización de artículos termoestables. Los artículos permanecen secos
después de la esterilización.
Este es el único método para esterilizar aceites y polvos.
Desventajas:
▪ Dado que el aire es un mal conductor del calor, el aire caliente tiene poca penetración.
▪ El algodón y el papel pueden quemarse levemente.
▪ Los anteojos pueden volverse humeantes.
▪ Toma más tiempo en comparación con el autoclave.
Rayos infrarrojos : Los rayos infrarrojos provocan la esterilización por generación de calor. Los artículos a
esterilizar se colocan en un
cinta transportadora en movimiento y pasa por un túnel que es calentado por radiadores infrarrojos a una
temperatura de 180 o C.
Los artículos se exponen a esa temperatura durante un período de 7,5 minutos. Artículos esterilizados
incluidos metálicos
instrumentos y cristalería. Se utiliza principalmente en el departamento central de suministros
estériles. Requiere equipos especiales,
por lo tanto, no es aplicable en laboratorio de diagnóstico. La eficacia se puede comprobar utilizando el tubo
de Browne n. ° 4 (punto azul).
CALOR HÚMEDO:
El calor húmedo actúa por coagulación y desnaturalización de proteínas.
A temperatura inferior a 100 o C:
▪ Pasteurización: Este proceso fue empleado originalmente por Louis Pasteur. Actualmente este
procedimiento es
empleado en la industria alimentaria y láctea. Hay dos métodos de pasteurización, el método de soporte
(calentado a
63 o C durante 30 minutos) y el método flash (calentado a 72 o C durante 15 segundos) seguido de
enfriamiento rápido a 13 o C.
Otros métodos de pasteurización incluyen temperatura ultra alta (UHT), 140 o C durante 15 segundos y
149 o C durante 0,5
segundo. Este método es adecuado para destruir la mayoría de los patógenos transmitidos por la leche como
Salmonella, Mycobacteria,
Estreptococos, estafilococos y Brucella, sin embargo, Coxiella puede sobrevivir a la pasteurización. Se prueba
la eficacia
por prueba de fosfatasa y prueba de azul de metileno.
▪ Baño de vacuna: las bacterias contaminantes en una preparación de vacuna se pueden inactivar
calentándolas en agua.
baño a 60 o C durante una hora. Solo las bacterias vegetativas mueren y las esporas sobreviven.
▪ Baño de suero: las bacterias contaminantes en una preparación de suero se pueden inactivar calentándolas en
agua.
baño a 56 o C durante una hora en varios días sucesivos. Las proteínas en el suero se coagularán a mayor
temperatura. Solo las bacterias vegetativas mueren y las esporas sobreviven.
▪ Inspiración: esta es una técnica para solidificar y desinfectar los medios que contienen huevo y suero. los
El medio que contiene suero o huevo se coloca en las pendientes de un inspirador y se calienta a 80-85 o C
durante 30
minutos en tres días sucesivos. El primer día, las bacterias vegetativas morirían y las esporas que
germinan al día siguiente y luego se matan al día siguiente. El proceso depende de la germinación de esporas
en
entre inspiración. Si las esporas no germinan, esta técnica no puede considerarse esterilización.
A temperatura 100 o C:
▪ Hervir: El agua hirviendo (100 o C) mata la mayoría de las bacterias y virus vegetativos
inmediatamente. Ciertas bacterias
Las toxinas como la enterotoxina estafilocócica también son resistentes al calor. Algunas esporas bacterianas
son resistentes a
hervir y sobrevivir; por tanto, esto no sustituye a la esterilización. La actividad letal se puede mejorar
mediante
adición de bicarbonato de sodio al 2%. Cuando no se requiere esterilidad absoluta, ciertos artículos metálicos
y
Los artículos de vidrio se pueden desinfectar colocándolos en agua hirviendo durante 10 a 20 minutos. La
tapa de la caldera debe
no se abrirá durante el período.
▪ Vapor a 100 o C: En lugar de mantener las prendas en agua hirviendo, se someten a vapor libre a 100 o C.
Tradicionalmente se utilizaron vapores de Arnold y Koch. Un autoclave (con el grifo de descarga abierto)
también puede
sirven al mismo propósito. Un vaporizador es un gabinete de metal con bandejas perforadas para contener los
artículos y un
tapa cónica. El fondo de la vaporera se llena con agua y se calienta. El vapor que se genera esteriliza el
artículos cuando se exponen durante un período de 90 minutos. Los medios como TCBS, DCA y caldo de
selenita son
esterilizado al vapor. El azúcar y la gelatina en el medio pueden descomponerse en autoclave, por lo que son
expuestos a vapor libre durante 20 minutos durante tres días consecutivos. Este proceso se conoce como
tyndallización.
(después de John Tyndall) o esterilización fraccionada o esterilización intermitente. Las bacterias vegetativas
mueren en
la primera exposición y las esporas que germinan al día siguiente mueren en los días siguientes. El éxito de
El proceso depende de la germinación de las esporas.
A temperatura superior a 100 o C:

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Autoclave: la esterilización se puede lograr eficazmente a una temperatura superior a 100 o C utilizando un
autoclave. El agua hierve
a 100 o C a presión atmosférica, pero si se eleva la presión, también aumenta la temperatura a la que hierve el
agua.
En un autoclave, el agua se hierve en una cámara cerrada. A medida que aumenta la presión, también aumenta
el punto de ebullición del agua.
A una presión de 15 libras dentro del autoclave, se dice que la temperatura es de 121 o C.Exposición de
artículos a este
la temperatura durante 15 minutos los esteriliza. Para destruir los agentes infecciosos asociados con
espongiformes
se utilizan encefalopatías (priones), temperaturas más altas o tiempos más largos; 135 o C o 121 o C durante al
menos una hora son
recomendado.
Ventajas del vapor: Tiene más poder de penetración que el aire seco, humedece las esporas (la humedad es
fundamental para
coagulación de proteínas), la condensación del vapor en una superficie más fría libera calor latente, la
condensación del vapor
aspira vapor fresco.
Diferentes tipos de autoclave:
Autoclave de laboratorio simple "tipo olla a presión", autoclave de laboratorio de desplazamiento descendente
con camisa de vapor
y autoclave de vacío previo de alta presión
Construcción y operación de autoclave :
Un autoclave simple tiene un cuerpo cilíndrico vertical u horizontal
con un elemento calefactor, un intento perforado para guardar los artículos, una tapa
que se puede sujetar con abrazaderas de tornillo, un manómetro, un
válvula de seguridad y grifo de descarga. Los artículos a esterilizar
no debe estar muy apretado. Los tapones de rosca y tapones de algodón
debe estar ajustado sin apretar. La tapa está cerrada pero el grifo de descarga está
se mantiene abierto y el agua se calienta. Cuando el agua comienza a hervir,
el vapor expulsa el aire del grifo de descarga. Cuando todo el aire es
desplazado y empieza a salir vapor por el grifo de descarga,
el grifo está cerrado. Se permite que la presión en el interior suba hasta 15
libras por pulgada cuadrada. A esta presión, los artículos se mantienen durante 15
minutos, después de los cuales se detiene el calentamiento y el autoclave se
dejar enfriar. Una vez que el manómetro muestra la presión
igual a la presión atmosférica, el grifo de descarga se abre para
Deje que entre el aire. A continuación, se abre la tapa y se retiran los artículos.
Artículos esterilizados: Medios de cultivo, apósitos, ciertos equipos,
ropa de cama, etc.
Precauciones: Los artículos no deben embalarse apretadamente, el autoclave
no debe sobrecargarse, la descarga de aire debe ser completa y
no debe haber aire residual atrapado en el interior, tapas de
Los frascos y matraces no deben estar apretados, el autoclave no debe ser
abierto hasta que la presión haya disminuido o el contenido se desbordará, los artículos deben envolverse en
papel para evitar
empapando, las botellas no deben llenarse en exceso.
Ventaja: método de esterilización muy eficaz, más rápido que el horno de aire caliente.
Desventajas: Es posible que se empapen y se mojen los artículos, el aire atrapado puede reducir la eficacia,
lleva mucho tiempo
frio
Control de esterilización: el método físico incluye control de proceso automático, termopar y gráfico de
temperatura
grabadora. El método químico incluye el tubo n.o 1 de Browne (punto negro) y el ácido succínico (cuyo punto
de fusión es
121 o C) y cinta Bowie Dick. La cinta Bowie Dick se aplica a los artículos que se esterilizan en autoclave. Si
el proceso ha sido
satisfactoriamente, aparecerán franjas de color marrón oscuro a lo largo de la cinta. El método biológico
incluye una tira de papel que contiene 10 6
esporas de Geobacillus stearothermophilus .
RADIACION :
Se utilizan dos tipos de radiación, ionizantes y no ionizantes. Los rayos no ionizantes son rayos de baja
energía con poca
poder de penetración mientras que los rayos ionizantes son rayos de alta energía con buen poder de
penetración. Dado que la radiación no
generar calor, se denomina "esterilización en frío". En algunas partes de Europa, las frutas y verduras se
irradian para
aumentar su vida útil hasta en un 500 por ciento.
▪ Rayos no ionizantes : Los rayos de longitud de onda más largos que la luz visible no son
ionizantes. Microbicida
La longitud de onda de los rayos UV se encuentra en el rango de 200-280 nm, siendo 260 nm el más
efectivo. Los rayos ultravioleta son
generado usando una lámpara de vapor de mercurio de alta presión. Es en esta longitud de onda que la
absorción por el
microorganismos está en su máximo, lo que resulta en el efecto germicida. Los rayos ultravioleta inducen la
formación de
dímeros de timina-timina, que en última instancia inhiben la replicación del ADN. Los rayos UV inducen
fácilmente mutaciones en las células.

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irradiado con una dosis no letal. Microorganismos como bacterias, virus, levaduras, etc.que están expuestos a
la radiación ultravioleta efectiva se inactiva en segundos. Dado que los rayos UV no matan las esporas, son
se considera útil en la desinfección de superficies. Los rayos ultravioleta se emplean para desinfectar las salas
del hospital, operación
teatros, laboratorios de virus, pasillos, etc. Las desventajas del uso de rayos ultravioleta incluyen bajo poder
de penetración,
vida limitada del bulbo ultravioleta, algunas bacterias tienen enzimas reparadoras del ADN que pueden
superar el daño causado por
Los rayos ultravioleta, la materia orgánica y el polvo impiden su alcance, los rayos son dañinos para la piel y
los ojos. No penetra
vidrio, papel o plástico.
▪ Rayos ionizantes : Los rayos ionizantes son de dos tipos, partículas y rayos electromagnéticos.
o Los haces de electrones son de naturaleza particulada, mientras que los rayos gamma son de naturaleza
electromagnética. Elevado-
Los electrones de velocidad son producidos por un acelerador lineal de un cátodo calentado. Los haces de
electrones son
empleado para esterilizar artículos como jeringas, guantes, paquetitos, alimentos y productos farmacéuticos.
La esterilización se realiza en pocos segundos. A diferencia de los rayos electromagnéticos, los instrumentos
pueden
apagado. La desventaja incluye un escaso poder de penetración y el requisito de un sofisticado
equipo.
o Los rayos electromagnéticos, como los rayos gamma, emanan de la desintegración nuclear de ciertos
isótopos radiactivos (Co 60 , Cs 137 ). Tienen más poder de penetración que el haz de electrones, pero
requieren más tiempo de exposición. Estas radiaciones de alta energía dañan el ácido nucleico del
microorganismo. Una dosis de 2,5 megarads mata todas las bacterias, hongos, virus y esporas. Esta usado
comercialmente para esterilizar placas de Petri desechables, jeringas de plástico, antibióticos, vitaminas,
hormonas,
cristalería y tejidos. Las desventajas incluyen; a diferencia de los haces de electrones, no se pueden apagar,
los artículos de vidrio tienden a volverse marrones, pérdida de resistencia a la tracción en la tela. La
irradiación gamma perjudica
el sabor de ciertos alimentos. Bacillus pumilus E601 se utiliza para evaluar el proceso de esterilización.
FILTRACIÓN:
La filtración no mata a los microbios, los separa. Los filtros de membrana con tamaños de poro entre 0,2 y
0,45 µm son
Se usa comúnmente para eliminar partículas de soluciones que no se pueden esterilizar en autoclave. Se
utiliza para eliminar los microbios del calor.
líquidos lábiles como suero, soluciones de antibióticos, soluciones de azúcar, solución de urea. Varias
aplicaciones de filtración
incluyen la eliminación de bacterias de los ingredientes de los medios de cultivo, la preparación de
suspensiones de virus y fagos libres de
bacterias, medición de tamaños de virus, separación de toxinas de filtrados de cultivo, recuento de bacterias,
clarificación de fluidos y
líquido hidatídico purificador. La filtración se ayuda mediante el uso de presión positiva o negativa mediante
bombas de vacío. los
Los filtros más antiguos hechos de barro o asbesto se denominan filtros de profundidad.
Los diferentes tipos de filtros son:
1. Filtros de loza : Estos filtros se componen de tierra de diatomeas o porcelana. Por lo general se hornean
en forma de vela. Los diferentes tipos de filtros de barro son:
una. Filtro Pasteur-Chamberland: estos filtros de vela son de Francia y están hechos de porcelana
(arena y caolín). Un filtro similar de Gran Bretaña es Doulton. Los filtros de Chamberland se fabrican con
varios
porosidades, que se clasifican como L1, L1a, L2, L3, L5, L7, L9 y L11. Los filtros Doulton son P2, P5 y
P11.
B. Filtro Berkefeld: están hechos de Kieselguhr, una tierra de diatomeas fosilizada que se encuentra en
Alemania.
Están disponibles en tres grados según su porosidad (tamaño de poro); son V (velo), N
(normal) y W (wenig). La calidad del filtro de grado V se comprueba utilizando una suspensión
de cultivo de Serrtia.
marcescens (0,75 µm).
C. Filtro Mandler: Este filtro de América está hecho de tierra de diatomeas, amianto y yeso de París.
2. Filtros de amianto : estos filtros están hechos de amianto tipo crisotilo, compuesto químicamente de
silicato de magnesio. Se presionan para formar un disco, que debe usarse una sola vez. El disco se lleva a
cabo dentro
un soporte de metal, que se esteriliza en autoclave. Están disponibles en los siguientes grados; HP / PYR (para
eliminación de pirógenos), HP / EKS (para esterilidad absoluta) y HP / EK (para claryfying).
3. Filtros de vidrio sinterizado : están hechos de vidrio finamente molido que se fusionan lo suficiente para
hacer pequeños
las partículas se adhieren entre sí. Por lo general, están disponibles en forma de disco fundido en un embudo
de vidrio.
Los filtros de grado 5 tienen un diámetro medio de poro de 1-1,5 µm. Se lavan con agua corriente al revés.
dirección y se limpió con H 2 SO 4 concentrado tibio y se esterilizó en autoclave.
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4. Filtros de membrana : estos filtros están hechos de una variedad de materiales poliméricos como nitrato
de celulosa,
diacetato de celulosa, policarbonato y poliéster. El tipo más antiguo de membrana, llamado gradocol
(graduado
coloidión) estaba compuesta de nitrato de celulosa. Las membranas de Gradocol tienen poro medio
diámetro de 3-10 µm. Los más nuevos están compuestos de diacetato de celulosa. Estas membranas tienen un
poro
diámetro comprendido entre 0,015 µm y 12 µm. Estos filtros se esterilizan en autoclave. Los filtros de
membrana son
hecho de dos maneras, las membranas de los poros capilares tienen poros producidos por la radiación,
mientras que el laberíntico
las membranas de los poros se producen por evaporación forzada de disolventes a partir de ésteres de
celulosa.
Las desventajas de los filtros de profundidad son la migración del material del filtro al filtrado, la absorción o
retención de ciertos
volumen de líquido por los filtros, el tamaño de los poros no está definido y los virus y micoplasmas podrían
atravesarlos. los
Las ventajas de los filtros de membrana son la porosidad conocida, la no retención de fluidos, reutilizables
después del autoclave y
compatible con muchos productos químicos. Sin embargo, los filtros de membrana tienen poca capacidad de
carga y son frágiles.
Filtros de aire: el aire se puede filtrar con filtros HEPA (aire de partículas de alta eficiencia). Suelen
utilizarse en biológicos
Armarios de seguridad. Los filtros HEPA tienen al menos un 99,97% de eficacia para eliminar partículas de>
0,3 µm de diámetro. Ejemplos de
las áreas donde se utilizan filtros HEPA incluyen las salas que albergan a pacientes con neutropenia grave y
los quirófanos
designado para procedimientos de implantes ortopédicos. La eficiencia del filtro HEPA se controla con el
dioctilftalato (DOP)
ensayo de partículas utilizando partículas de 0,3 µm de diámetro.
VIBRACIONES SÓNICAS Y ULTRASÓNICAS : Las ondas sonoras de frecuencia> 20.000 ciclos /
segundo matan las bacterias y
algunos virus al exponerse durante una hora. Las microondas no son particularmente antimicrobianas en sí
mismas, más bien
El efecto letal de las microondas se debe en gran medida al calor que generan. Las ondas sonoras de alta
frecuencia interrumpen
células. Se utilizan para limpiar y desinfectar instrumentos, así como para reducir la carga microbiana. Este
método no es
confiable ya que muchos virus y fagos no se ven afectados por estas ondas.
MÉTODOS QUÍMICOS DE DESINFECCIÓN :
Los desinfectantes son aquellos químicos que destruyen las bacterias patógenas de las superficies
inanimadas. Algunos químicos tienen
espectro de actividad muy estrecho y algunos tienen muy amplio. Los productos químicos que pueden
esterilizar se denominan
químicos esterilizantes. Los productos químicos que se pueden aplicar de forma segura sobre la piel y las
membranas mucosas se denominan antisépticos.
Un antiséptico o desinfectante ideal debe tener las siguientes propiedades:
▪ Debe tener un amplio espectro de actividad.
▪ Debería ser capaz de destruir microbios en un período de tiempo práctico.
▪ Debe estar activo en presencia de materia orgánica.
▪ Debe hacer un contacto efectivo y ser humectable.
▪ Debe estar activo en cualquier pH
▪ Debería ser estable
▪ Debe tener una vida útil prolongada
▪ Debe ser rápido
▪ Debe tener un alto poder de penetración.
▪ No debe ser tóxico, no alergénico, no irritante ni corrosivo.
▪ No debe tener mal olor
▪ No debe dejar residuos ni manchas no volátiles.
▪ La eficacia no debe perderse con una dilución razonable.
▪ No debe ser costoso y debe estar disponible fácilmente.
Todavía no se dispone de un desinfectante tan ideal. El nivel de desinfección alcanzado depende del tiempo
de contacto,
temperatura, tipo y concentración del ingrediente activo, la presencia de materia orgánica, el tipo y la cantidad
de carga microbiana. Los desinfectantes químicos en concentraciones de trabajo pierden rápidamente su
fuerza al reposar.
Clasificación de desinfectantes :
1. Basado en la coherencia
una. Líquido (p. Ej., Alcoholes, fenoles)
B. Gaseoso (vapor de formaldehído, óxido de etileno)
2. Basado en el espectro de actividad
una. Nivel alto
B. Nivel intermedio
C. Nivel bajo
3. Basado en el mecanismo de acción
una. Acción sobre la membrana (p. Ej., Alcohol, detergente)
B. Desnaturalización de proteínas celulares (p. Ej., Alcohol, fenol)

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C. Oxidación de grupos sulfhidrilo esenciales de enzimas (p. Ej., H2O2, halógenos)
D. Alquilación de grupos amino, carboxilo e hidroxilo (por ejemplo, óxido de etileno, formaldehído)
mi. Daño a los ácidos nucleicos (óxido de etileno, formaldehído)
Espectro de actividad
Vegetativo
células
Micobacterias
Esporas
Hongos
Virus
Ejemplos de
Nivel alto
+
+
+
+
+
Óxido de etileno,
Gluteraldehído,
Formaldehído
Intermedio
nivel
+
+
-
+
+
Fenólicos, halógenos
Nivel bajo
+
-
-
+
+/-
Alcoholes cuaternarios
compuestos de amonio
ALCOHOLES:
Modo de acción : los alcoholes deshidratan las células, rompen las membranas y provocan la coagulación de
las proteínas.
Ejemplos : alcohol etílico, alcohol isopropílico y alcohol metílico
Aplicación : Una solución acuosa al 70% es más eficaz para matar microbios que los alcoholes
absolutos. Alcohol etílico al 70%
(alcohol) se utiliza como antiséptico en la piel. Se prefiere el alcohol isopropílico al etanol. También se puede
utilizar para desinfectar.
superficies. Se utiliza para desinfectar termómetros clínicos. El alcohol metílico mata las esporas de hongos,
por lo que es útil en
Desinfección de campanas de inoculación.
Desventajas : Irritante de la piel, volátil (se evapora rápidamente), inflamable
ALDEHÍDOS :
Modo de acción : actúa mediante la alquilación del grupo amino, carboxilo o hidroxilo, y probablemente
daña el núcleo
ácidos. Mata a todos los microorganismos, incluidas las esporas.
Ejemplos : formaldehído, gluteraldehído
Aplicación : 40% de formaldehído (formalina) se utiliza para la desinfección de superficies y fumigación de
habitaciones, cámaras,
quirófanos, gabinetes de seguridad biológica, pabellones, salas de enfermos, etc. La fumigación se realiza
hirviendo formalina,
calentar paraformaldehído o tratar formalina con permanganato de potasio. También esteriliza ropa de cama,
muebles y
libros. La formalina al 10% con tetraborato al 0,5% esteriliza los instrumentos metálicos limpios. Se utiliza
gluteraldehído al 2% para esterilizar
termómetros, cistoscopios, broncoscopios, centrifugadoras, equipos anaseéticos, etc. Una exposición de al
menos 3
Se requieren horas a pH alcalino para la acción del gluteraldehído. Se utiliza formaldehído al 2% a 40 o C
durante 20 minutos para
desinfectar lana y 0,25% a 60 o C durante seis horas para desinfectar pelos y cerdas de animales.
Desventajas : Los vapores son irritantes (deben ser neutralizados con amoniaco), tiene poca penetración, deja
no volátiles
residuo, la actividad se reduce en presencia de proteína. El gluteraldehído requiere pH alcalino y solo esos
artículos
que son humectables se pueden esterilizar.
FENOL :
Modo de acción : Actúa por rotura de membranas, precipitación de proteínas e inactivación de enzimas.
Ejemplos : 5% de fenol, 1-5% de cresol, 5% de lisol (un cresol saponificado), hexaclorofeno, clorhexidina,
cloroxilenol
(Dettol)
Aplicaciones: Joseph Lister lo usó para prevenir la infección de heridas quirúrgicas. Los fenoles son
derivados del alquitrán de hulla. Ellos
actúan como desinfectantes a altas concentraciones y como antisépticos a bajas concentraciones. Son
bactericidas, fungicidas,
micobactericidas, pero son inactivos contra las esporas y la mayoría de los virus. No son fácilmente
inactivados por orgánicos.
importar. Los fenólicos corrosivos se utilizan para la desinfección de suelos de salas, en frascos de desecho en
laboratorios y
desinfección de orinales. La clorhexidina se puede utilizar en una solución de isopropanol para la
desinfección de la piel o como
solución acuosa para irrigación de heridas. A menudo se usa como un lavado de manos antiséptico. Gluconato
de clorhexidina al 20%
La solución se utiliza para la preparación preoperatoria de manos y piel y para la desinfección general de la
piel. Clorhexidina
El gluconato también se mezcla con compuestos de amonio cuaternario como cetrimida para volverse más
fuerte y más amplio.
efectos antimicrobianos (por ejemplo, Savlon). Los cloroxilenoles son menos irritantes y se pueden usar con
fines tópicos y son
más eficaz contra bacterias gram positivas que contra bacterias gram negativas. El hexaclorofeno es difenilo
clorado
y es mucho menos irritante. Tiene un efecto marcado sobre las bacterias grampositivas pero un efecto pobre
sobre las gramnegativas.
bacterias, micobacterias, hongos y virus. El triclosán es un feniléter orgánico con buena actividad contra gram
bacterias positivas y hasta cierto punto eficaz contra muchas bacterias gram negativas, incluida
Pseudomonas. También
tiene actividad justa sobre hongos y virus.

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Desventajas : Es tóxico, corrosivo e irritante para la piel. La clorhexidina se inactiva mediante jabones
aniónicos. El cloroxilenol es
inactivado por agua dura.
HALÓGENOS :
Modo de acción : Son agentes oxidantes y causan daño por oxidación de grupos sulfidrilo esenciales de
enzimas. El cloro reacciona con el agua para formar ácido hipocloroso, que es microbicida.
Ejemplos : compuestos de cloro (cloro, lejía, hipoclorito) y compuestos de yodo (tintura de yodo,
yodóforos)
Aplicaciones : La tintura de yodo (2% de yodo en 70% de alcohol) es un antiséptico. El yodo se puede
combinar con neutro
polímeros portadores como polivinilpirrolidona para preparar yodóforos como povidona yodada. Permiso de
yodóforos
Liberación lenta y reduce la irritación del antiséptico. Para el lavado de manos, los yodóforos se diluyen en
alcohol al 50%.
La povidona yodada al 10% se usa sin diluir en la desinfección de la piel antes y después de la operación. El
cloro gaseoso se usa para blanquear
agua. Se puede usar lejía doméstica para desinfectar pisos. Blanqueador de uso doméstico utilizado en una
dilución estándar de 1:10. En alto
concentraciones de cloro se utiliza para desinfectar piscinas. Se utiliza hipoclorito de sodio al 0,5% en
serología y
virología. Se utiliza a una dilución de 1:10 en la descontaminación de derrames de material infeccioso. El
cloruro de mercurio se utiliza como
un desinfectante.
Desventajas : Se inactivan rápidamente en presencia de materia orgánica. El yodo es corrosivo y mancha.
La solución de lejía es corrosiva y corroerá las superficies de acero inoxidable.
METALES PESADOS :
Modo de acción : Actúa por precipitación de proteínas y oxidación de grupos sulfidrilo. Son bacteriostáticos.
Ejemplos : cloruro de mercurio, nitrato de plata, sulfato de cobre, sales orgánicas de mercurio (p. Ej.,
Mercurocromo,
mertiolado)
Aplicaciones : Se puede aplicar una solución de nitrato de plata al 1% en los ojos como tratamiento para la
oftalmía neonatal (Crede's
método). Este procedimiento ya no se sigue. La sulfadiazina de plata se usa tópicamente para ayudar a
prevenir la colonización.
e infección de tejidos quemados. Los mercuriales son activos contra virus a una dilución de 1: 500 a 1:
1000. Mertiolato a
se utiliza una concentración de 1: 10000 para la conservación del suero. Las sales de cobre se utilizan como
fungicida.
Desventajas : El cloruro de mercurio es altamente tóxico, se inactiva fácilmente por la materia orgánica.
AGENTES ACTIVOS DE SUPERFICIE:
Modo de acción : tienen la propiedad de concentrarse en las interfaces entre la membrana que contiene
lípidos de
célula bacteriana y medio acuoso circundante. Estos compuestos tienen hidrocarburos de cadena larga que son
grasas.
iones solubles y cargados que son solubles en agua. Dado que contienen ambos, se concentran en la
superficie.
de membranas. Rompen la membrana dando como resultado la fuga de componentes celulares.
Ejemplos : estos son jabones o detergentes. Los detergentes pueden ser aniónicos o catiónicos. Detergentes
que contienen negativamente
Los hidrocarburos cargados de cadena larga se denominan detergentes aniónicos. Estos incluyen jabones y
sales biliares. Si el soluble en grasa
parte se hace para tener una carga positiva al combinarse con un átomo de nitrógeno cuaternario, se llama
catiónico
detergentes. Los detergentes catiónicos se conocen como compuestos de amonio cuaternario (o
quat). Cetrimida y
El cloruro de benzalconio actúa como detergente catiónico.
Aplicación : Son activos contra células vegetativas, micobacterias y virus envueltos. Son ampliamente
utilizados
como desinfectantes a dilución del 1-2% para uso doméstico y en hospitales.
Desventajas : Su actividad se ve reducida por agua dura, detergentes aniónicos y materia
orgánica. Pseudomonas puede
metabolizan la cetrimida, utilizándolas como fuente de carbono, nitrógeno y energía.
COLORANTES :
Modo de acción : Los colorantes de acridina son bactericidas debido a su interacción con los ácidos nucleicos
bacterianos.
Ejemplos : tintes de anilina como violeta cristal, verde malaquita y verde brillante. Colorantes de acridina
como acriflavina
y aminacrina. La acriflavina es una mezcla de proflavina y euflavina. Solo la euflavina tiene un efecto
antimicrobiano eficaz.
propiedades. Un colorante relacionado, el bromuro de etidio, también es germicida. Se intercala entre pares de
bases en el ADN. Son
más eficaces contra las bacterias gram positivas que contra las bacterias gram negativas y tienen una acción
más bacteriostática.
Aplicaciones : Pueden usarse tópicamente como antisépticos para tratar quemaduras leves. Se utilizan como
pintura en la piel para
tratar las infecciones bacterianas de la piel. Los colorantes se utilizan como agentes selectivos en
determinados medios selectivos.
PERÓXIDO DE HIDRÓGENO:
Modo de acción : Actúa sobre los microorganismos mediante su liberación de oxígeno naciente. El peróxido
de hidrógeno produce
Radicales libres de hidroxilo que dañan las proteínas y el ADN.
Aplicación : Se utiliza al 6% de concentración para descontaminar los instrumentos, equipos como
ventiladores. 3%
La solución de peróxido de hidrógeno se utiliza para desinfectar la piel y desodorizar heridas y
úlceras. Soluciones fuertes son
esporicida.

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Desventajas : Se descompone a la luz, degradado por la catalasa, la materia orgánica proteica reduce
drásticamente
su actividad.
ÓXIDO DE ETILENO (EO):
Modo de acción : Es un agente alquilante. Actúa alquilando grupos sulfidrilo, amino, carboxilo e hidroxilo.
Propiedades : Es una molécula cíclica, que es un líquido incoloro a temperatura ambiente. Tiene un olor
dulce y etéreo,
polimeriza fácilmente y es inflamable.
Aplicación : Es un químico esterilizante altamente eficaz, capaz de matar las esporas rápidamente. Dado que
es altamente inflamable, es
generalmente combinado con CO 2 (10% CO 2 + 90% EO) o diclorodifluorometano. Requiere presencia de
humedad. Tiene
Buena penetración y bien absorbido por material poroso. Se utiliza para esterilizar artículos termolábiles
como ropa de cama,
textiles, caucho, plásticos, jeringas, placas de Petri desechables, aparatos complejos como máquinas corazón-
pulmón, sistemas respiratorios
y equipos dentales.
Las pruebas de eficiencia se realizan con Bacillus subtilis var niger.
Desventajas : Es altamente tóxico, irritante para los ojos, la piel, altamente inflamable, mutágeno y
cancerígeno.
BETA-PROPIOLACTONA (BPL):
Modo de acción : Es un agente alquilante y actúa mediante la alquilación de grupos carboxilo e hidroxilo.
Propiedades : Es un líquido incoloro con olor acre o ligeramente dulzón. Es un producto de condensación de
cetano con
formaldehído.
Aplicación : Es un agente esporicida eficaz y tiene una actividad de amplio espectro. El 0,2% se utiliza para
esterilizar productos biológicos.
productos. Es más eficaz en fumigación que el formaldehído. Se utiliza para esterilizar vacunas, injertos de
tejido, cirugía
instrumentos y enzimas
Desventajas : Tiene escaso poder de penetración y es carcinógeno.
MÉTODO FISIOQUÍMICO:
Modo de acción : un método fisicoquímico adopta un método tanto físico como químico. Uso de vapor
El formaldehído es un método fisioquímico de esterilización, que tiene en cuenta la acción del vapor, así
como que
de formaldehído. El vapor saturado a una presión de 263 mm tiene una temperatura de 70 o C. El aire se
elimina del
La cámara de autoclave y el vapor saturado a presión subatmosférica se enjuagan. A continuación, se inyecta
formaldehído
con vapor en una serie de pulsos, cada uno de 5 a 10 minutos. Los artículos se mantienen a esta temperatura
de mantenimiento durante un
hora. Luego, el formaldehído se enjuaga mediante la entrada de vapor.
Desventajas : Se produce condensación de formaldehído y la inducción de un gran volumen de formaldehído
moja el
vapor que resulta en pérdida de calor latente.
Control de Esterilización : el uso de tiras de papel que contienen 10 6 esporas de G.stearothermophilus .
PRUEBAS DE DESINFECTANTES:
Se debe probar un desinfectante para conocer la dilución efectiva requerida, el tiempo necesario para efectuar
la desinfección y para
monitorear periódicamente su actividad. Como se sabe que los desinfectantes pierden su actividad al estar de
pie, así como en el
presencia de materia orgánica, su actividad debe ser probada periódicamente.
Los diferentes métodos son :
1. Método de Koch
2. Método Rideal Walker
3. Prueba de Chick Martin
4. Prueba de dilución de uso de capacidad (prueba de Kelsey-Sykes)
5. Prueba en uso
Método de Koch : Las esporas de Bacillus anthracis se secaron en hilo de seda y se sometieron a la acción de
desinfectantes. Posteriormente, se lavó y se transfirió a medio sólido.
Método Rideal Walker : este método se basa en la estimación del coeficiente de fenol. Coeficiente de fenol
de a
El desinfectante se calcula dividiendo la dilución del desinfectante de prueba por la dilución del fenol que
desinfecta bajo
condiciones predeterminadas. Tanto el fenol como el desinfectante de prueba se diluyen de 1/95 a 1/115 y su
La actividad bactericida se determina frente a la suspensión de Salmonella typhi . Los subcultivos se realizan
tanto desde el
prueba y fenol a intervalos de 2,5, 5, 7,5 y 10 minutos. Las placas se incuban durante 48-72 horas a 37 °
C. Ese
La dilución de desinfectante que desinfecta la suspensión en un tiempo determinado se divide por la dilución
de fenol que
desinfecta la suspensión al mismo tiempo da su coeficiente de fenol.

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Las desventajas de la prueba Rideal-Walker son: No se incluye materia orgánica; el microorganismo
Salmonella typhi
puede no ser apropiado; el tiempo permitido para la desinfección es corto; debe usarse para evaluar el tipo
fenólico
desinfectantes solamente.
Prueba de Chick Martin : esta prueba también determina el coeficiente de fenol del desinfectante de
prueba. A diferencia de Rideal Walker
método donde la prueba se lleva a cabo en agua, los desinfectantes se hacen actuar en presencia de suspensión
de levadura
(o 3% de heces humanas secas). El tiempo para el subcultivo se fija en 30 minutos y el organismo utilizado
para probar la eficacia es
S.typhi y S.aureus . El coeficiente de fenol es menor que el dado por el método Rideal Walker.
Rideal-caminante
Chick-Martin
Medio de volumen
5,0 ml
10,0 ml
Diluyente para prueba
desinfectante
Agua
Suspensión de levadura
Temperatura de reaccion
17,5 ± 0,5ºC
30ºC
Organismo
Salmonella typhi
Salmonella typhi,
Staphylococcus aureus
Tiempos de muestreo
2,5, 5,0, 7,5, 10,0 min.
30,0 min.
Cálculo de coeficiente
Prueba de dilución matando en 7,5 min dividido
por lo mismo para el fenol
Concentración media de fenol que no muestra
crecimiento después de 30 min. dividido por lo mismo para
prueba
Las pruebas clásicas como Rideal-Walker o Chick-Martin no son practicables.
Prueba de dilución de uso de capacidad (prueba de Kelsey-Sykes):
Inóculo de cuatro organismos de ensayo diferentes, a saber, Staphylococcus aureus, Escherichia coli,
Pseudomonas
aeruginosa y Proteus vulgaris se añaden al desinfectante en tres sucesivos. Se incluye levadura seca para
simular la presencia de materia orgánica. El método puede llevarse a cabo en condiciones "limpias" o
"sucias". Las diluciones
del desinfectante se fabrican en agua dura para condiciones limpias y en suspensión de levadura para
condiciones sucias. Prueba
organismo solo o con levadura se añade a intervalos de 0,10 y 20 minutos. El tiempo de contacto del
desinfectante y la prueba.
organismo es de 8 min. El desinfectante se evalúa según su capacidad para matar microorganismos o su falta
y el resultado es
reportado como aprobado o reprobado y no como un coeficiente. La prueba de capacidad de Kelsey y Sykes
da una buena pauta
para la dilución de la preparación a utilizar. La desventaja de esta prueba es el hecho de que es bastante
complicada.
Prueba en uso:
El control de rutina del desinfectante en uso se puede realizar mediante la prueba "en uso" de Maurer. Esta
prueba está destinada a
Estime el número de organismos vivos en un recipiente de desinfectante en uso real.
El desinfectante que ya está en uso se diluye 1 en 10 mezclando 1 ml del desinfectante con 9 ml de nutriente
estéril.
caldo. Se colocan diez gotas del desinfectante diluido (cada 0,02 ml) en dos placas de agar nutritivo. Un plato
es
Se incuban a 37 o C durante 3 días mientras que el otro se mantiene a temperatura ambiente durante 7 días. La
cantidad de gotas que
El crecimiento producido se cuenta después de la incubación. Si hay crecimiento en más de cinco gotas en
cualquiera de las placas, representa
falla del desinfectante