MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

YOHN JAIRO GUEVARA BOHÓRQUEZ NANCY LILIANA CUELLO MONTERROZA GUSTAVO ALBERTO MUÑOZ SIERRA

PRESENTADO A:

LUÍS ELIÉCER OVIEDO ZUMAQUÉ, MSC

MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VI SEMESTRE – GRUPO II MONTERÍA, 28 DE FEBRERO DE 2008

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN INTRODUCCIÓN La esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. tubos. ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. . En el presente trabajo se verán los resultados obtenidos al aplicar procesos de esterilización. Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo. placas de Petri. pinzas.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. El acondicionamiento del material (pipetas. así como las ventajas de los procedimientos. etc. así como el proceso de la esterilización por calor seco de estos. etc. para lograr medios asépticos y resultados ideales. análisis microbiológico de medicamentos. cosméticos. control de ambiente. OBJETIVOS Aprender el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología.). Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico. Entre éstos podemos destacar: La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos. alimentos. equipos o personal.

Aire caliente Incineración Radiaciones AGENTES MECÁNICOS Filtración AGENTES QUIMICOS Gaseosos Oxido de etileno No gaseosos Peroxido de hidrogeno . Vapor a Presión (autoclave) Seco (horno) Ej.MARCO TEÓRICO CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. AGENTES FÍSICOS Calor Húmedo Ej. Existen diversos métodos de esterilización.

Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. como por ejemplo materiales plásticos. fusión de membranas. y las radiaciones no ionizantes. o emisión y propagación de la energía a través de un medio. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula. La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja. . Agentes mecánicos La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material. como la luz ultravioleta.Agentes físicos El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Así tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de materiales termolábiles. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. puede ser empleada en el control de áreas cerradas. puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. La radiación.

Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. tales como: Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles. Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones. ni colocarlos sobre superficies mojadas. accidental o no. Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada. Los materiales estériles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura. sino con factores que comprometen su exposición al medio ambiente. etc. La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa entre 30 y 60%. la duración de la esterilidad de un material no está relacionada directamente con el tiempo. membranas. libre de polvo. . Mantener el área de almacenamiento limpia.) ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL. Es importante no manipular los materiales estériles con las manos húmedas. del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. sucio e insectos. Al humedecerse el material de empaque. Es decir.Agentes químicos Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas.

. así que solo se mencionará teóricamente. durante 30 minutos aproximadamente y secados).MATERIALES Y MÉTODOS Pipetas Cajas de petri Cinta de enmascarar Papel Kraft Horno Detergente Hipoclorito de sodio Agua destilada Luego de una previa inducción por parte del docente. Seguidamente se paso a llevar el material al horno donde se mantuvo a una temperatura de 180ºC durante una hora. por otro lado las pipetas se envolvieron con una tira de papel de tres centímetros de ancho y se cubrieron en forma de espiral. se procedió a cubrir pipetas y cajas de petri con papel Kraft (estos materiales previamente habían sido lavados con una solución de detergente. Nota: La parte correspondiente a esterilización con calor húmedo no se realizó. el cual presentó la forma correcta para el empacado del los utensilios de trabajo. Asimismo un dibujo del horno donde se realizó la esterilización en seco. El material se guardó para ser utilizado en la siguiente sesión. hipoclorito de sodio y agua. A continuación se muestran gráficos del empacado del material y su estado final. RESULTADOS Luego del lavado y esterilizado del material los utensilios quedaron sin presencia aparente de impurezas y no se apreciaron manchas. Las cajas de petri se empacaron cortando rectángulos de papel Kraft y cada paquete contenía 8 cajas.

industrial. . y aunque seamos la especie dominante en este planeta.). etc. los cuales forman parte importantísima de todos los sistemas vivos Para finalizar. dependeremos de los microorganismos. también los microorganismos lo hacen. salares.DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La importancia de este laboratorio no solo se basó en la observación y aprendizaje de la Esterilización y desinfección de materiales. tanto biólogos. medios muy ácidos. Gracias a estas técnicas de esterilización e desinfección. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a descubrir este mundo oculto. constituyen un excelente ejemplo de la evolución de la ciencia. como químicos y científicos en general han podido identificar. sobre todo de salud. además. profundidades marinas. A medida que evolucionamos como especie. por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar. siempre estaremos ligados. Con esto han podido obtener en todos los campos. tanto económico. nos proporcionaron todos sus descubrimientos. casquetes polares. para luego estudiar detalladamente. aguas termales. a la inmensa variedad de microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se puedan encontrar (desiertos. resultados enormemente importantes para la humanidad. hay que destacar que el descubrimiento de la esterilización aquí reseñado no es sólo un acontecimiento pasajero sino que. practicar y realizar en los laboratorios. o por no decir lo que es cierto. sino de comprender la importancia de los microorganismos y como influyen directamente en nuestras vidas. clasificar.

Es importante no utilizar en el autoclave. 2. sólidos o líquidos (caldos nutritivos). entre otros. para el calor seco la temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos horas dependiendo del material. 4. ¿A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas vegetativas? Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura que debe estar a l00·C que es lo suficiente para matar a todas las formas bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condición es la presión de 15 libras al cual se somete el microorganismo. cajas de petri. ¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas? La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras. tubos de ensayo.PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. refractario. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor seco? los cuales son de vidrio . ¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué? Deben ser materiales básicamente resistentes al calor. a excepción de las esporas. 5. materiales que se deterioran frente a altas temperaturas como los plásticos o cauchos 3. Estos materiales pueden ser pipetas. erlenmeyer. ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo? Para este caso el material pueden ser sustancias como medios de cultivo. En la esterilización con calor húmedo la temperatura es de 121 grados a 3 minutos o 15 o 20 máximo.

Generalmente los datos presión y temperatura son fijados. 7. el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar suele tardar dos veces el tiempo que aquí se menciona TEMPERATURA 170 grados C 160 grados C 150 grados C 140 grados C TIEMPO 1 horas 2 horas 2.Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la temperatura correcta. Frascos de Vidrio. .5 horas 3 horas Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o puntiagudos. 6. y el único factor que se varía es el tiempo. temperatura y presión usadas en la esterilización depende el éxito alcanzado. y otras características propias de cada material. ¿Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos? El calor seco destruye los microorganismos por efectos de oxidación. Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor húmedo? Del tiempo. no se deberán esterilizar estos objetos a una temperatura que pase 160 grados C. para que haya buena penetración de vapor en el material. Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilización dependiendo de su textura. Por ejemplo: Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilización de 250ºF (121ºC) a 15-20 PSI. porosidad. desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares. incluso las agujas. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos. Cristalería en General 20 minutos.

es económico y hay un bajo deterioro del material. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. ¿Qué tipo de esterilización es mas recomendable y por qué? La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido calentamiento y penetración. Además. esto es tóxico por niveles elevados de electrolitos y fusión de membranas. al Igual que las membranas celulares y coagulando sus proteínas del microorganismo. el vapor del agua. . 9. no deja residuos tóxicos. destruye las bacterias y esporas en poco tiempo. ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el material? Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a esterilizar. especialmente si se genera a sobrepresión. 8. 10. residuos que quedan adheridos al objeto estéril. es un eficaz transmisor de calor al Interior de la célula microbiana. con el fin de disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos. se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes). ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos? La esterilización por calor húmedo actúa en las enzimas desnaturalizándolas rápidamente.El calor seco produce desecación de la célula. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos.

debido a la baja penetración del calor. sellar de forma completa para evitar contaminación del material. entre otros y su finalidad es principalmente para tapar envases y proteger el medio de cultivo. (Lona. soportar la tracción y manipulación habitual sin producir deterioro y hacer permeable el método de esterilización deseado 13. 14. ¿Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de Kraft? ¿Por qué? Sí se puede otro tipo de envoltura. ¿Qué desventaja tiene utilizar la esterilización por calor seco en este laboratorio? Requiere mayor tiempo de esterilización. algodón. ¿Qué finalidad tiene el empacado antes de la esterilización? La finalidad es el impedir el ingreso de microorganismos al interior. . ¿Qué finalidad tienen los tapones de algodón que se colocan en los extremos de las pipetas y de los matraces Erlenmeyer? Pueden ser de corcho. 15. papel aluminio). siempre y cuando el método utilizado para envolver los paquetes garantice el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. ¿Es necesario un secado del material en el horno antes del empacado con papel kraft? ¿Por qué? No es necesario secar el material en el horno antes del empacado con papel kraft. 12.11. ya que basta con secar el material utilizando con papel adsorbente para acelerar el secado y luego se empaca el material correctamente. respecto al calor húmedo.

Editorial BLACK. 1999. Inc. John Wiley Son. Microbiology Principles and Exploration.com/c3/c3_monitoring.com/trabajos10/meste/meste. 2 edición. J. L M. Microbiología. Universidad Central de Venezuela.shtml .monografias. D: 1998.BIBLIOGRAFÍA BROCK. Facultad de Farmacia. USA.sterra .htm http://www. 1992. TH. Prentice Hall. Manual de Métodos Generales. Biología de los Microorganismos. http://education. CLAVELL. Fourth edition.

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