MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

YOHN JAIRO GUEVARA BOHÓRQUEZ NANCY LILIANA CUELLO MONTERROZA GUSTAVO ALBERTO MUÑOZ SIERRA

PRESENTADO A:

LUÍS ELIÉCER OVIEDO ZUMAQUÉ, MSC

MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VI SEMESTRE – GRUPO II MONTERÍA, 28 DE FEBRERO DE 2008

). etc. pinzas. cosméticos. tubos.MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN INTRODUCCIÓN La esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico. El acondicionamiento del material (pipetas. OBJETIVOS Aprender el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología. En el presente trabajo se verán los resultados obtenidos al aplicar procesos de esterilización. así como el proceso de la esterilización por calor seco de estos. análisis microbiológico de medicamentos. Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo. ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. alimentos. . Entre éstos podemos destacar: La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. equipos o personal. control de ambiente. placas de Petri. para lograr medios asépticos y resultados ideales.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos. etc. así como las ventajas de los procedimientos.

Existen diversos métodos de esterilización. AGENTES FÍSICOS Calor Húmedo Ej. La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. Vapor a Presión (autoclave) Seco (horno) Ej. Aire caliente Incineración Radiaciones AGENTES MECÁNICOS Filtración AGENTES QUIMICOS Gaseosos Oxido de etileno No gaseosos Peroxido de hidrogeno .MARCO TEÓRICO CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN.

Agentes mecánicos La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. fusión de membranas. o emisión y propagación de la energía a través de un medio. Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. y las radiaciones no ionizantes. como la luz ultravioleta. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.Agentes físicos El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. La radiación. Así tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de materiales termolábiles. puede ser empleada en el control de áreas cerradas. como por ejemplo materiales plásticos. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. . La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja.

Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada. Al humedecerse el material de empaque. la duración de la esterilidad de un material no está relacionada directamente con el tiempo. Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. Es importante no manipular los materiales estériles con las manos húmedas. del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. Los materiales estériles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura. . libre de polvo. Mantener el área de almacenamiento limpia. ni colocarlos sobre superficies mojadas. Es decir. La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa entre 30 y 60%. sino con factores que comprometen su exposición al medio ambiente. tales como: Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles.Agentes químicos Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas. etc. Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones. sucio e insectos. membranas.) ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL. accidental o no.

. por otro lado las pipetas se envolvieron con una tira de papel de tres centímetros de ancho y se cubrieron en forma de espiral. El material se guardó para ser utilizado en la siguiente sesión. A continuación se muestran gráficos del empacado del material y su estado final. Asimismo un dibujo del horno donde se realizó la esterilización en seco. se procedió a cubrir pipetas y cajas de petri con papel Kraft (estos materiales previamente habían sido lavados con una solución de detergente. así que solo se mencionará teóricamente. durante 30 minutos aproximadamente y secados). RESULTADOS Luego del lavado y esterilizado del material los utensilios quedaron sin presencia aparente de impurezas y no se apreciaron manchas. Seguidamente se paso a llevar el material al horno donde se mantuvo a una temperatura de 180ºC durante una hora. el cual presentó la forma correcta para el empacado del los utensilios de trabajo. Nota: La parte correspondiente a esterilización con calor húmedo no se realizó. Las cajas de petri se empacaron cortando rectángulos de papel Kraft y cada paquete contenía 8 cajas. hipoclorito de sodio y agua.MATERIALES Y MÉTODOS Pipetas Cajas de petri Cinta de enmascarar Papel Kraft Horno Detergente Hipoclorito de sodio Agua destilada Luego de una previa inducción por parte del docente.

industrial. siempre estaremos ligados. hay que destacar que el descubrimiento de la esterilización aquí reseñado no es sólo un acontecimiento pasajero sino que. sobre todo de salud. a la inmensa variedad de microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se puedan encontrar (desiertos. o por no decir lo que es cierto. y aunque seamos la especie dominante en este planeta. resultados enormemente importantes para la humanidad. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a descubrir este mundo oculto. aguas termales. como químicos y científicos en general han podido identificar. etc. profundidades marinas. también los microorganismos lo hacen. sino de comprender la importancia de los microorganismos y como influyen directamente en nuestras vidas. practicar y realizar en los laboratorios. constituyen un excelente ejemplo de la evolución de la ciencia. nos proporcionaron todos sus descubrimientos. tanto económico. casquetes polares. Con esto han podido obtener en todos los campos. salares. clasificar. por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar. los cuales forman parte importantísima de todos los sistemas vivos Para finalizar. A medida que evolucionamos como especie. . además. para luego estudiar detalladamente. medios muy ácidos. dependeremos de los microorganismos. tanto biólogos.DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La importancia de este laboratorio no solo se basó en la observación y aprendizaje de la Esterilización y desinfección de materiales. Gracias a estas técnicas de esterilización e desinfección.).

¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas? La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras. ¿A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas vegetativas? Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura que debe estar a l00·C que es lo suficiente para matar a todas las formas bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condición es la presión de 15 libras al cual se somete el microorganismo. 4. 5. refractario. En la esterilización con calor húmedo la temperatura es de 121 grados a 3 minutos o 15 o 20 máximo. Es importante no utilizar en el autoclave. sólidos o líquidos (caldos nutritivos). para el calor seco la temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos horas dependiendo del material. tubos de ensayo. 2.PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo? Para este caso el material pueden ser sustancias como medios de cultivo. Estos materiales pueden ser pipetas. entre otros. cajas de petri. materiales que se deterioran frente a altas temperaturas como los plásticos o cauchos 3. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor seco? los cuales son de vidrio . erlenmeyer. a excepción de las esporas. ¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué? Deben ser materiales básicamente resistentes al calor.

6. 7. . desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares. y el único factor que se varía es el tiempo. porosidad.5 horas 3 horas Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o puntiagudos. Cristalería en General 20 minutos. Generalmente los datos presión y temperatura son fijados. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos. Por ejemplo: Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilización de 250ºF (121ºC) a 15-20 PSI. no se deberán esterilizar estos objetos a una temperatura que pase 160 grados C. Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados. y otras características propias de cada material. Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilización dependiendo de su textura.Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la temperatura correcta. temperatura y presión usadas en la esterilización depende el éxito alcanzado. Frascos de Vidrio. incluso las agujas. ¿Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos? El calor seco destruye los microorganismos por efectos de oxidación. para que haya buena penetración de vapor en el material. el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar suele tardar dos veces el tiempo que aquí se menciona TEMPERATURA 170 grados C 160 grados C 150 grados C 140 grados C TIEMPO 1 horas 2 horas 2. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor húmedo? Del tiempo.

Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes). destruye las bacterias y esporas en poco tiempo. al Igual que las membranas celulares y coagulando sus proteínas del microorganismo. ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos? La esterilización por calor húmedo actúa en las enzimas desnaturalizándolas rápidamente. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. el vapor del agua. esto es tóxico por niveles elevados de electrolitos y fusión de membranas. . Además. especialmente si se genera a sobrepresión. 8. no deja residuos tóxicos. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. residuos que quedan adheridos al objeto estéril. ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el material? Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a esterilizar. con el fin de disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos. es un eficaz transmisor de calor al Interior de la célula microbiana. se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. ¿Qué tipo de esterilización es mas recomendable y por qué? La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido calentamiento y penetración. 9.El calor seco produce desecación de la célula. 10. es económico y hay un bajo deterioro del material.

¿Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de Kraft? ¿Por qué? Sí se puede otro tipo de envoltura. ¿Qué desventaja tiene utilizar la esterilización por calor seco en este laboratorio? Requiere mayor tiempo de esterilización. ¿Es necesario un secado del material en el horno antes del empacado con papel kraft? ¿Por qué? No es necesario secar el material en el horno antes del empacado con papel kraft. ya que basta con secar el material utilizando con papel adsorbente para acelerar el secado y luego se empaca el material correctamente. 12. 15. 14. siempre y cuando el método utilizado para envolver los paquetes garantice el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. papel aluminio). entre otros y su finalidad es principalmente para tapar envases y proteger el medio de cultivo. ¿Qué finalidad tiene el empacado antes de la esterilización? La finalidad es el impedir el ingreso de microorganismos al interior. algodón. respecto al calor húmedo. . soportar la tracción y manipulación habitual sin producir deterioro y hacer permeable el método de esterilización deseado 13.11. (Lona. ¿Qué finalidad tienen los tapones de algodón que se colocan en los extremos de las pipetas y de los matraces Erlenmeyer? Pueden ser de corcho. debido a la baja penetración del calor. sellar de forma completa para evitar contaminación del material.

1992.sterra . http://education.htm http://www. 1999.monografias. TH. Biología de los Microorganismos. CLAVELL. Microbiology Principles and Exploration. Fourth edition. Inc. Prentice Hall.shtml . Microbiología. L M. Manual de Métodos Generales.com/c3/c3_monitoring.com/trabajos10/meste/meste. J. 2 edición.BIBLIOGRAFÍA BROCK. John Wiley Son. D: 1998. Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela. Editorial BLACK. USA.

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