MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

YOHN JAIRO GUEVARA BOHÓRQUEZ NANCY LILIANA CUELLO MONTERROZA GUSTAVO ALBERTO MUÑOZ SIERRA

PRESENTADO A:

LUÍS ELIÉCER OVIEDO ZUMAQUÉ, MSC

MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VI SEMESTRE – GRUPO II MONTERÍA, 28 DE FEBRERO DE 2008

alimentos. para lograr medios asépticos y resultados ideales. En el presente trabajo se verán los resultados obtenidos al aplicar procesos de esterilización. ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. . Entre éstos podemos destacar: La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. pinzas. análisis microbiológico de medicamentos. etc.MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN INTRODUCCIÓN La esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo. cosméticos. así como las ventajas de los procedimientos. etc. tubos. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico.). placas de Petri. OBJETIVOS Aprender el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. equipos o personal. control de ambiente. así como el proceso de la esterilización por calor seco de estos. El acondicionamiento del material (pipetas.

MARCO TEÓRICO CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. Vapor a Presión (autoclave) Seco (horno) Ej. Aire caliente Incineración Radiaciones AGENTES MECÁNICOS Filtración AGENTES QUIMICOS Gaseosos Oxido de etileno No gaseosos Peroxido de hidrogeno . La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. Existen diversos métodos de esterilización. AGENTES FÍSICOS Calor Húmedo Ej.

como por ejemplo materiales plásticos. puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos. . La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. como la luz ultravioleta. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. Agentes mecánicos La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material.Agentes físicos El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. La radiación. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. y las radiaciones no ionizantes. Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. puede ser empleada en el control de áreas cerradas. Así tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de materiales termolábiles. o emisión y propagación de la energía a través de un medio. fusión de membranas.

Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones. Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. libre de polvo. Es decir. . la duración de la esterilidad de un material no está relacionada directamente con el tiempo. ni colocarlos sobre superficies mojadas. Mantener el área de almacenamiento limpia. tales como: Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles.) ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL. Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada. membranas. Al humedecerse el material de empaque. sino con factores que comprometen su exposición al medio ambiente. sucio e insectos. del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa entre 30 y 60%. Es importante no manipular los materiales estériles con las manos húmedas.Agentes químicos Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas. accidental o no. Los materiales estériles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura. etc.

A continuación se muestran gráficos del empacado del material y su estado final. por otro lado las pipetas se envolvieron con una tira de papel de tres centímetros de ancho y se cubrieron en forma de espiral. durante 30 minutos aproximadamente y secados). se procedió a cubrir pipetas y cajas de petri con papel Kraft (estos materiales previamente habían sido lavados con una solución de detergente. así que solo se mencionará teóricamente. . El material se guardó para ser utilizado en la siguiente sesión.MATERIALES Y MÉTODOS Pipetas Cajas de petri Cinta de enmascarar Papel Kraft Horno Detergente Hipoclorito de sodio Agua destilada Luego de una previa inducción por parte del docente. Asimismo un dibujo del horno donde se realizó la esterilización en seco. RESULTADOS Luego del lavado y esterilizado del material los utensilios quedaron sin presencia aparente de impurezas y no se apreciaron manchas. el cual presentó la forma correcta para el empacado del los utensilios de trabajo. hipoclorito de sodio y agua. Las cajas de petri se empacaron cortando rectángulos de papel Kraft y cada paquete contenía 8 cajas. Seguidamente se paso a llevar el material al horno donde se mantuvo a una temperatura de 180ºC durante una hora. Nota: La parte correspondiente a esterilización con calor húmedo no se realizó.

medios muy ácidos. clasificar. Gracias a estas técnicas de esterilización e desinfección.DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La importancia de este laboratorio no solo se basó en la observación y aprendizaje de la Esterilización y desinfección de materiales. para luego estudiar detalladamente. .). aguas termales. practicar y realizar en los laboratorios. profundidades marinas. etc. A medida que evolucionamos como especie. casquetes polares. como químicos y científicos en general han podido identificar. los cuales forman parte importantísima de todos los sistemas vivos Para finalizar. tanto económico. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a descubrir este mundo oculto. a la inmensa variedad de microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se puedan encontrar (desiertos. nos proporcionaron todos sus descubrimientos. por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar. Con esto han podido obtener en todos los campos. tanto biólogos. además. sobre todo de salud. salares. también los microorganismos lo hacen. o por no decir lo que es cierto. hay que destacar que el descubrimiento de la esterilización aquí reseñado no es sólo un acontecimiento pasajero sino que. resultados enormemente importantes para la humanidad. siempre estaremos ligados. industrial. dependeremos de los microorganismos. y aunque seamos la especie dominante en este planeta. sino de comprender la importancia de los microorganismos y como influyen directamente en nuestras vidas. constituyen un excelente ejemplo de la evolución de la ciencia.

¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor seco? los cuales son de vidrio . entre otros. ¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué? Deben ser materiales básicamente resistentes al calor. a excepción de las esporas. Estos materiales pueden ser pipetas. 2. tubos de ensayo. En la esterilización con calor húmedo la temperatura es de 121 grados a 3 minutos o 15 o 20 máximo. 5. sólidos o líquidos (caldos nutritivos). ¿A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas vegetativas? Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura que debe estar a l00·C que es lo suficiente para matar a todas las formas bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condición es la presión de 15 libras al cual se somete el microorganismo. Es importante no utilizar en el autoclave. ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo? Para este caso el material pueden ser sustancias como medios de cultivo. cajas de petri. para el calor seco la temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos horas dependiendo del material. refractario.PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. 4. materiales que se deterioran frente a altas temperaturas como los plásticos o cauchos 3. ¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas? La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras. erlenmeyer.

Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilización dependiendo de su textura.Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la temperatura correcta. no se deberán esterilizar estos objetos a una temperatura que pase 160 grados C.5 horas 3 horas Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o puntiagudos. Generalmente los datos presión y temperatura son fijados. Por ejemplo: Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilización de 250ºF (121ºC) a 15-20 PSI. . el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar suele tardar dos veces el tiempo que aquí se menciona TEMPERATURA 170 grados C 160 grados C 150 grados C 140 grados C TIEMPO 1 horas 2 horas 2. desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares. porosidad. para que haya buena penetración de vapor en el material. ¿Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos? El calor seco destruye los microorganismos por efectos de oxidación. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos. y el único factor que se varía es el tiempo. 6. 7. y otras características propias de cada material. temperatura y presión usadas en la esterilización depende el éxito alcanzado. Frascos de Vidrio. Cristalería en General 20 minutos. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor húmedo? Del tiempo. incluso las agujas. Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados.

Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes). esto es tóxico por niveles elevados de electrolitos y fusión de membranas. 8. . se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. especialmente si se genera a sobrepresión. 10. es económico y hay un bajo deterioro del material. con el fin de disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos.El calor seco produce desecación de la célula. destruye las bacterias y esporas en poco tiempo. ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos? La esterilización por calor húmedo actúa en las enzimas desnaturalizándolas rápidamente. el vapor del agua. al Igual que las membranas celulares y coagulando sus proteínas del microorganismo. residuos que quedan adheridos al objeto estéril. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el material? Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a esterilizar. 9. es un eficaz transmisor de calor al Interior de la célula microbiana. ¿Qué tipo de esterilización es mas recomendable y por qué? La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido calentamiento y penetración. no deja residuos tóxicos. Además.

algodón. ya que basta con secar el material utilizando con papel adsorbente para acelerar el secado y luego se empaca el material correctamente. entre otros y su finalidad es principalmente para tapar envases y proteger el medio de cultivo. ¿Es necesario un secado del material en el horno antes del empacado con papel kraft? ¿Por qué? No es necesario secar el material en el horno antes del empacado con papel kraft. 15. papel aluminio). 12. 14. siempre y cuando el método utilizado para envolver los paquetes garantice el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. ¿Qué finalidad tienen los tapones de algodón que se colocan en los extremos de las pipetas y de los matraces Erlenmeyer? Pueden ser de corcho. debido a la baja penetración del calor. sellar de forma completa para evitar contaminación del material. soportar la tracción y manipulación habitual sin producir deterioro y hacer permeable el método de esterilización deseado 13. ¿Qué finalidad tiene el empacado antes de la esterilización? La finalidad es el impedir el ingreso de microorganismos al interior. ¿Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de Kraft? ¿Por qué? Sí se puede otro tipo de envoltura. ¿Qué desventaja tiene utilizar la esterilización por calor seco en este laboratorio? Requiere mayor tiempo de esterilización.11. . (Lona. respecto al calor húmedo.

J. L M. CLAVELL. Biología de los Microorganismos. Fourth edition.BIBLIOGRAFÍA BROCK.shtml . 1999. 1992. Microbiology Principles and Exploration. 2 edición. Editorial BLACK. Facultad de Farmacia.com/trabajos10/meste/meste. Universidad Central de Venezuela. Microbiología.htm http://www. http://education. TH.sterra . Manual de Métodos Generales. John Wiley Son. Prentice Hall. USA. D: 1998. Inc.com/c3/c3_monitoring.monografias.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful