MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

YOHN JAIRO GUEVARA BOHÓRQUEZ NANCY LILIANA CUELLO MONTERROZA GUSTAVO ALBERTO MUÑOZ SIERRA

PRESENTADO A:

LUÍS ELIÉCER OVIEDO ZUMAQUÉ, MSC

MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VI SEMESTRE – GRUPO II MONTERÍA, 28 DE FEBRERO DE 2008

) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. para lograr medios asépticos y resultados ideales. . ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. análisis microbiológico de medicamentos. etc. pinzas. OBJETIVOS Aprender el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos. Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo. etc. Entre éstos podemos destacar: La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes.MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN INTRODUCCIÓN La esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. control de ambiente. En el presente trabajo se verán los resultados obtenidos al aplicar procesos de esterilización. placas de Petri. así como el proceso de la esterilización por calor seco de estos. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico. tubos. El acondicionamiento del material (pipetas.). así como las ventajas de los procedimientos. alimentos. cosméticos. equipos o personal.

Existen diversos métodos de esterilización. Aire caliente Incineración Radiaciones AGENTES MECÁNICOS Filtración AGENTES QUIMICOS Gaseosos Oxido de etileno No gaseosos Peroxido de hidrogeno .MARCO TEÓRICO CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. AGENTES FÍSICOS Calor Húmedo Ej. Vapor a Presión (autoclave) Seco (horno) Ej. La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar.

La radiación. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Agentes mecánicos La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material.Agentes físicos El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. fusión de membranas. Así tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de materiales termolábiles. y las radiaciones no ionizantes. Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. como por ejemplo materiales plásticos. o emisión y propagación de la energía a través de un medio. . como la luz ultravioleta. puede ser empleada en el control de áreas cerradas. puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos.

tales como: Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles. La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa entre 30 y 60%. Al humedecerse el material de empaque. libre de polvo. sucio e insectos. Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada.Agentes químicos Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas. Es importante no manipular los materiales estériles con las manos húmedas. accidental o no. membranas. Los materiales estériles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura. Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. ni colocarlos sobre superficies mojadas. Mantener el área de almacenamiento limpia. Es decir.) ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL. sino con factores que comprometen su exposición al medio ambiente. Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones. la duración de la esterilidad de un material no está relacionada directamente con el tiempo. etc. del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. .

así que solo se mencionará teóricamente. Asimismo un dibujo del horno donde se realizó la esterilización en seco. . RESULTADOS Luego del lavado y esterilizado del material los utensilios quedaron sin presencia aparente de impurezas y no se apreciaron manchas. por otro lado las pipetas se envolvieron con una tira de papel de tres centímetros de ancho y se cubrieron en forma de espiral. Seguidamente se paso a llevar el material al horno donde se mantuvo a una temperatura de 180ºC durante una hora. durante 30 minutos aproximadamente y secados). A continuación se muestran gráficos del empacado del material y su estado final. El material se guardó para ser utilizado en la siguiente sesión. hipoclorito de sodio y agua.MATERIALES Y MÉTODOS Pipetas Cajas de petri Cinta de enmascarar Papel Kraft Horno Detergente Hipoclorito de sodio Agua destilada Luego de una previa inducción por parte del docente. Las cajas de petri se empacaron cortando rectángulos de papel Kraft y cada paquete contenía 8 cajas. Nota: La parte correspondiente a esterilización con calor húmedo no se realizó. se procedió a cubrir pipetas y cajas de petri con papel Kraft (estos materiales previamente habían sido lavados con una solución de detergente. el cual presentó la forma correcta para el empacado del los utensilios de trabajo.

. y aunque seamos la especie dominante en este planeta. aguas termales. por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar. industrial. tanto económico. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a descubrir este mundo oculto. siempre estaremos ligados. tanto biólogos. medios muy ácidos. hay que destacar que el descubrimiento de la esterilización aquí reseñado no es sólo un acontecimiento pasajero sino que. los cuales forman parte importantísima de todos los sistemas vivos Para finalizar. clasificar. salares. además. para luego estudiar detalladamente. etc. practicar y realizar en los laboratorios. A medida que evolucionamos como especie. a la inmensa variedad de microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se puedan encontrar (desiertos. dependeremos de los microorganismos.). profundidades marinas. casquetes polares. Con esto han podido obtener en todos los campos. sino de comprender la importancia de los microorganismos y como influyen directamente en nuestras vidas. también los microorganismos lo hacen.DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La importancia de este laboratorio no solo se basó en la observación y aprendizaje de la Esterilización y desinfección de materiales. sobre todo de salud. constituyen un excelente ejemplo de la evolución de la ciencia. nos proporcionaron todos sus descubrimientos. o por no decir lo que es cierto. como químicos y científicos en general han podido identificar. resultados enormemente importantes para la humanidad. Gracias a estas técnicas de esterilización e desinfección.

¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué? Deben ser materiales básicamente resistentes al calor. entre otros. sólidos o líquidos (caldos nutritivos). a excepción de las esporas. 4. 2. materiales que se deterioran frente a altas temperaturas como los plásticos o cauchos 3. 5. Estos materiales pueden ser pipetas. ¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas? La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras. para el calor seco la temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos horas dependiendo del material. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor seco? los cuales son de vidrio . En la esterilización con calor húmedo la temperatura es de 121 grados a 3 minutos o 15 o 20 máximo.PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. Es importante no utilizar en el autoclave. ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo? Para este caso el material pueden ser sustancias como medios de cultivo. tubos de ensayo. refractario. erlenmeyer. ¿A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas vegetativas? Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura que debe estar a l00·C que es lo suficiente para matar a todas las formas bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condición es la presión de 15 libras al cual se somete el microorganismo. cajas de petri.

y el único factor que se varía es el tiempo. Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilización dependiendo de su textura. temperatura y presión usadas en la esterilización depende el éxito alcanzado. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor húmedo? Del tiempo. Generalmente los datos presión y temperatura son fijados. . Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados. el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar suele tardar dos veces el tiempo que aquí se menciona TEMPERATURA 170 grados C 160 grados C 150 grados C 140 grados C TIEMPO 1 horas 2 horas 2. y otras características propias de cada material. 6.Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la temperatura correcta. Frascos de Vidrio. desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares. no se deberán esterilizar estos objetos a una temperatura que pase 160 grados C. Por ejemplo: Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilización de 250ºF (121ºC) a 15-20 PSI. ¿Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos? El calor seco destruye los microorganismos por efectos de oxidación. 7. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos. Cristalería en General 20 minutos.5 horas 3 horas Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o puntiagudos. porosidad. para que haya buena penetración de vapor en el material. incluso las agujas.

no deja residuos tóxicos. destruye las bacterias y esporas en poco tiempo.El calor seco produce desecación de la célula. el vapor del agua. Además. es económico y hay un bajo deterioro del material. con el fin de disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos. 9. ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos? La esterilización por calor húmedo actúa en las enzimas desnaturalizándolas rápidamente. es un eficaz transmisor de calor al Interior de la célula microbiana. ¿Qué tipo de esterilización es mas recomendable y por qué? La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido calentamiento y penetración. 10. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. . ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el material? Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a esterilizar. se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. especialmente si se genera a sobrepresión. 8. esto es tóxico por niveles elevados de electrolitos y fusión de membranas. Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes). al Igual que las membranas celulares y coagulando sus proteínas del microorganismo. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. residuos que quedan adheridos al objeto estéril.

ya que basta con secar el material utilizando con papel adsorbente para acelerar el secado y luego se empaca el material correctamente. ¿Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de Kraft? ¿Por qué? Sí se puede otro tipo de envoltura.11. sellar de forma completa para evitar contaminación del material. soportar la tracción y manipulación habitual sin producir deterioro y hacer permeable el método de esterilización deseado 13. papel aluminio). respecto al calor húmedo. debido a la baja penetración del calor. 14. ¿Qué desventaja tiene utilizar la esterilización por calor seco en este laboratorio? Requiere mayor tiempo de esterilización. 12. siempre y cuando el método utilizado para envolver los paquetes garantice el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. ¿Qué finalidad tiene el empacado antes de la esterilización? La finalidad es el impedir el ingreso de microorganismos al interior. algodón. entre otros y su finalidad es principalmente para tapar envases y proteger el medio de cultivo. (Lona. ¿Es necesario un secado del material en el horno antes del empacado con papel kraft? ¿Por qué? No es necesario secar el material en el horno antes del empacado con papel kraft. 15. . ¿Qué finalidad tienen los tapones de algodón que se colocan en los extremos de las pipetas y de los matraces Erlenmeyer? Pueden ser de corcho.

http://education.BIBLIOGRAFÍA BROCK.com/c3/c3_monitoring. 1992. Biología de los Microorganismos. 1999.monografias. Facultad de Farmacia. Microbiology Principles and Exploration. CLAVELL. J. TH. Microbiología. L M. Editorial BLACK.htm http://www. Universidad Central de Venezuela.com/trabajos10/meste/meste. Inc. Manual de Métodos Generales. 2 edición. Fourth edition. Prentice Hall. USA. D: 1998.shtml .sterra . John Wiley Son.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful