MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 2

YOHN JAIRO GUEVARA BOHÓRQUEZ NANCY LILIANA CUELLO MONTERROZA GUSTAVO ALBERTO MUÑOZ SIERRA

PRESENTADO A:

LUÍS ELIÉCER OVIEDO ZUMAQUÉ, MSC

MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA VI SEMESTRE – GRUPO II MONTERÍA, 28 DE FEBRERO DE 2008

) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología. En el presente trabajo se verán los resultados obtenidos al aplicar procesos de esterilización. etc.MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN INTRODUCCIÓN La esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material.). placas de Petri. equipos o personal. control de ambiente. OBJETIVOS Aprender el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en microbiología. así como el proceso de la esterilización por calor seco de estos. Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo. alimentos. Entre éstos podemos destacar: La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. tubos. El acondicionamiento del material (pipetas. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacéutico. La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de microorganismos. ya que existen muchos procesos que requieren la utilización de materiales estériles. pinzas. análisis microbiológico de medicamentos. para lograr medios asépticos y resultados ideales. así como las ventajas de los procedimientos. etc. . cosméticos.

Aire caliente Incineración Radiaciones AGENTES MECÁNICOS Filtración AGENTES QUIMICOS Gaseosos Oxido de etileno No gaseosos Peroxido de hidrogeno . AGENTES FÍSICOS Calor Húmedo Ej.MARCO TEÓRICO CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. La selección del método a aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. Vapor a Presión (autoclave) Seco (horno) Ej. Existen diversos métodos de esterilización.

puede ser utilizada como agente para la eliminación de microorganismos. puede ser empleada en el control de áreas cerradas. o emisión y propagación de la energía a través de un medio. La radiación. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. como por ejemplo materiales plásticos. Agentes mecánicos La filtración permite la remoción de todos los microorganismos presentes en un líquido o un gas reteniéndolos sobre la superficie de un material. Calor seco: El calor seco produce desecación de la célula.Agentes físicos El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. fusión de membranas. como la luz ultravioleta. Así tenemos que las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la esterilización de materiales termolábiles. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. . y las radiaciones no ionizantes. La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja.

ni colocarlos sobre superficies mojadas.Agentes químicos Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas. la duración de la esterilidad de un material no está relacionada directamente con el tiempo. accidental o no. Al humedecerse el material de empaque. Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. Es decir.) ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTÉRIL. etc. . La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26ºC y la humedad relativa entre 30 y 60%. Mantener el área de almacenamiento limpia. del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. sino con factores que comprometen su exposición al medio ambiente. Una vez que un material está estéril puede mantener esta condición si está protegido en la forma apropiada. membranas. sucio e insectos. tales como: Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles. Los materiales estériles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura. Al almacenar los materiales estériles se deben tomar una serie de precauciones. Es importante no manipular los materiales estériles con las manos húmedas. libre de polvo.

Nota: La parte correspondiente a esterilización con calor húmedo no se realizó. hipoclorito de sodio y agua. RESULTADOS Luego del lavado y esterilizado del material los utensilios quedaron sin presencia aparente de impurezas y no se apreciaron manchas. así que solo se mencionará teóricamente. el cual presentó la forma correcta para el empacado del los utensilios de trabajo. se procedió a cubrir pipetas y cajas de petri con papel Kraft (estos materiales previamente habían sido lavados con una solución de detergente. por otro lado las pipetas se envolvieron con una tira de papel de tres centímetros de ancho y se cubrieron en forma de espiral. El material se guardó para ser utilizado en la siguiente sesión. A continuación se muestran gráficos del empacado del material y su estado final. .MATERIALES Y MÉTODOS Pipetas Cajas de petri Cinta de enmascarar Papel Kraft Horno Detergente Hipoclorito de sodio Agua destilada Luego de una previa inducción por parte del docente. durante 30 minutos aproximadamente y secados). Las cajas de petri se empacaron cortando rectángulos de papel Kraft y cada paquete contenía 8 cajas. Seguidamente se paso a llevar el material al horno donde se mantuvo a una temperatura de 180ºC durante una hora. Asimismo un dibujo del horno donde se realizó la esterilización en seco.

etc. industrial. tanto económico. aguas termales.). también los microorganismos lo hacen. hay que destacar que el descubrimiento de la esterilización aquí reseñado no es sólo un acontecimiento pasajero sino que. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a descubrir este mundo oculto. y aunque seamos la especie dominante en este planeta. tanto biólogos. salares. resultados enormemente importantes para la humanidad. sobre todo de salud. casquetes polares. por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar. . los cuales forman parte importantísima de todos los sistemas vivos Para finalizar. Gracias a estas técnicas de esterilización e desinfección. para luego estudiar detalladamente. dependeremos de los microorganismos. practicar y realizar en los laboratorios. Con esto han podido obtener en todos los campos. sino de comprender la importancia de los microorganismos y como influyen directamente en nuestras vidas. profundidades marinas. A medida que evolucionamos como especie. medios muy ácidos. nos proporcionaron todos sus descubrimientos. como químicos y científicos en general han podido identificar. constituyen un excelente ejemplo de la evolución de la ciencia. clasificar. siempre estaremos ligados. además. a la inmensa variedad de microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se puedan encontrar (desiertos.DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES La importancia de este laboratorio no solo se basó en la observación y aprendizaje de la Esterilización y desinfección de materiales. o por no decir lo que es cierto.

¿A que condiciones de temperatura y presión se destruyen las esporas? La condición para matar o destruir una espora es la temperatura de 121·C durante 15 minutos y la otra condición es a una presión de 15 libras. 5. entre otros. ¿Cuál material se puede esterilizar por calor seco y cual no? ¿Por qué? Deben ser materiales básicamente resistentes al calor. Es importante no utilizar en el autoclave. materiales que se deterioran frente a altas temperaturas como los plásticos o cauchos 3. 2. Estos materiales pueden ser pipetas. refractario. En la esterilización con calor húmedo la temperatura es de 121 grados a 3 minutos o 15 o 20 máximo. cajas de petri.PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS 1. 4. erlenmeyer. sólidos o líquidos (caldos nutritivos). a excepción de las esporas. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor seco? los cuales son de vidrio . ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor húmedo? Para este caso el material pueden ser sustancias como medios de cultivo. ¿A qué condiciones de temperatura y presión se destruyen todas las formas vegetativas? Una de las condiciones para destruir a una forma vegetativa es la temperatura que debe estar a l00·C que es lo suficiente para matar a todas las formas bacterianas entre 2 o 3 minutos y la segunda condición es la presión de 15 libras al cual se somete el microorganismo. para el calor seco la temperatura es mayor hasta 180 grados y el tiempo puede ser mayor una o dos horas dependiendo del material. tubos de ensayo.

y el único factor que se varía es el tiempo. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos.5 horas 3 horas Como es posible que el calor seco embote los instrumentos afilados o puntiagudos. 6. Frascos de Vidrio. Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilización dependiendo de su textura. ¿Cómo actúa la esterilización por calor seco en los microorganismos? El calor seco destruye los microorganismos por efectos de oxidación. no se deberán esterilizar estos objetos a una temperatura que pase 160 grados C. y otras características propias de cada material. Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados. ¿Cuáles son las condiciones necesarias de tiempo y temperatura para esterilizar por calor húmedo? Del tiempo. incluso las agujas. desnaturalizando las proteínas y los ácidos nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares. Por ejemplo: Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilización de 250ºF (121ºC) a 15-20 PSI. Generalmente los datos presión y temperatura son fijados. temperatura y presión usadas en la esterilización depende el éxito alcanzado. para que haya buena penetración de vapor en el material. porosidad.Se debe tener en cuenta el ciclo total que incluye calentar el horno a la temperatura correcta. Cristalería en General 20 minutos. . el mismo proceso de esterilizar y el período de enfriar suele tardar dos veces el tiempo que aquí se menciona TEMPERATURA 170 grados C 160 grados C 150 grados C 140 grados C TIEMPO 1 horas 2 horas 2. 7.

Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. con el fin de disminuir el número de formas vegetativas a niveles mínimos. el vapor del agua. es económico y hay un bajo deterioro del material. se deben principalmente a dos razones: El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua. 10. no deja residuos tóxicos. es un eficaz transmisor de calor al Interior de la célula microbiana. ¿Por qué antes de una esterilización es necesario lavar y desinfectar el material? Es necesario lavar y desinfectar los materiales para destruir y eliminar carga microbiana o gérmenes que puedan estar presentes en los materiales a esterilizar. destruye las bacterias y esporas en poco tiempo. 9. ¿Qué tipo de esterilización es mas recomendable y por qué? La esterilización más recomendable es por calor húmedo porque hay rápido calentamiento y penetración. ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos? La esterilización por calor húmedo actúa en las enzimas desnaturalizándolas rápidamente. Además. Tiene por objeto la destrucción de microorganismos mediante agentes de naturaleza química (desinfectantes). especialmente si se genera a sobrepresión. 8. .El calor seco produce desecación de la célula. El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. esto es tóxico por niveles elevados de electrolitos y fusión de membranas. al Igual que las membranas celulares y coagulando sus proteínas del microorganismo. residuos que quedan adheridos al objeto estéril.

soportar la tracción y manipulación habitual sin producir deterioro y hacer permeable el método de esterilización deseado 13. entre otros y su finalidad es principalmente para tapar envases y proteger el medio de cultivo. ¿Qué finalidad tiene el empacado antes de la esterilización? La finalidad es el impedir el ingreso de microorganismos al interior. respecto al calor húmedo.11. ya que basta con secar el material utilizando con papel adsorbente para acelerar el secado y luego se empaca el material correctamente. ¿Qué desventaja tiene utilizar la esterilización por calor seco en este laboratorio? Requiere mayor tiempo de esterilización. papel aluminio). (Lona. 15. ¿Es necesario un secado del material en el horno antes del empacado con papel kraft? ¿Por qué? No es necesario secar el material en el horno antes del empacado con papel kraft. algodón. . 14. sellar de forma completa para evitar contaminación del material. ¿Qué finalidad tienen los tapones de algodón que se colocan en los extremos de las pipetas y de los matraces Erlenmeyer? Pueden ser de corcho. debido a la baja penetración del calor. siempre y cuando el método utilizado para envolver los paquetes garantice el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. 12. ¿Puede ser utilizado otro tipo de papel que el de Kraft? ¿Por qué? Sí se puede otro tipo de envoltura.

Prentice Hall. Biología de los Microorganismos. CLAVELL.shtml . TH.monografias. Microbiología. Facultad de Farmacia. 1999. L M.BIBLIOGRAFÍA BROCK. http://education.com/c3/c3_monitoring. 1992. Microbiology Principles and Exploration. J.sterra . USA. D: 1998.htm http://www. 2 edición.com/trabajos10/meste/meste. Inc. Editorial BLACK. Manual de Métodos Generales. Universidad Central de Venezuela. Fourth edition. John Wiley Son.