República Bolivariana de Venezuela

Universidad del Zulia

Facultad de Medicina
Escuela de Bioanálisis
Cátedra de Bacteriología General

CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

Esterilización y Desinfección

Dra. Messaria Ginestre

Febrero, 2022
 Importancia del control microbiano

 Prevenir la transmisión de enfermedades infecciosas.

 Prevenir la contaminación o la proliferación de

microorganismos dañinos.

 Evitar el deterioro o destrucción de materiales por los

microorganismos.
 Control del crecimiento microbiano
Términos relacionados

 Esterilización: proceso absoluto de inactivación de todas las formas de

vida microbiana en términos de la capacidad del microorganismo para
reproducirse, incluye la destrucción de las esporas.

 Esterilizantes: son agentes que producen la inactivación total de todas

las formas de vida microbiana (pérdida irreversible de su viabilidad.

 Desinfección: proceso de destrucción de las formas vegetativas de

microorganismos patógenos. No implica la destrucción de las esporas.

 Desinfectante: sustancia química aplicada sobre objetos inanimados

capaz de inhibir o destruir las formas vegetativas de los
microorganismos, pero no necesariamente las esporas

 Antisepsia: Destrucción de las formas vegetativas de los patógenos

sobre tejidos vivos.

 Antiséptico: sustancia química de uso externo capaz de destruir o

inhibir el crecimiento de formas vegetativas de microrganismos
patógenos.
 Control del crecimiento microbiano
Términos relacionados

 Desgerminación: eliminación mecánica de la mayoría de los

microorganismos en un área limitada, como la piel alrededor de
un sitio de inyección.
 Saneamiento: tratamiento destinado a disminuir los recuentos
microbianos en utensilios hasta niveles de seguridad de salud
pública.
 Microbicida: destruyen formas vegetativas microbianas, pero no
necesariamente las formas de resistencia. Engloban los
desinfectantes y los antisépticos.
 Microbiostático: tratamientos que inhiben el crecimiento y la
multiplicación de los microorganismos.
 Agentes de control microbiano

Agentes Físicos Agentes Químicos

Calor Desinfectantes
Seco Antisépticos
Húmedo Esterilizantes gaseosos
Bajas Temperaturas Antibióticos
Congelación Conservantes de alimentos
Refrigeración
Filtración

Radiaciones

Electricidad

Presión osmótica

Ondas sónicas
Altas presiones
 Agentes Físicos: Calor

 Es el método de esterilización más utilizado.

 Es confiable, económico y fácil de controlar

 Es un proceso gradual y la cinética de muerte microbiana es

exponencial.

 Todos los microorganismos son susceptibles a la acción del

calor. Su sensibilidad  varía con la especie  y con el estado en
que se encuentren.

 En general las formas vegetativas bacterianas mueren por

calentamiento a 50-70ºC. Las endosporas, requieren mayores
temperaturas y  tiempo de exposición.

 El calor puede utilizarse de dos formas en presencia 

(esterilización por calor húmedo) o ausencia de humedad (
esterilización por calor seco..
 Agentes Físicos: Calor

Mecanismo de acción

Calor seco:
 Desnaturalización de proteínas y enzimas.
 Daño por oxidación.
 Efectos tóxicos provocados por concentraciones elevadas de
electrolitos.
 Desecación de la célula.
Calor húmedo:
 Desnaturalización y coagulación de proteínas y enzimas.
Alteración de la interacción entre bases del ADN.
Pérdida de la integridad funcional de la membrana celular
Filtración de pequeñas moléculas de origen ribosómico.
 Agentes Físicos: Calor Seco

Se utiliza para materiales sólidos estables al calor

Incineración: Quemar materiales ignífugos

(resistentes al calor) y desechos
hospitalarios

Llama directa y Flameado

Horno incinerador

Aire Caliente
(Horno Pasteur)

Los materiales se Microincinerador

esterilizan entre 170-
180ºC por 2 horas Incinerar microorganismos en
el Laboratorio
 Agentes Físicos: Calor Húmedo

Ebullición: calentamiento a 100ºC por 10 minutos, elimina las formas

vegetativas de algunos microorganismos.

Tindalización: (vapor sin presión): método de esterilización fraccionada, que

consiste en calentar el material entre 80-100ºC hasta por 60 minutos durante
tres días, con sucesivos períodos de incubación (35-37ºC). Las esporas
resistentes germinarán durante la incubación y en la siguiente exposición al
calor las células vegetativas son destruidas

Pasteurización: proceso de calentamiento que reduce el número

de gérmenes dañinos y elimina los patógenos de la leche y otros
alimentos.
Pasteurización clásica: 63ºC por 30’
Pasteurización rápida (HTST): 72ºC por 15’’
Pasteurización ultra rápida (UHT): 140ºC por 1’’
 Agentes Físicos: Calor Húmedo
Vapor a presión (Autoclave)

 El calor en forma de vapor saturado a presión es la manera más

practica de esterilizar.
 El agente esterilizante es el vapor a presión exento de aire u
otros gases, el cual hidrata las bacterias y favorece su
coagulación.
 Este sistema de esterilización permite alcanzar y mantener
durante el tiempo óptimo de exposición las condiciones de
temperatura y presión, necesarias para lograr la muerte
microbiana y la destrucción de sus esporas, por
desnaturalización y coagulación de enzimas y proteínas.
 Se utiliza un aparato denominado autoclave
 Agentes Físicos: Calor Húmedo
Vapor a presión (Autoclave)

 El Autoclave (introducido por Chamberland en 1884): Es un aparato que

permite calentar muestras por calor húmedo a temperaturas superiores a
las de ebullición del agua (sin que ésta hierva), debido a que el
tratamiento se efectúa en un compartimento cerrado saturado con vapor
de agua y a presiones superiores a la atmosférica.

 Se utiliza para la esterilización de materiales estables al calor, la

humedad y la presión.

 Método de elección por su rapidez, bajo costo, eficacia y compatibilidad

con la mayoría de los materiales.

 En el autoclave los microorganismos deben entrar en contacto directo con

el vapor.
 Agentes Físicos: Calor Húmedo
Vapor a presión (Autoclave)
 El equipamiento presenta una variedad importante de tamaños, diseño y
variante de tecnología, dependiendo del uso al que esté destinado.

 Permite esterilizar soluciones parenterales, soluciones acuosas simples,

productos biomédicos, instrumental quirúrgico, medio de cultivo, ropas,
equipos de transfusión.

 El ciclo de esterilización
más empleado en la
industria farmacéutica,
laboratorios y hospitales es:

Temperatura:121ºC
Presión: 15 psi
Tiempo: 15 minutos

http://www.afam.org.ar/textos/esterilizacion_por_vapor_de_agua_parte_uno.pdf
 Agentes Físicos:

Calor húmedo Calor seco

Ventajas
 Rápido calentamiento y  No es corrosivo para metales e
penetración instrumentos
 Destrucción de bacterias y  Permite la esterilización de
esporas en corto tiempo sustancias en polvo y de
 No deja residuos tóxicos sustancias viscosas no volátiles.
 Bajo deterioro del material
expuesto
 Económico

Desventajas
 No permite esterilizar soluciones  Requiere mayor tiempo de
que formen emulsiones con el esterilización, respecto al calor
agua húmedo, debido a su baja
 Es corrosivo para ciertos penetración
instrumentos metálicos
 Agentes Físicos: Calor

La resistencia de los microorganismos al calor varía y puede

expresarse en función de:
Punto de muerte térmica: es la temperatura mas baja
necesaria para causar la muerte de todas las bacterias en una
suspensión en 10 min.
Tiempo de muerte térmica: es el menor tiempo necesario para que
todas las bacterias de un cultivo líquido mueran a una temperatura
determinada.
Tiempo de reducción decimal (Valor D): es el tiempo, en minutos,
en el cual se destruye el 90% de una población bacteriana dada a una
determinada temperatura.
 Agentes Físicos: Bajas Temperaturas

 En general, no son útiles para la esterilización; sino más

bien, son empleadas para conservar cultivos microbianos
por períodos prolongados.
Refrigeración: entre 0-7º C tiene un efecto bacteriostático
sobre la mayoría de los microrganismos; excepto lo pscirófilos
que pueden crecer lentamente.

Congelación
 Las temperaturas de congelación tienden a inactivar a los
microorganismos, pero no necesariamente los eliminan.
 Agentes Físicos: Bajas Temperaturas

Congelación
 Provoca pérdida de agua o cristalización de agua en el interior de
la célula; como consecuencia, las sales intracelulares se
concentran y precipitan.
 Los cristales de sales y las altas concentraciones de electrolitos
provocan la desnaturalización de proteínas y daños a la
membrana; otro efecto es el daño mecánico a la pared y
membrana celular provocado por los cristales de hielo.
 Se aplica para preservar microorganismos durante largos
periodos. Los cultivos se conservan a -70° C o incluso en tanques
de nitrógeno líquido a -196° C.
 Agentes Físicos: Filtración

 Método excelente para reducir la población microbiana en

soluciones.
 Proceso físico-mecánico que consiste en el pasaje de un líquido
o de un gas a través de una membrana cuyos poros retienen
los microorganismos y otras partículas microscópicas.
 Se utiliza para esterilizar materiales termosensibles, como
algunos medios de cultivo, enzimas, vacunas y soluciones de
antibióticos.
 Agentes Físicos: Filtración

 Las partículas son retenidas por:

El tamaño de los poros del filtro.
La adsorción a las paredes del filtro.
La carga eléctrica del filtro y de los microorganismos.
 Tipos de Filtros
 Filtros de Seitz (asbesto).
 Filtros de Berkefeld (tierra de diatomeas)
 Filtros de Chamberland-Pasteur (porcelana)
 Filtros de Membrana (ésteres de celulosa). tamaño de poro entre 0.22 -
0.45 µm (bacterias). 0.01 µm (virus). De uso en los laboratorios.
 Filtros de Aire Particulado de Gran Eficiencia(HEPA) (acetato de
celulosa). Usados en espacios cerrados y en campanas de flujo
laminar.
 Agentes Físicos: Filtración

Esterilización por filtración con membrana: Se

coloca la muestra en la cámara superior y se fuerza su
paso a través de la membrana filtrante por aplicación
de vacío en la cámara inferior. Los poros de la
membrana filtrante son más pequeños que las
bacterias, de modo que estas son retenidas en el filtro.
 Agentes Físicos

Presión osmótica:

 La utilización de altas concentraciones de azúcares y sales para

conservar alimentos se basa en los efectos de la presión osmótica.

 Las altas concentraciones de estas sustancias destruyen las bacterias

por fenómeno de plasmólisis.

 Se utiliza para la conservación de carnes y frutas.

Alta presión:

 Aplicada a líquidos se transfiere de modo instantáneo y uniforme.

 Altera las estructuras moleculares de proteínas y carbohidratos,

inactivando las formas vegetativas bacterianas. Las esporas son
relativamente resistentes.

 Se aplica para la conservación de jugos de frutas.

 Agentes Físicos: Radiaciones

 Las Radiaciones electromagnéticas son efectivas para esterilizar o

reducir la carga microbiana sobre diversos materiales, superficies y
ambientes.
 Su efecto depende de la longitud de onda, de la intensidad y de la duración

 Comprenden :
Radiaciones ionizantes: Radiaciones UV, luz visible, microondas.
Radiaciones no ionizantes: rayos gamma, rayos X y haces de
electrones de alta energía.
 Agentes Físicos: Radiaciones no ionizantes

Radiaciones UV

 Las λ en el especto UV más efectivas oscilan entre 240-280

nm.

 Provocan la formación de dímeros de pirimidinas adyacente en

el ADN de las células expuestas, lo cual inhibe la replicación
correcta del ADN.

 Debido a su bajo poder de penetración los microorganismos

deben estar expuestos de forma directa a los rayos.

 Se utilizan para controlar microorganismos en el aire de

habitaciones de hospitales, quirófanos, cafeterías.

 También se emplea para la esterilización de superficies en

quirófanos y salas de envasado de medicamentos.
 Agentes Físicos: Radiaciones no ionizantes

Luz visible

 La luz solar contiene algo de radiaciones UV pero las λ

mas cortas (las más efectivas contra las bacterias) son
eliminadas por la capa de ozono.

 El efecto antimicrobiano de la luz visible se debe a la

formación de oxígeno monoatómico.

Microondas

 Tiene poco efecto sobre las bacterias

 El calor provocado por el calentamiento, sobre todo de

alimentos húmedos, puede eliminar parte de las formas
vegetativas de los patógenos.
 Agentes Físicos: Radiaciones Ionizantes

 Poseen un λ mas corta que la de las radiaciones no ionizantes (< 1nm); y

por tanto, transportan mucho mas energía y tienen mayor capacidad de
penetración.

 Los rayos gamma son emitidos por ciertos elementos radiactivos

(cobalto).

 Los haces de electrones son generados por electrones acelerados en

máquinas especiales.

 Los rayos X tienen una naturaleza semejante a la de los rayos gamma

 Provocan la ionización del agua, que forma radicales libres OH, los cuales
alteran las bases de los ácidos nucleicos, proteínas y otros componentes
celulares.
 Agentes Físicos: Radiaciones ionizantes

Ventajas de la radioesterilización

 Debido a su gran poder de penetración y efecto microbicida, los rayos

gamma resultan cómodos para usarlos en la esterilización de
materiales de considerable grosor como alimentos empacados.

 La dosis de esterilización aplicada no provocan un aumento

significativo de la temperatura. Por ser un proceso "frío" es posible
esterilizar materiales termosensibles.

 La reactividad química es relativamente baja comparada con la de los

gases.

 El efecto esterilizante es instantáneo y simultáneo en todos los

artículos.

 Se utiliza para esterilizar materiales dentales, suturas, catéteres,

jeringas plásticas, guantes de cirugía, tejidos biológicos y preparados
de origen biológico.
 Agentes Físicos:

ELECTRICIDAD

 El paso de corriente eléctrica a través de líquidos que contengan

bacterias elimina un porcentaje de éstas.

 La muerte microbiana se puede atribuir al aumento de la temperatura

y a cambios químicos como la producción de pequeñas cantidades
de cloro y ozono

 Su utilización como agente práctico para destruir microorganismos

es limitada, aunque se han diseñado equipos que se usan para
pasteurizar jugos de frutas y desinfectar agua.
 Agentes Físicos:
ONDAS SONORAS

 Las ondas supersónicas y ultrasónicas desintegran las células.

 El paso del sonido a través de un líquido produce cambios de

presión alternantes que a grandes frecuencias originan cavidades
(burbujas de gases disueltos) de unos 10 m de diámetro (fenómeno
de cavitación).

 Estas cavidades van aumentando de tamaño y terminan colapsando

violentamente, dando lugar a enormes presiones locales.

 El colapso origina desintegración celular, formación de H 2O2, ruptura

de la doble cadena de ADN y desnaturalización macromoléculas.

 Las bacterias varían en cuanto a su susceptibilidad a las vibraciones

sonoras. En general, son más sensibles las Gram-negativas que las
Gram-positivas.

 No tiene utilidad como método de esterilización o desinfección.

 Agentes Químicos

 Algunas sustancias químicas influyen negativamente sobre las

bacterias, pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes:
bacteriostático o bactericida.

 Para una misma sustancia química, la línea de demarcación entre un

efecto bactericida y uno bacteriostático depende de una serie de
factores

Aldehído y amonio
cuaternario

Desinfectantes Antisépticos Óxido de etileno

 Agentes Químicos

Factores que afectan la efectividad de un agente químico

 Concentración del agente

 Temperatura y tiempo de exposición

 pH

 Presencia de materia orgánica extraña

 Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados

con el microorganismo

 Resistencia de los microorganismos Priones

Endosporas bacterianas
Micobacterias 
Quistes de protozoarios
Forma vegetativa de protozoarios
Bacterias Gram-negativa
Esporas de hongos
Virus sin envoltura lipídica
Bacterias Gram-positiva
Virus con envoltura lipídica
 Agentes Químicos

Criterios de selección de un agente químico

 Actividad antimicrobiana.

 Solubilidad.

 Toxicidad selectiva.

 Activo en presencia de materia orgánica extraña.

 Capacidad de penetración.

 Propiedad desodorante.

 Disponible, fácil de preparar y económico.

 Agentes Químicos

Mecanismo de acción de agentes químicos

 Lesionan la membrana celular

 Dañan la integridad estructural de la membrana (la
disposición ordenada de lípidos y proteínas).
(alcoholes, fenol, hexaclorofenol y cresol)
 Alteran de la permeabilidad celular.
(detergentes catíonicos: cloruro de cetilpiridinio, cloruro de
benzalconio).
 Provocan una gran disrupción de membranas, con efectos
de lisis.
(detergentes aniónicos: (dodecilsulfato sódico (SDS),
sulfonato de alquilbenceno; timol, eugenol)
 Agentes Químicos

Mecanismo de acción de agentes químicos

 Desnaturalización de proteínas
(ácidos y bases fuertes, fenoles, ácido orgánicos: ácido benzoico y
 ácido sórbico).

  Modifican los grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos

 Alteran los centros activos de enzimas y otras proteínas.

*Inactivación enzimática por formación de mercáptidos con los

grupos -SH de la cisteína
(nitrato de plata, metales pesados: cloruro de mercurio, compuestos
orgánicos de mercurio: mertiolato).

*Inactivación enzimas por oxidación de grupos SH a S-S

(agentes oxidantes)
(halógenos: hipoclorito de sodio, tintura de yodo, povidina
yodada, peróxido de hidrógeno).
 Agentes Químicos

Mecanismo de acción de agentes químicos

  Modifican los grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos

 
 Alteran los ácidos nucleicos uniéndose a los grupos fosfatos.
(colorantes de anilina: verde de malaquita, verde brillante).

 Interfieren en la biosíntesis de proteínas y de ácidos nucleicos

intercalándose en la doble hélice del ADN.
(colorantes de acridina: acriflavina, proflavina

 Modificación irreversible de proteína y /o ácidos nucleicos por

unión al H lábil de grupos funcionales COOH, OH, SH, NH2
(agentes alquilantes: óxido de etileno, formaldehído,
glutaraldehído)
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Fenol Desinfección de material de desecho microbiológico 
Bactericida: ≥ 1,5 %;Bacteriostático: 0,02-1%
Fungicida y viricida, no esporocida
Derivados fenólicos

Cresoles (tricresoles) Antisépticos

Lysol Desinfectantes de material de desecho
Creolina microbiológico 
Difenilos halogenados Jabones, cremas de dientes y antitranspirante
Hexaclorofeno Bacteriostatico a bajas concentraciones
Irritante de la piel e inactivo en presencia de sangre
Aceites esenciales
Timol Antisépticos orales
Eugenol
Mecanismo de acción
Desnaturalización de proteínas, disrupción de la MC, alteración de la permeabilidad
celular, daños en la integridad estructural de la MC
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Alcoholes
Etanol Antisépticos y desinfectantes
Mayor efectividad en soluciones acuosas entre 50 -
70%
Eficaces sobre la mayoría de las bacterias
presentes en la piel
Isopropanol
No esporocidas
Actividad variable frente a hongos y virus

Mecanismo de acción
Desnaturalización de proteínas, daños en la integridad estructural de la MC
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos
Sustancia química Comentario
Ácidos y Álcalis fuertes Bactericidas
HCl, H2SO4 Aplicación limitada por su naturaleza
NaOH, KOH corrosiva y caústica

Ácidos orgánicos
ácido benzoico Conservantes de alimentos
ácido sórbico 
ácido cítrico
ácido acético* Antiséptico bacteriostático
ácido bórico Uso limitado debido a sus efectos irritantes
y tóxico
* Conservante de alimentos
Mecanismo de acción
Desnaturalización de proteínas
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos
Sustancia química Comentario
Metales pesados
Compuestos mercuriales
Sales inorgánicas
Desinfectante bactericida a bajas
Cloruro de mercurio
concentraciones
Cloruro mercurioso
Poco usados por alta toxicidad
Óxido de mercurio
Sales orgánicas Antisépticos de la piel y de heridas
Merthiolate Baja toxicidad
Mercurocromo Irritante
Metaphen
Sales de fenilmercurio Potentes inhibidores de bacterias y hongos
Conservante en productos farmacéuticos,
cosméticos y oftalmológicos.

Mecanismo de acción
Inactivación enzimática por formación de mercáptidos con los grupos -SH de la
cisteína
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Metales pesados
Compuestos de plata
Sales inorgánicas Antisépticos bactericida
Nitrato de plata Irritante y caústica

Coloides orgánicas Antisépticos bacteriostático

Sulfadiazina de plata Usado en oftalmología y tratamiento tópico
de quemaduras

Mecanismo de acción
Inactivación enzimática por formación de mercáptidos con los grupos -SH de
la cisteína, interfieren la síntesis de ácidos nucleicos, provocan ruptura de la
pared celular
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Agentes oxidantes
Halógenos
Yodo
Tintura de yodo Antisépticos microbicida
Yodóforos Limpieza de heridas cutáneas
Yodo-povidona (Betadine) Irritante

Mecanismo de acción
Inactivación enzimas por oxidación de grupos SH a S-S, dañan la MC,
bloquean el transporte de electrones en la cadena respiratoria
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos
Sustancia química Comentario
Agentes oxidantes
Halógenos
Cloro y sus derivados
Potabilización del agua
Cloro gaseoso comprimido
Desinfectante
en forma líquida
Inactivo en presencia de materia orgánica
Hipoclorito de sodio Potabilización del agua
Industria alimenticia para desinfectar
equipos y maquinarias
Desinfectante de uso en hogares,
hospitales, laboratorios

Peróxido de hidrógeno Desinfección de superficies inertes y

equipos quirúrgicos
Poca actividad antiséptica
Mecanismo de acción
Inactivación enzimas por oxidación de grupos SH a S-S
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Colorantes
Derivados de anilina
verde brillante Bactericidas para Gram-positivos
verde malaquita Se utilizan en la formulación de medios de
cristal violeta cultivo
fucsina básica

Derivados de acridina Bactericidas y bacteriostáticos

acriflavina Antisépticos de heridas
proflavina
tripoflavina
Mecanismo de acción
Alteran los ácidos nucleicos uniéndose a los grupos fosfatos, interfieren en
síntesis de proteínas y de ácidos nucleicos ,bloquean la síntesis de la PC
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Agentes alquilantes
Formaldehido (gas) La descontaminación de habitaciones

Formalina o Formol (sol acuosa) En solución acuosa: conservación de tejidos,

fabricación de vacunas y líquido de
embalsamiento

Óxido de etileno Esterilización gaseosa de equipos de laboratorio,

quirúrgicos, drogas, camas de hospital

Glutaraldehido Esterilización en frío de instrumental quirúrgico,

equipos de terapia respiratoria, endoscopios
Mecanismo de acción
Modificación irreversible de proteína y ácidos nucleicos por unión a H lábil de grupos
funcionales COOH, OH, SH, NH2
 Agentes Químicos
Desinfectantes y Antisépticos

Sustancia química Comentario

Agentes tensioactivos
Detergentes catiónicos
Bactericida a bajas concentraciones
Sales de amonio cuaternario
Antisépticos cutáneos, desinfección de
cloruro de cetilpiridinio
utensilios domésticos y equipos de industrias
cloruro de benzalconio
alimenticias
Detergentes aniónicos
Jabones Mas activos sobre Gram-positivos
Saponinas Antisépticos y desinfectantes poco eficaces
Sales biliares Remoción mecánica de microorganismos en
Laurilsulfato sódico la piel
Sulfonato de alquilbenceno

Mecanismo de acción
Alteran de la permeabilidad celular , provocan disrupción de membranas, con efectos
de lisis.
 Agentes Químicos

EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

Técnica de dilución en tubo: Primero se realizan diferentes diluciones del

agente químico. El mismo volumen de cada dilución se dispensa en tubos
estériles. A cada tubo se le añade la misma cantidad de una suspensión
del microorganismo utilizado como prueba. A determinados intervalos de
tiempo se transfiere una alícuota de cada tubo a otro tubo que contenga
medio de cultivo. Estos tubos inoculados se incuban a la temperatura
óptima de crecimiento del microorganismo utilizado como prueba durante
24 a 48 horas. Al cabo de este tiempo se examina el crecimiento del
microorganismo mediante la aparición de turbidez en el tubo (crecimiento
+) o ausencia de turbidez (crecimiento -). Aquellos tubos que presenten
crecimiento negativo indican la dilución a la cual ese agente químico mata
al microorganismo utilizado como prueba cuando este microorganismo es
expuesto al agente químico durante ese período de tiempo.
 Agentes Químicos

EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

Técnica de la placa de agar : Se inocula una placa que contenga medio de

cultivo sólido con el microorganismo utilizado como prueba. Los agentes
químicos se coloca en la placa, bien dentro de un cilindro o impregnados en
un disco de papel. Al cabo de 24 a 48 horas se observan las zonas de
inhibición (crecimiento -) alrededor de los agentes químicos; la ausencia de
zona de inhibición del crecimiento indica que el microorgamismo de prueba
es resistente a la concentración del desinfectante utilizada.
 Agentes Químicos
EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE DESINFECTANTES
Y ANTISEPTICOS

Técnica del coeficiente fenólico: técnica utilizada para comparar el poder

desinfectante de un agente químico frente al del fenol. (i): se preparan en
volúmenes de 5 ml diferentes diluciones del desinfectante y del fenol . (ii) Cada
tubo de las dos series se inocula con 0,5 ml de un cultivo de 24 horas del
microorganismo de prueba (S. typhi o S. aureus). (iii). A los 5, 10 y 15 minutos
se recoge una alícuota de cada tubo y se inocula en otro tubo que contenga
medio de cultivo  (iv) Estos tubos se incuban durante 24 a 48 horas y se
observa el crecimiento microbiano. (v) La mayor dilución del desinfectante que
mate a los microorganismos en 10 minutos pero no en 5 minutos se divide por
la dilución mayor de fenol que dé los mismos resultados. El número obtenido es
el coeficiente fenólico de ese desinfectante.
MUCHAS GRACIAS