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Unidad 2 Biomoleculas
Unidad 2 Biomoleculas
Identificación de Biomoléculas
Todos los organismos vivos están constituidos por compuestos químicos de tamaño y masa
muy variables denominadas biomoléculas. Estas sustancias se clasifican en inorgánicas y
orgánicas, siendo el agua la sustancia inorgánica más importante para la vida, pues la
inmensa mayoría de las reacciones bioquímicas se desarrollan en medio acuoso. Una
pequeña fracción en masa corresponde a gases, sales, ácidos y a los iones. Las
biomoléculas orgánicas como las proteínas, lípidos, carbohidratos y ácidos nucleicos, están
involucradas prácticamente en todos los procesos y propiedades fisicoquímicas de los
seres vivos pertenecientes a los diferentes niveles de organización biológica.
2.1.1 Proteínas
Son la fuente primaria de energía para los seres vivos, constituidas fundamentalmente por
los grupos funcionales hidroxilo y carbonilo. De acuerdo con la naturaleza química, los
azúcares más simples, de acuerdo al número de monómeros que los conforman, son los
monosacáridos como la glucosa, ribosa y fructosa. De la misma forma, de las
combinaciones de dos monosacáridos se forman disacáridos como la sacarosa, maltosa,
lactosa, entre otros. Los polisacáridos pueden ser lineales o ramificados como la celulosa,
almidón y el glucógeno. La celulosa es un polímero lineal cuya función es estructural, es el
más abundante en las paredes de las células vegetales. El almidón es la molécula de
almacenamiento de glucosa (energía) en las plantas y en los animales es el glucógeno.
Estos compuestos son polímeros de glucosa que forman cadenas lineales y ramificadas, en
el almidón la cadena lineal o amilosa consta de aproximadamente 200 unidades de glucosa
unidas por enlaces glicosídicos α-1,4 y la ramificada o amilopectina resulta de la unión de
glucosas por enlaces α-1,4 y α-1,6. La estructura del glucógeno es similar a la del almidón,
pero con mayor cantidad de moléculas de glucosa y más ramificado. La celulosa es un
polímero lineal con enlaces β-1,4. En la figura 2.3 se muestran diferentes ejemplos de
carbohidratos.
2.1.3 Lípidos
En cuanto a los lípidos, la definición más general de estos compuesto se basa en la nula o
poca solubilidad que tienen en agua y la facilidad de dispersarse en solventes orgánicos no
polares, así, se pueden identificar inicialmente haciendo pruebas de solubilidad con
diferentes solventes polares y no polares. Para los triglicéridos hay una reacción particular y
es la facilidad de hidrolizarse en medio básico (saponificación).
Los iones (sales solubles en agua se ionizan) son una parte muy importante de los seres
vivos ya que participan en todos los procesos enzimáticos, estabilización de la estructura de
proteínas y en la transmisión del impulso eléctrico, entre otros. La presencia de algunos
iones se puede identificar fácilmente, como es el caso de los iones cloruros (Cl-), los cuales
reaccionan con nitrato de plata (AgNO3) formando un precipitado blanco que corresponde
al cloruro de plata (AgCl2).
Biomolécula Reactivo
Proteínas Biuret
Carbohidratos Molisch
Lípidos Prueba de solubilidad en solventes polares (agua y etanol) y apolares
(diclorometano y éter de petróleo)
Ácidos Difenilamina
Nucleicos
Iones cloruro AgNO3
2.2.3 Procedimiento
2.2.3.1 Preparación de extractos
Extracto de fríjol: Triturar en un mortero 0,5 g de fríjol verde o fríjol soya con 8 mL de
agua destilada, centrifugar por 10 minutos y depositar el sobrenadante en un tubo marcado.
B. Identificación de carbohidratos
Carbohidratos en general: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada
uno 2 mL de: extracto de papa, extracto de fríjol, extracto de hígado, leche daslactosada,
solución de almidón, de BSA, de glucosa, aceite vegetal y agua. Después de tener los tubos
debidamente marcados y con las muestras, adicione 3 gotas del reactivo de Molisch (α-
naftol) y mezcle bien, luego adicione por las paredes del tubo 1 mL de ácido sulfúrico
concentrado. No agite, observe la interface entre el H2SO4 y la muestra.
Azúcares reductores: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada uno
2 mL de leche entera, leche deslactosada, bebida hidratante, solución de glucosa, de
sacarosa, de almidón y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con las
muestras, adicione 1mL del reactivo de Benedict, mezcle bien y coloque los tubos en un
baño de agua en ebullición de 10 a 15 minutos, observe.
Polisacáridos: Coloque en una gradilla nueve tubos de ensayo y añada a cada uno 2 mL de
extracto de papa, de fríjol, de hígado, solución de sacarosa, de almidón, de glucógeno, una
mota de algodón y agua. Después de tener los tubos debidamente marcados y con las
muestras, adicione 2mL del reactivo de lugol, mezcle y observe.
C. Solubilidad de lípidos
Coloque en una gradilla cuatro tubos de ensayo márquelos y agregue los siguientes
solventes: en el número uno 3 mL de éter de petróleo, en el número dos 3mL de etanol, en
el número tres 3mL de diclorometano y en el número cuatro 3mL de agua. A continuación
adicione una pequeña porción de margarina a cada uno, agite y observe. Repita el
procedimiento agregando a los tubos 1mL de aceite vegetal y luego 1mL de ácido oleico
D. Identificación de ADN
Coloque en una gradilla cuatro tubos de ensayo y añada a cada uno 1 mL de suspensión de
levadura al 1%, extracto de hígado, solución de ADN y agua. Después de tener los tubos
debidamente marcados y con la muestra, añada 1 mL de difenilamina. Caliente en baño de
agua en la cabina de extracción sin dejarla hervir por 20 minutos (en algunas ocasiones se
requiere más tiempo), deje reposar 10 minutos en un baño hielo y observar el cambio de
coloración. (No inhale los vapores de difenilamina son muy tóxicos)
Coloque en una gradilla cinco tubos de ensayo y añada a cada uno 1 mL de suero
fisiológico, bebida hidratante, solución de glucosa, de NaCl y agua. Después de tener los
tubos debidamente marcados y con las muestras, añada 5 gotas de AgNO3. Observe.
2.3 Bibliografía
Nombre____________________________
Biomoléculas Fecha ____________________Grupo____
_______________________________________________________________________
1. Consulta
Con las respuestas de la consulta construir una introducción de dos páginas.
A. ¿Cómo se llama el enlace que une los aminoácidos para generar las proteínas y el
enlace que une a los monosacáridos para formar los polisacáridos?
B. ¿Cómo actúa y sobre que parte de la molécula proteica interviene el reactivo de
Biuret?
C. ¿Cómo actúa y sobre que parte de la molécula del carbohidrato reacciona el reactivo
de Molisch?
D. ¿Cuál es la razón a nivel estructural, para considerar a un carbohidrato como azúcar
reductor?
E. ¿En la reacción de identificación de azúcares reductores con el reactivo de
Benedict, influye el tamaño del carbohidrato y/o los tipos de enlace del mismo?
F. Escriba la reacción entre el nitrato de plata y el cloruro de sodio, identificando cuál
es el producto insoluble en agua, que se observará en la práctica de laboratorio. Así
mismo describa de manera sucinta la importancia de los iones en los seres vivos
G. ¿Qué es la albumina sérica bovina (BSA)?
Complete la siguiente tabla (debe numerarla y darle un título):
Tabla_ ________________________
MUESTRA COMPOSICIÓN GENERAL
Hígado
Leche entera
Leche deslactosada
Papa
Fríjol
Bebida hidratante
Suero fisiológico
Aceite de cocina
Margarina
2. Fichas técnicas
Ácido sulfúrico
α-naftol
Nitrato de plata
Difenilamina
*Indique la peligrosidad con el símbolo correspondiente: explosivo (E), comburente (O), inflamable (F),
extremadamente inflamable (F+), tóxico (T), muy tóxico (T+), corrosivo (C), nocivo (Xn), irritante (Xi) y/o
peligroso para el medio ambiente (N).
3. Procedimiento
3.1. Identificación de proteínas con el reactivo de Biuret
Hipótesis: ________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla___. Datos______________
Diagrama de flujo:
Tabla__. Datos_________________
Diagrama de flujo:
Tabla___. Datos___________________
Hipótesis: _______________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla___ Datos____________________________
Diagrama de flujo:
Tabla ___. Datos________________________________
Hipótesis: _____________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla_____. Datos________________________
4. Discusión de resultados.
Para elaborar la discusión de los resultados tenga en cuenta las siguientes preguntas o
sugerencias.
6. Bibliografía.
Escriba la bibliografía utilizada como apoyo para la elaboración de la discusión de los
resultados y las conclusiones. Use como modelo la bibliografía que se encuentra en el
fundamento teórico de esta práctica.
2.3. ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 2
En la tabla 2.3 se encuentran los reactivos que puede usar para resolver la pregunta
problema.
BIOMOLÉCULA REACTIVO
PROTEÍNAS Millon y ácido nítrico
POLISACÁRIDOS Lugol
AZUCARES Fehling A y Fehling B
REDUCTORES
SALES INORGÁNICAS Cloruro de Calcio
Solución de fructosa 1%
Solución de rafinosa 1%
Solución de glucógeno 1%
Solución de amilosa 1%
Lactosuero 5%
Trioleína
Carbonato de sodio 1%
Tabla 2.4 Composición en términos de moléculas orgánicas utilizadas en esta práctica
2 vasos de Trioleina 10 mL
precipitados (50 mL y
250 mL
Centrífuga Fructosa , 1% 2 mL
1 Espátula Celulosa 1% 10 mL
Sprite (gasesosa) 4 mL
Bretaña 4 mL
Papa criolla
2.3.3 PROCEDIMIENTO
2.3.3.1 Preparación de extractos
B. Reconocimiento de polisacáridos
Numere diez tubos de ensayo, añada 1 mL de cada muestra (coloque en cada tubo una
muestra diferente).Después adicione 3 gotas de lugol a cada tubo y agite el contenido de los
tubos. Seque el agitador al pasar de un tubo a otro. Observe lo que sucede y regístrelo en su
tabla de datos.
C. Reconocimiento de proteínas
Este procedimiento tiene dos ensayos. En el primero, se utilizará el ácido nítrico para
identificar la presencia de proteínas que tengan en su estructura anillos aromáticos, reacción
que se denomina xantoproteica. En el segundo se reconocerá la presencia del aminoácido
tirosina con el reactivo de Millon
Ensayo de xantoproteínas
Numere diez tubos, adicione 1 mL de cada muestra (coloque en cada tubo una muestra
diferente), agregue 6 gotas de ácido nítrico a cada tubo y agite el contenido de los tubos,
seque el agitador al pasar de un tubo a otro. Caliente los tubos durante un minuto en agua
hirviendo. Observe lo que sucede y regístrelo en su tabla de datos.
Ensayo de Millon
Numere diez tubos, tome 1 mL de cada muestra y coloque en cada tubo una muestra
diferente. Agregue 5 gotas del reactivo de Millon, agite el contenido de los tubos, seque el
agitador al pasar de un tubo a otro. Caliente los tubos durante un minuto en agua hirviendo
Observe lo que sucede y regístrelo en su tabla de datos.
Numere tres tubos, tome el valor de pH a la bebida, adicione gota el NaOH al 1% hasta
llevarlo cercano a pH 9, adicione lentamente el CaCl2 hasta la formación de un precipitado.
Observe lo que sucede y regístrelo en su tabla de datos.
2.3 BIBLIOGRAFÍA
CURTIS, Helena y BARNES, Sue. Biología. 8 ed. Buenos Aires: Médica Panamericana,
2008.
SOLOMON, Eldra; BERG, Linda y MARTIN, Diana. Biología. Buenos Aires: Médica
Panamericana, 2008.
Nombre____________________________
Biomoléculas Fecha ____________________Grupo____
_________________________________________________________________________
1. Consulta
B. Complete la siguiente tabla para todas las muestras con las que va a trabajar.
Fíjese en los modelos. Donde está escrito tipo de biomolécula indique si es
carbohidrato, lípido, proteína o sal. Sea lo más específico posible, por ejemplo,
si es un carbohidrato clasifíquelo en monosacárido, disacárido o polisacárido.
Como en algunas muestras puede haber más de una biomolécula, escríbalas
todas. Recuerde numerar y nombrar su tabla. Utilice esta información para
establecer los posibles resultados. ( Las tablas deben ir numeradas y con título)
Tabla____ _________________________
Proteínas Millon
etc.
C. Explique qué diferencias hay en composición entre el agua sin destilar,
destilada y desionizada.
2. Fichas técnicas
Acido nítrico
Hidróxido de
sodio
*
Indique la peligrosidad con el símbolo correspondiente: explosivo (E), comburente (O), inflamable (F),
extremadamente inflamable (F+), tóxico (T), muy tóxico (T+), corrosivo (C), nocivo (Xn), irritante (Xi) y/o
peligroso para el medio ambiente (N).
3. Procedimiento
Hipótesis:___________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Hipótesis:___________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla ______ __________________________________
Hipótesis:
___________________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla _ ____________________________
3.3.2 Millon
Hipótesis:___________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
Tabla_______ ______________________________________
Hipótesis:___________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Diagrama de flujo:
4. Discusión de resultados
D. ¿Por qué el lugol identifica polisacáridos? ¿El lugol sirve para identificar cualquier
polisacárido?
5. Conclusiones
6. Bibliografía