RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS

AVENDAÑO AVENDAÑO, Silvia Fernanda; BLANCO RODRIGUEZ, Jessica; ROJAS

ALVARADO, Silvia Juliana

Unidades Tecnológicas de Santander. Laboratorio de Biología. Grupo A136.

Tecnología en Recursos Ambientales. Bucaramanga Colombia

e-mail: jessicablanco151@gmail.com

02 abril 2019

RESUMEN

En el presente laboratorio se realizó la identificación cualitativa de carbohidratos,

lípidos y proteínas en leche entera y almendras. Mediante pruebas químicas de tipo
cualitativo. Las biomoléculas son las moléculas constituyentes de los seres vivos y
están formadas por los bioelementos como: carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno,
fósforo y azufre. Las biomoléculas son indispensables para el nacimiento,
crecimiento y funcionamiento de las células, tejidos, órganos y aparatos del cuerpo, y
su carencia o desbalance de estos nutrientes, provoca el deterioro de la salud y
aparición de muchas enfermedades en el cuerpo humano. Podemos destacar como
objetivo la identificación de la presencia de compuestos orgánicos como (lípidos
proteínas y carbohidratos) en diferentes sustancias alimenticias. Se utilizó métodos de
identificación que son exclusivos para biomoleculas como prueba de Benedict utilizada
para identificar azucares reductores, prueba de Lugol utilizada para identificar
almidones, prueba de Biuret utilizada para identificar proteínas y prueba de Sudam III
utilizada para identificar lípidos. Y de esta manera pudimos identificar la presencia o
ausencia de las muestras de los alimentos utilizados Las biomoleculas orgánicas
como las proteínas, lípidos, carbohidratos, están involucradas prácticamente en todos
los procesos y propiedades fisicoquímicas de los seres vivos pertenecientes a los
diferentes niveles de organización biológica.

Palabras claves: carbohidratos, lípidos, proteínas, biomoleculas, carbono, hidrogeno,

oxigeno, nitrógeno, fosforo, azufre, células, tejidos, órganos, Benedict, Lugol, Biuret,
Sudam III.

ABSTRACT

In the present laboratory the qualitative identification of carbohydrates, lipids and

proteins in whole milk and almonds was carried out. Through chemical tests of
qualitative type. Biomolecules are the constituent molecules of living beings and are
formed by the bioelements such as: carbon, hydrogen, oxygen, nitrogen, phosphorus
and sulfur. Biomolecules are essential for the birth, growth and functioning of the cells,
tissues, organs and devices of the body, and their lack or imbalance of these nutrients,
causes the deterioration of health and appearance of many diseases in the human
body. We can highlight the objective of identifying the presence of organic compounds
such as (lipids proteins and carbohydrates) in different food substances. We used
identification methods that are unique to biomolecules such as Benedict test used to
identify reducing sugars, Lugol test used to identify starches, Biuret test used to identify
proteins and Sudam III test used to identify lipids. And in this way we were able to
identify the presence or absence of the samples of the food used Organic biomolecules
such as proteins, lipids, carbohydrates, are involved in practically all processes and
physicochemical properties of living beings belonging to different levels of biological
organization .

Key words: carbohydrates, lipids, proteins, biomolecules, carbon, hydrogen, oxygen,

nitrogen, phosphorus, sulfur, cells, tissues, organs, Benedict, Lugol, Biuret, Sudam III.

INTRODUCCION

Todos los organismos vivos están constituidos por compuestos químicos de

tamaño y masa muy variables denominadas biomoléculas. Estas sustancias se
clasifican en inorgánicas y orgánicas, siendo el agua la sustancia inorgánica
más importante para la vida, pues la inmensa mayoría de las reacciones
bioquímicas se desarrollan en medio acuoso. Una pequeña fracción en masa
corresponde a gases, sales, ácidos y a los iones. Las biomoléculas orgánicas
como las proteínas, lípidos, carbohidratos y ácidos nucleicos, están
involucradas prácticamente en todos los procesos y propiedades
fisicoquímicas de los seres vivos pertenecientes a los diferentes niveles de
organización biológica.

Proteínas

Son macromoléculas de elevado peso molecular, caracterizadas por su gran

variabilidad estructural y enorme diversidad de funciones biológicas, sin
embargo, tienen en común el ser polímeros de α- L –aminoácidos
codificados genéticamente y ordenados en secuencias lineales unidas entre sí
por enlaces peptídicos. La variedad estructural se debe a las múltiples
ordenaciones o secuencias que pueden adoptar los veinte aminoácidos de los
cuales están constituidas y que naturalmente se repiten muchas veces dentro
de sus estructuras moleculares espaciales. Las proteínas de cada ser vivo,
independientemente del dominio biológico al que pertenecen, son específicas,
a punto de que una célula típica posee aproximadamente unas tres mil de ellas
diferentes. Se ha establecido que las proteínas que desempeñan la misma
función presentan ligeras variaciones estructurales (secuencia de aminoácidos)
en las distintas especies.

La organización espacial de una proteína se expresa en cuatro niveles, que se

denominan la estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.

Carbohidratos
Son la fuente primaria de energía para los seres vivos, constituidas
fundamentalmente por los grupos funcionales hidroxilo y carbonilo. De acuerdo
con la naturaleza química, los azúcares más simples, de acuerdo al número de
monómeros que los conforman, son los monosacáridos como la glucosa, ribosa
y fructosa. De la misma forma, de las combinaciones de dos a diez
monosacáridos se forman oligosacáridos como la sacarosa, maltosa, lactosa,
entre otros. Los polisacáridos tienen más de diez monosacáridos y pueden ser
lineales o ramificados como la celulosa, almidón y el glucógeno. La celulosa es
un polímero lineal cuya función es estructural, es el más abundante en las
paredes de las células vegetales. El almidón es la molécula de
almacenamiento de glucosa (energía) en las plantas y en los animales es el
glucógeno. Estos compuestos son polímeros de glucosa que forman cadenas
lineales y ramificadas, en el almidón la cadena lineal o amilasa consta de
aproximadamente 200 unidades de glucosa unidas por enlaces glucosúricos α-
1,4 y la ramificada o amilo pectina resulta de la unión de glucosas por enlaces
α-1,4 y α-1,6. La estructura del glucógeno es similar a la del almidón, pero con
mayor cantidad de moléculas de glucosa y más ramificado. La celulosa es un
polímero lineal con enlaces β-1,4.

Lípidos

Son biomoléculas orgánicas de naturaleza química diferente, a las

mencionadas anteriormente se caracterizan por ser hidrofóbicos, es decir,
insolubles en agua pero solubles en solventes orgánicos como el cloroformo,
benceno, alcohol, acetona, y otros. Esto último debido a su estructura donde
sobresalen los ácidos grasos de cadena larga (saturados o insaturados) y el
glicerol. Las grasas insaturadas son líquidas (aceites) y se encuentran
abundantemente en los vegetales, mientras que las saturadas (mantecas) son
sólidas y están presentes en los tejidos animales. Son fuente de energía, hacen
parte de la membrana celular como responsables de la permeabilidad selectiva;
algunos lípidos complejos regulan funciones celulares y otros actúan como
moléculas de señales químicas. Los lípidos más importantes son las grasas.

Reconocimiento de biomoléculas

La identificación de las proteínas se hace con el reactivo de Biuret que

contiene cobre en solución alcalina, el cobre forma un complejo con los enlaces
peptídicos de péptidos y proteínas, de color rosado en los primeros y purpura
(morado) en las últimas.
Para reconocimiento de cualquier carbohidrato, oligosacárido, polisacárido o
monosacárido se usa la prueba de Molisch, los dos primeros previamente se
hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos , los cuáles se
convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural, que reaccionan con
α-naftol formando un producto observable como un anillo de color rosado,
violeta o morado.
En cuanto a los lípidos que contienen ácidos grasos en su estructura hay una
reacción particular para reconocerlos, la de saponificación, durante esta los
compuestos se hidrolizan en un medio básico y se obtienen las sales de los
ácidos grasos, es decir jabones, detectables por agitación.

Otros lípidos fundamentales son saponificables y tienen como núcleo

estructural el ciclo pentanoperhidrofenantreno que se identifica con la prueba
de Lieberman-Burchard en esta a una solución en cloroformo se le adiciona
anhídrido acético y ácido sulfúrico, observando una reacción coloreada que
inicia rojo y progresa a verde-azul. Inicialmente los esteroides como el
colesterol se convierte a derivados sulfato y acetato que lentamente se
someten a sulfatación en diferentes posiciones, para luego eliminar los grupos
SO3H, produciendo instauraciones en forma repetitiva y finalmente pálienos y
esteroides aromáticos.

(Díaz Canales, R. 1967)

(Gonzales, M.P, 2003)

(Brown, Theodore, 2009)

MATERIAL Y METODOLOGIA

Material biológico

 Leche entera
 Almendras

Material de laboratorio

 1 gradilla
 10 tubos de ensayo
 1 mortero
 2 pipetas plásticas
 1 pinza para tubo
 1 triangulo
 1 aro
 1 soporte
 1 mechero
 1 capsula de porcelana

Reactivos

 Agua destilada (H2O d)

 Ácido nítrico concentrado (HNO3) 2
  Sulfato de cobre ( CuSO4) 2%
 Hidróxido de sodio (NaOH) 10%
 Reactivo de Benedict
 Reactivo de Biuret
 Reactivo de Lugol
 Sudam III

METODOLOGIA

Se rotulo de 1 a 5 los tubos de ensayo y analizar la presencia de biomoleculas del

material biológico (leche entera, almendras)

Se macero en el motero 2,0 g de la muestra de almendras con 5.0 ml de agua

destilada hasta obtener un caldo acuoso

1. Tomar 1,0 ml del caldo acuoso y adicionarlo dentro del tubo previamente
rotulado. Adicionar 1,0 ml de H2Od para identificar presencia de
carbohidratos
Adicionar 10 gotas del reactivo de Benedict.
Agitar y calentar durante 5 min en baño maría

Anotar los cambios de coloración ocurridos en la solución, ya que esto indicara

si la prueba fue positiva o negativa

2. Tomar 1,0 ml del caldo acuoso y adicionarlo dentro del tubo previamente
rotulado. Adicionar 1,0 ml de H2Od. Para identificar la presencia de almidón
Adicionar una (1) gota del reactivo de Lugol.

Agitar y anotar los cambios de coloración ocurridos en la solución, ya que esto

indicara si la prueba fue positiva o negativa.

3. Tomar 1,0 ml del caldo acuoso y adicionarlo dentro del tubo previamente
rotulado. Adicionar 1,0 ml de H2Od. Para identificar la presencia de proteínas
solubles
Adicionar 1,0 ml de NaOH 10% y agitar bien
Adicionar paulatinamente 5 gotas del reactivo de Biuret.

Agitar y anotar los cambios de coloración ocurridos en la solución, ya que esto

indicara si la prueba fue positiva o negativa.

4. Tomar 1,0 ml del caldo acuoso y adicionarlo dentro del tubo previamente
rotulado. Adicionar 1,0 ml de H2Od. Para identificar la presencia de proteínas
solubles
Adicionar 1,0 ml de HNO3 concentrado
 Agitar y anotar los cambios de coloración ocurridos en la solución, ya que esto
indicara si la prueba fue positiva o negativa.

5. Tomar 1,0 ml del caldo acuoso y adicionarlo dentro del tubo previamente
rotulado. Adicionar 1,0 ml de H2Od. Para identificar la presencia de lípidos
Adicionar 5 gotas del reactivo de Sudam III.

Agitar y anotar los cambios de coloración ocurridos en la solución, ya que esto

indicara si la prueba fue positiva o negativa.

RESULTADOS Y DISCUSION

Figura 1. Almendra macerada en el mortero

Figura 2. Tubos de ensayo para adicionar las muestras

Figura 3. Caldo acuoso de almendras adicionado con el reactivo de Benedict

Figura 4. Caldo acuoso de almendras adicionado con el reactivo de Benedict en baño

de maría

Figura 5. Caldo acuoso de almendras adicionado con el reactivo de Lugol

Figura 6. Caldo acuoso de almendras adicionado con el reactivo de Biuret

Figura 7. Muestras del caldo acuoso de las almendras después de adicionar los
reactivos

Figura 8. Muestra de la leche entera después de adicionar el reactivo de Benedict

Figura 9. Muestra de la leche entera después de adicionar el reactivo de Lugol

Figura 10. Muestra de la leche entera después de adicionar el reactivo de Biuret

Figura 11. Muestra de la leche entera después de adicionar el reactivo de HNO3
concentrado

Figura 12.Muestra de la leche entera después de adicionar el reactivo de sudam III

Figura 13. Muestras de la leche entera después de adicionar los reactivos

PRUEBA BENEDICT LUGOL BIURET HNO3 SUDAN III

/MUESTRA 1 2 3 CONCENTR 5
ADO
4
COLOR (+) COLOR (+) COLOR (+) COLOR (+) COLOR (+)
(-) (-) (-) (-) (-)
ALMENDR rojo blanco (-) violeta (+) blanco (+) rosado (+)
AS ladrillo(+)
LECHE rojo blanco (-) violeta (+) blanco (+) rosado (+)
ENTERA ladrillo(+)

Tabla 1. Determinación de la presencia (+) o ausencia (-) de carbohidratos, lípidos y

proteínas en muestras de alimentos (almendras, leche entera)
JUGO DE CAJA HIT

Figura 14. Peso en la balanza analítica la capsula de porcelana vacía.

Figura 15. Peso en la balanza analítica con 2 ml de jugo Hit

Figura 16. Muestra de jugo hit a fuego

Figura 17. Residuo de la muestra de jugo hit pesándolo en la balanza analítica

2 ml de Jugo Hit

% azúcar

Vacío M1= 48,185

Lleno M2=51,337

Residuo M3= 48,392

M2-M1

51,337-48,185= 3,152 100%

M3 48,392 - 48,185= 0,207 g

3,152 100%

0,207 X

X= 0,207* 100% = 0,207 0,065 %

= 0,065% Azúcar
Azúcar

3,152 3,152

DISCUSION

Las biomoléculas son las moléculas constituyentes de los seres vivos y están
formadas por los bioelementos como: carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo
y azufre. Las biomoléculas son indispensables para el nacimiento, crecimiento y
funcionamiento de las células, tejidos, órganos y aparatos del cuerpo, y su carencia o
desbalance de estos nutrientes, provoca el deterioro de la salud y aparición de muchas
enfermedades en el cuerpo humano.

Químicamente un carbohidrato es diferente de un lípido y de una proteína. Cada una

de estas biomoléculas tiene sus propiedades distintivas que permiten diferenciar a una
de otra. Por ejemplo, los carbohidratos tienen muchos grupos hidroxilo y carbonilo, las
lípidos son altamente hidrofóbicos y las proteínas tienen en su constitución enlaces
peptídicos que están ausentes en las otras clases de biomoléculas

CONCLUSIONES

Todos los organismos vivos realizan actividades físicas como trabajar, estudiar correr
etc. Las cuales están asociadas a funciones químicas en su organismo. La suficiente
energía y sustancias necesarias para realizar dichas actividades son sintetizadas en
algunos casos por el cuerpo y en otros casos es adquirida por medio de alimentos.
Estos compuestos químicos se denominan biomoleculas orgánicas e inorgánicas las
cuales están presentes en los seres vivos para llevar a cabo procesos importantes
como la conservación y producción de energía, construcción y mantenimiento de
tejidos, protección y sostenimiento de los órganos y el metabolismo del organismo

Las biomoleculas orgánicas como las proteínas, lípidos, carbohidratos, están

involucradas prácticamente en todos los procesos y propiedades fisicoquímicas de los
seres vivos pertenecientes a los diferentes niveles de organización biológica.

Los carbohidratos, compuestos por carbono, hidrógeno y oxígeno, solubles en agua.

Son la fuente más importante de suministro de energía en los seres vivos, se dividen
en monosacáridos (azúcares simples
20 monosacáridos forman oligosacáridos, de igual manera la unión de numerosos
monosacáridos constituyen los polisacáridos. Los Lípidos, compuestos por carbono e
hidrógeno, y en menor medida por oxígeno, insolubles en agua, una de sus principales
características. Su principal función es almacenar energía en los seres vivos, dentro
de este grupo se encuentran los triglicéridos (grasas), fosfolípidos y esteroides.

Las Proteínas, constituidas por cadenas lineales de aminoácidos (formadas por

un grupo (-NH2) y uno (-COOH)), son el tipo de biomoléculas más diversa que existe.
Sus funciones son específicas en cada organismo vivo y varían de acuerdo al tipo de
estructura que posean, por lo cual existe un gran número de proteínas dentro de una
célula.

REFERENCIAS

Díaz Canales, R. (1967). Prácticas de laboratorio de biología. México: Compañía

editorial continental recuperada de
https://archivos.csif.es/archivos/andalucia/ensenanza/revistas/csicsif/revista/pdf/Numer
o_21/ALMUDENA_MORENO_2.pdf

Gonzales, M.P (2003). Prácticas de laboratorio y de aula. Madrid: Marcea recuperada

de https://www.experimentosfaciles.com/reconocimiento-de-las-biomoleculas-en-los-
alimentos/

Brown, Theodore (2009) Química, la ciencia central. 11era edición. Pearson educación
de México S.A. recuperada de http://www.unl.edu.ar/ingreso/cursos/medicina/wp-
content/uploads/sites/8/2017/10/Quimica_09.pdf