Práctica 3

Estudio microscópico de las bacterias

Resumen.
Se realizaron distintos tipos de tinciones en la práctica de laboratorio. Las cuales
fueron tinción simple, tinción grampositiva y negativa, tinción negativa, tinción con
espora cada una con su metodología y diferente preparación.
Básicamente se repartieron por equipo 4 cajas Petri, las cuales de ahí tomamos
para preparar las muestras, posterior a esto se prosiguió a realizarlas, después
una vez ya hecho el teñido se pasó a visualizar en el microscopio, se hicieron
anotaciones como el morfotipo, disposición, color , tipo de pared.

Palabras clave. Tinción de Gram, muestra, bacilos, capsula, fijar, safranina, tinta
china, violeta cristal.

Objetivo de la práctica.

Desarrollar las técnicas microscópicas comunes para observar, teñir y medir a las
bacterias y sus estructuras.

Introducción. proteínas, los ácidos teicoicos,

lipoteicoicos y polisacáridos
Las bacterias tienen una pared
complejos. (1)
celular a excepción de algunas
(micoplasmas), la estructura de la En (G -) tienen una mayor
misma va a determinar si es una complejidad tanto desde el punto de
bacteria grampositiva o vista estructural como químico. En su
gramnegativo. estructura posee una capa delgada
de peptidoglucanos y una membrana
En la bacteria (G+) sus principales
externa la cual es exclusiva de estas
características son que poseen una
bacterias, tiene un espacio
pared celular más gruesa que consta
periplásmico, el cual contiene
de varias capas y formada
sistemas de transporte para hierro,
principalmente de peptidoglucano, el
azucares y otros metabolitos y
cual es clave para la estructura, la
diversas enzimas hidrolíticas.
replicación y supervivencia en
condiciones hostiles. Otros La membrana externa posee una hoja
componentes importantes son, externa la cual está formada por
lipopolisacárido (LPS), el cual es un
potente activador de respuestas
inmunes del huésped. Estas
diferencias son importantes para
conocer lo que se desarrollara en la
práctica. (2)
Es primordial hablar de tinciones, ya
conocemos que básicamente la
tinción consiste en la aplicación de un
tinte a la muestra con la finalidad de
su observación y esta presentara un
color específico. Los colorantes
utilizados a menudo son sales. Los
colorantes básicos consisten de
cationes teñidos con un anión
incoloro por ejemplo azul de metileno.
Ocurre lo contario en colorantes
ácidos, los cuales no tiñen a las
células bacterianas y por lo tanto
pueden utilizarse para teñir el
material de fondo a fin de
proporcionar un contraste de color un
ejemplo en la tinción negativa. (3)
Materiales.
 Encendedor.
 Asa bacteriológica.
 Lámina o portaobjetos.
 Cristal violeta.
 Safranina.
 Alcohol-acetona.
 Azul de metileno.
 Tinta china
 Verde malaquita.
 Algodón
 Solución yodada.
 Bacterias.
 Marcador.
Métodos.
1. Se tomaron bacterias de 4
cajas Petri, con su proceso de
esterilización y enfriado, cada
una se montó en el
portaobjetos.
2. Se coloca solución 0.98%
isotónica y con el asa
bacteriológica, colocar la
bacteria en solución.
3. Fijar con calor, se seca y
después se agrega el azul de
metileno, se lava y se deja
secar. Y con esto termina la
tinción simple.
4. Nuevamente lo de esterilizar el
asa y enfriar siempre se hará
que empecemos con la sig.
tinción, se ubicó el
grampositivo y negativo con un
marcador y se puso una gota
de solución en cada lado, con
el asa la bacteria y se fija con
calor.
5. Se le pone 1 min de cristal
violeta se lava, 2min de yodo
de igual forma se lava, se pone
alcohol-acetona y al final
safranina el cual es el paso
final y este después nos va
decir que tipo de bacteria es.
Con esto finaliza.
6. Después se agrega una gota
de tinta china en un lado y
luego se extiende, se le pone
una gota de solución y se fija.
7. En la tinción de espora se
procede a usar verde
malaquita- emisión de vapores
y para que esto suceda se usa
algodón con lumbre para que
el verde malaquita emita
vapores, se debe de tener
cuidado para que no se queme
la muestra.
8. Al final todas las tinciones a
excepción de la negativa y la
 simple, se utilizó el cristal de Características observadas.
violeta, alcohol-acetona, agua Capsula delgada, alrededor
y safranina, un cierto tiempo de la célula que es el
cada sustancia, luego se glucocaliz
dejaron reposar.
9. Al final se visualizaron al Todas las tinciones fueron
microscopio y se tomaron observadas en el microscopio con el
apuntes. objetivo 100x y se utilizó el aceite de
inmersión.

Resultados. Discusión.

Tinción simple. Las tinciones nos proporcionan

muchas ventajas a la hora de
clasificar a una bacteria o saber de
Morfotipo. Bacilos. qué grupo es con el solo hecho de
realizar una tinción.
Disposición. Únicos.
En el artículo presente nos habla de
las tinciones como herramienta que
Color azules
se utiliza en el laboratorio para el
diagnóstico de patologías infecciosas
Tinción de Graham. y en este punto coincido totalmente,
Tipo de gramnegativo grampositiva
con lo ya realizado en la práctica
tinción. puedo decir que el realizar este tipo
Morfotipo. Bacilos. Cocos. de tinciones nos brinda las
características de las bacterias
Disposició Pares. Racimos. (morfotipo, color, disposición, etc.).
n.
Color. Rosas. Morado. Como ya mencione lo que plantea el
autor se relaciona con lo hecho en la
Tipo de G - G+ práctica, esto se debe en gran
pared. medida, a que las tinciones nos
brindan herramientas necesarias para
la detección del microorganismo
bacteriano. (4)
Tinción de esporas.

Estudio. Esporas
únicas. Conclusión.
Localización Terminal y Las tinciones poniendo como ejemplo
. múltiple. la tinción de Gram, la cual es una
Tinción negativa prueba potente y sencilla que permite
al clínico distinguir entre 2 clases
fundamentales de bacterias,
establecer un diagnóstico inicial e
iniciar un tratamiento basándose en
las diferencias inherentes entre las
bacterias. (4)
Pero hablado de manera general y en
base a los resultados que obtuvimos
en la práctica nos permiten conocer
aspectos importantes como el
morfotipo de la bacteria, por ejemplo
si la bacteria observada al
microscopio es un bacilo, si es de
color azul, si su disposición es única
o son pares, eso fue el resultado
conocer el morfotipo de las 4
tinciones que se hicieron en el
laboratorio. La desventaja que
pudiera presentar el uso de las
tinciones es el hecho de que se tenga
que realizar de una manera adecuada
para detectar correctamente la
bacteria.

Referencias.
1.- Murray (2016) Microbiología
médica, Barcelona, España, Elvesier.
Pág. 107
2.- Murray (2016) Microbiología
médica, Barcelona, España, Elvesier.
Pág. 109
3.- Jawetz, Melnick y Adelberg.
(2016) Microbiología médica. Ciudad
de México. McGraw-Hill
Interamericana. Pág.38
4.- Lopez, Hernandez, Colin, Oretega,
Céron, Franco. (2013) Las tinciones
básicas en el laboratorio de
microbiología. Ciudad de México:
MediaGraphic.