Clase 3 – Informe 3

Tinción de ácido - alcohol resistencia

Existen bacterios que no se unen con facilidad a la de retirar el exceso de colorante; después se
coloración simple, por lo que necesitan tratamientos realiza otra tinción con colorante safranina.
distintos. Como resultado se pueden observar endosporas
de color verde en células de color rosado o rojo.
El método Ziehl-Neelsen es un ejemplo de tinción ácido -
alcohol resistencia, en el cual se usa calor y una mezcla
de fucsina y fenol, para que la fucsina penetre en las
células y produzca coloración; luego es aplicada una
solución acidoalcohólica. Las células que son ácido -
alcohol resistentes no pierden su coloración, por lo que
al ser aplicada estas mantienen su color fucsia, gracias a
la presencia de lípidos en las paredes celulares,
especialmente ácidos micólicos que provocan dicha
resistencia.

Por otro lado, las células que no son ácido - alcohol

resistentes pierden su coloración y deben ser coloreadas
con una tinción de contraste.

Tinción de endosporas

Las endosporas son células diferenciadas que tienen

extrema resistencia al calor, a sustancias químicas
agresivas y a radiación; además pueden soportar
condiciones desfavorables como temperaturas extremas
y déficit de nutrientes para sobrevivir a largos periodos
de tiempo.

Estas células son visibles al microscopio óptico en

contraste de fases o por tinción negativa; sin embargo,
son impermeables a la mayoría de los colorantes básicos,
por lo que requieren colorantes y tratamientos
especiales. Esporas:
- Terminal.
- Tinción de Schaeffer-Fulton: Las endosporas son
- Subterminal.
teñidas con colorante verde malaquita y una
- Central.
fuente de calor; como segundo paso, la
preparación debe ser lavada con agua con el fin
 Tinción de cápsula - método de Antony:

Las cápsulas de las bacterias poseen diferente afinidad

por los colorantes que otros componentes celulares por
lo que es necesario emplear métodos de coloraciones
especiales como el método de Anthony que coloreen la
célula y el fondo de ésta más no la cápsula, de manera
que por contraste sea posible apreciar la envoltura.

Observación con coloración específica.

1. Preparación fijada.
2. Preparación con tinción negativa con tinta
china.

Tinción negativa

Este método permite observar la presencia de cápsulas

alrededor de algunos bacterios. En primer lugar, la
muestra es mezclada con tinta china o colorante
nigrosina, luego se secarlo, los bacterios pueden ser
observados con mayor claridad gracias a que se perciben
de color claro sobre un fondo oscuro; esto se da porque
la tinta y el colorante no penetran en las estructura
celulares. Incluso, la célula puede ser posteriormente
teñida para mejorar la visibilidad.
 Gracias a esta tinción es posible apreciar mucho mejor
la presencia y distribución de los flagelos, así como se
logra adquirir información para su taxonomía.

Observación con coloración específica

• Preparación fijada.
• Coloreada con tinción de Anthony.

Materiales

1. Cultivo del Mo en leche descremada.

2. Hacemos el frotis del cultivo.
3. Secar al medio ambiente.
4. Cristal violeta 1%.
5. Lavar sulfato de cobre 40%. Los flagelos tienen diferentes disposiciones.
6. Lavar rápido y suave con agua destilada.
Técnica aséptica

- Técnicas que te permiten manipular muestras y

cultivos microbianos de manera segura.
- Para aislar, replicar y mantener microrganismos.

Niveles de seguridad en el lab

En alimentos → nivel B2

1. Mechero → Fuente de calentamiento que cree

una atmosfera estéril.
- Biopolímeros en el medio externo → Textura - Mechero también tiene su propia válvula de
cremosa. control.
Tinción de flagelos 2. Gas conectado a una válvula.
3. Caja de Petri.
- Adición de ácido tánico o taninos que van
engrosando el flagelo.

Los flagelos son estructuras muy delgadas (10 -30 nm de

diámetro) con forma de hilo que ayudan al movimiento
de las células. Estos solo pueden ser vistos en un
microscopio electrónico, por lo que para ser observados
mediante un microscopio óptico se debe aumentar su
grosor con mordientes como alumbre de potasio y ácido
tánico, además de realizar coloración con fucsina para el
método Gray o con pararosanilina para de método de
Leifson.