ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

CICLO : : IV
SEMESTRE ACADEMICO :2020i- II
 UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN
BAUTISTA FACULTAD DE CIENCIAS DE
LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE
MEDICINAHUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”

ACREDITADA POR SINEACE

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE
POR RIEV

PRÁCTICA: Bioseguridad, Microscopia, Coloraciones

simples, diferenciales y especiales .
DOCENTES DE LAASIGNATURA:

SAEZ FLORES GLORIA

SUYO LOAYZA BEATRIZ
HUAMAN REYES ANA
 PRÁCTICA N° 1
BIOSEGURIDAD
La bioseguridad es un conjunto de normas, medidas y protocolos que son aplicados en múltiples procedimientos realizados en investigaciones científicas y ..

Competencia :que sea capaz de reconocer los riesgos y

tomar medidas de prevención y protección

DEFINICIÓN:
La bioseguridad es un conjunto de normas, medidas y protocolos que son aplicados
frente a un riesgo para prevenir accidentes a personas, en laboratorios, áreas
hospitalarias, investigaciones científicas y medio ambiente ...
 RIESGO
• Físico: cortadura con material punzo cortante
• Químico: inhalación, contacto con sustancias químicas
• Biológico : entrar en contacto con microorganismos infecciosos
• Situación de riesgo : ………
 CONTENCIÓN O PROTECCIÓN

I.- Barreras de protección

a.- Uso de barreras físicas: mascarilla, guantes, bata o mandil, lentes
• Uso de barreras química: soluciones antiséptico,
desinfectantes
.- solución jabonosa de clorhexidina al 4%
.- Povidona yodada al 7,5%
.- Hipoclorito de sodio
- Alcohol...

Lavado de manos
II.- Inmunizaciones: (vacuna)
- Vacuna contra el Tetano
- Vacuna contra Hepatits B….
 PRÁCTICA N° 2
MICROSCOPIA:
ESTUDIO Y MANEJO
DEL MICROSCOPIO
Competencia : debe ser capaz de reconocer y comprender como
es el manejo del microscopio y ver su utilidad

EL MICROSCOPIO
Manejo
PRÁCTICA N° 3
METODOS DE COLORACIONES:
COLORACIONES SIMPLES. DIFERENCIALES
Y ESPECIALES
Competencia :capaz de conocer , organizar,
fundamentar su uso en el laboratorio
• EXAMEN EN FRESCO: utilidad

• COLORACIONES: utilidad

PASOS PREVIOS ALA COLORACIÓN

Agua estéril o solución

salina
 COLORACIONES SIMPLES
• AZUL DE METILENO
 2. Agregar una
• TINTA CHINA 1. Colocar una gota de
tinta china sobre la gota de la
lámina portaobjetos mezcla
bacteriana

FUNDAMENTO:
No son una verdadera tinción. Se
llaman así porque lo que
realmente se tiñe es el fondo
3. Cubrir la preparación
sobre el que están los
microorganismos apareciendo los
con una laminilla
microorganismos sin teñir. Se cubreobjeto
emplea para ver la cápsula de S.
pneumoniae y Cryptococcus
neoformans en LCR.
4. Observar con lente
de menor y mayor
aumento.
IMAGEN DEL HONGO Cryptococcus neoformans CON TINTA CHINA

AZUL DE
LACTOFENOL
1.- Colocar una gota del colorante
sobre la lámina portaobjetos
2.- Colocar una muestra
de un cultivo de hongo
sobre el colorante
3.- Cubrir con una laminilla
cubreobjetos
FUNDAMENTO:
Está basada en la afinidad del colorante por componentes de las
células, en este caso por las estructuras fúngicas.
-El fenol destruye la flora acompañante que juntos a los hongos
pueden crecer colonias de bacterias)
-El ácido láctico conserva las estructuras fúngicas con una una
película que las protege provocado por un cambio de gradiente
osmótico entre el interior y el exterior de dicha estructura.
4.- Observar con lente de menor
y mayor aumento
IMAGEN DEL HONGO Aspergillus sp CON AZUL DE
LACTOFENOL
 B. COLORACIONES DIFERENCIALES
• COLORACIÓN DE GRAM o GRAM DE KOPELOFF (modificado)
 Tinción de Gram
Tinción del frotis Un colorante básico que
. Previamente fijado al calor, en
contacto con las células
Paso 1 . Tiñe con cristalvioleta cargada negativament
Durante 1 minuto. s e, con
. Todas las células se tiñen reaccion
coloreándola ella
de color azul-violeta. a
s. s
. Lavar con agua

.
Paso 2 Añadir Lugol, Fija las tinciones y
.
dejar actuar 2 minutos aumenta la afinidad entre
.
Todas las célulassiguen el colorante y las células.
de color azul-violeta.
.
Lavar con agua
Cocos Gram +
. Decolorar con alcohol
acetona por 30segundos
Paso 3 . Las células Gram+
siguen de color azul-violeta.
. Las Gramnegativas
se decoloran..
. Se lava con agua
Las Bacterias Gram.
Tinción de contraste positivas posee una malla
Con safranina 2 minutos.
de peptidoglucano en su
Las células G+
parte mas externa.
Paso 4 se ven azul-violeta.
Mientras que las Gram.
negativas recubriendo una
Las G- rosas o rojas. fina capa de
peptidoglicano y
presentan una membrana
externa.
Bacilos Gram -
 Tinción Zielh - Neelsen
Manifiesta la capacidad de
resistir a la decoloración
gracias al alto contenido de
Fundamento
lípidos complejos (ácidos
micólicos) y ceras que
poseen algunos
microrganismo en su pared
celular
Procedimiento
Paso 1: Cubrir con fucsina
fenicada de Ziehl por 5 minutos
Paso2: Calentar hasta la emisión
de 3 vapores Paso 3: Lavar con
agua
Paso 4:Cubrir con decolorante
alcohol acido durante 30 segundos
Paso 5:lavar con agua Paso
6:Cubrir con azul de metileno
por 1 minuto Paso 7: lavar con
agua Paso 8: Secar y observar
al microscopio 100x
Resultado: Bacilo ácido alcohol resistente ZIEHL NEELSEN

Mycobacterium
tuberculosis
• Tiñe estructuras y formas especiales propias de los
microorganismos
 COLORACIONES ESPECIALES
• LEISHMAN
IMAGEN DE Bartonella baciliformis LEISHMAN
• VAGO
IMAGEN DE espiroquetas coloreadas con VAGO

Campylobacter sp.
• ALBERT
IMAGEN DE Gránulos de volutina coloreado con ALBERT

ALBE
RT

Corynebacterium sp
• COLORACION HISS (PARA CAPSULA)

• COLORACION WIRTZ-CONKLIN (esporas)

GRACIAS