UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

Calidad, Pertinencia y Calidez

VICERRECTORADO ACADÉMICO
DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN

NOMBRE: Robert Jiménez Espinoza

CURSO: V01
FECHA: 14/07/2018
TEMA: Tipos de tinciones y reactivos que muestran.

OBJETIVO: Investigar y conocer sobre la función de la tinción aplicadas en la

microbiología celular atreves de esta investigación para conocer su composición y
estructura.

DESARROLLO DE LA INVESTIGACION

TINCIÓNES

Las tinciones en microbiología son las primeras

herramientas que se utilizan en el laboratorio
para el diagnóstico de las enfermedades
infecciosas. Desde hace más de un siglo han
ayudado a resolver problemas de etiología
microbiana. Hay una gran variedad de tinciones,
que se han ido desarrollando para la detección de
los diferentes agentes infecciosos –en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos–. La
tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis
bacteriológico, mientras que la tinción de Wright se ocupa para el diagnóstico de
enfermedades muy particulares en el rubro de la parasitología. Hay técnicas tintoriales
específicas de gran utilidad, como la tinción de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el
diagnóstico de enfermedades crónicas como la tuberculosis o la actinomicosis, o la tinción
de azul de lactofenol, que preserva e identifica a los componentes estructurales de los
hongos. Las diferentes tinciones en el laboratorio microbiológico tienen una utilidad
fundamental para el diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples patologías de etiología
infecciosa.

TIPOS DE TINCIONES

Tipos

Simples: utilización de un solo tinte con el cual podemos evaluar solamente la morfología.

 Las tinciones simples es cuando toda la muestra se tiñe del mismo color y se utiliza un
solo colorante.

b) Compuestas o especiales: constituidas por 2 ó más tintes o reactivos y sirven para

clasificar las bacterias u observar sus características especiales.

c) Positivas: se observa teñida la célula sobre un fondo claro.

d) Negativas: El fondo se tiñe de oscuro para observar la célula o estructuras refringentes

Tinciones compuestas.

1. TINCIÓN DE GRAM

Principio: Composición de la pared celular de las bacterias, las bacterias G+ está

compuesta por varias capas de peptidoglicanos, las bacterias G- tienen una membrana
externa con un componente estructural único que son los lipopolisacáridos. Las bacterias
G+ retienen el cristal-violeta después de la decoloración y aparecen de color azul intenso
(purpura), las bacterias G- no son capaces de retener el cristal-violeta después de la
decoloración y son teñidas de rojo con safranina.

Pasos:

a. Preparar la extensión del cultivo: En un portaobjetos limpio, libre de grasa, y con un asa
bacteriológica colocar una pequeña cantidad de la colonia bacteriana. a. Muestra solida:
colocar solución salina previamente a colocar la colonia, igual en muestra semisólida. b.
Muestra liquida: colocar la colonia directamente.
b. Dejar secar al aire, luego fijar la preparación pasando la placa rápidamente por el
mechero (2 ó 3 veces) La fijación, procedimiento que permite preservar estructuras
celulares, se puede llevar a cabo con diferentes tratamientos: fijación por calor o fijación
química. La fijación por calor es la más utilizada para la observación de bacterias. Este
procedimiento consiste en pasar el portaobjetos, con la suspensión bacteriana extendida y
seca, a través de una llama de un mechero. La fijación por calor preserva la morfología
externa de los microorganismos pero no las estructuras internas. La fijación química con
agentes como etanol, formaldehído y ácido acético entre otros muchos, se utiliza para
preservar las estructuras celulares.

c. Agregar violeta cristal durante 20 a 30 segundos (Colorante primario), enjugar con agua
seguidamente.

d. Agregar yodo Gram durante 40 a 60 segundos (mordente), enjuagar con agua

seguidamente

e. Agregar alcohol acetona y enjuagar con agua inmediatamente (decoloración, disuelve

lípidos de la pared de G-) f. Agregar safranina durante 20 segundos, enjuagar con agua
seguidamente.
 2. TINCIÓN DE MOELLER (ESPORAS)

Principio: Se suspende una bacteria del genero Bacillus, evidencia capsula incolora en un
contraste morado.

Pasos:

a. Se prepara el extendido de la muestra.

b. Se deja secar y se fija con calor.

c. Se tiñe con carbol-fuschina hasta llenar por completo el portaobjetos.

d. Pase un mechero por debajo de la placa calentando hasta que vea que se emiten vapores
y sin dejar que hierva por 3 minutos. Si la placa se va secando, ir agregando más tinte hasta
cumplir el tiempo. (Se calienta el tinte para que penetre la espora que contiene dipecolinato
de calcio).

e. Se enjuaga con agua y se coloca ácido sulfúrico al 1% por 2 minutos (decolorante para
retirar el carbol-fuchina).

f. Se enjuaga con agua y se tiñe finalmente con azul de metileno por 1 minuto.

g. Dejar secar.

Las esporas permiten a las bacterias pasar a un

estado latente en condiciones ambientales
adversas. Su principal componente es Ca2+ fijado
a ácido dipicolínico. El calor después de la
tinción con carbol-fuscina con permite que rompa
la estructura que protege la espora para que así
pueda penetrar el colorante. Con el lavado de
agua se retira todo tinte que se adhirió a la bacteria, para después teñirse con azul de
metileno.

Resalta de color rojo la espora y de color azul, la bacteria.

3. TINCIÓN DE ANTHONY (CÁPSULA)

Principio: Es una tinción negativa en donde vemos la

cápsula no teñida sobre un fondo morado y se
visualiza la bacteria en el centro de la cápsula, esta
pude ser de glicoproteínas o polisacáridos.

La cápsula es una sustancia viscosa producida por

algunas especies que la sintetizan a partir de
polipéptidos, polímeros de glucosa u otro amino
azúcares que contienen nitrógeno, que después de
combinarse con el agua es segregada por todo el contorno de la pared celular como un
moco gelatinoso. Cuando la cápsula ha sido producida puede observarse en los frotis
coloreado por el método de Gram como un halo incoloro alrededor de la bacteria. Cuando
se requiere ver la cápsula con más detalle o inducir su producción se recurre a coloraciones
especiales.

Pasos:

a. Colocar leche descremada al 20% o leche litmus en un extremo del portaobjetos

b. Agregar la muestra de bacteria en la leche del borde

c. Realizar un extendido con la ayuda de otro portaobjetos

d. Se deja secar al aire (no se fija con calor ya que la leche se pega al portaobjetos)

e. Teñir por 2 minutos con violeta-cristal.

f. Lavar con sulfato de cobre.

g. Se deja secar al aire.

Las cápsulas no se tiñen normalmente con colorantes básicas como el cristal violeta o la
safranina. Tinción negativa de cápsulas en que la leche litmus se tiñe con violeta cristal
como contraste de un fondo morado con el halo transparente de la cápsula incolora.

TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA

Principio: Se trata de un procedimiento de

tinción diferencial, conocido como método de
Ziehl-Neelsen, que tiene gran relevancia por su
aplicación clínica. Permite poder distinguir
aquellos microorganismos cuya coloración
resiste la acción de alcoholes y ácidos suaves
(ácido-alcohol resistente) de otros que no
resisten la decoloración (no ácido-alcohol
resistente).

Dentro de las bacterias ácido alcohol resistentes encontramos dos importantes patógenos:
Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae, microorganismos responsables de la
tuberculosis y la lepra respectivamente. Estas bacterias pertenecen al Phyllum
Actinobacteria, un grupo grande y complejo de bacterias gram positivas, que incluye a la
Familia Mycobacteriaceae caracterizada por contener en sus paredes celulares un alto
contenido lipídico, ceras con una gran diversidad de ácidos micólicos, moléculas de 60 a 90
átomos de carbono. La presencia de estos lípidos, en la cara externa de la pared, hacen que
estas bacterias sean muy resistentes a la acción de compuestos químicos presentes en su
entorno, característica que se utiliza para aislar estos microorganismos: uno de los medios
más frecuentes es el Loewenstein-Jensen con verde malaquita que permite el crecimiento
selectivo de estos microorganismos.

Procedimiento

a. Poner sobre un portaobjetos una gota de agua y una pequeña porción de un cultivo
bacteriano con el asa de siembra estéril.
b. Hacer el frotis, formando una película homogénea sobre el portaobjetos con el asa de
siembra. Dejar secar.

c. Fijar la preparación, pasando a través de la llama del mechero el portaobjetos.

d. Cubrir con unas gotas de fuchina fenicada y aplicar calor con un hisopo de lana.

e. de vidrio, mantener 5 minutos desde el comienzo de la emisión de vapores.

f. Lavar el exceso de colorante con agua.

g. Añadir unas gotas de ácido nítrico al 33% durante 30-40 segundos. Mónica Guzmán
Facultad de Medicina de la Universidad de Panamá Noviembre 2016.

h. Lavar el exceso de colorante con agua.

i. Lavar la preparación con alcohol de 96º durante 30 segundos.

j. Lavar con abundante agua.

k. Cubrir con el colorante de contraste, azul de metileno durante 1 minuto.

l. Lavar el exceso de colorante con agua.

m. Dejar secar al aire.

n. Añadir una gota de aceite de inmersión.

o. Observar con objetivo de inmersión (100 x).

Estas bacterias son resistentes al tratamiento con alcoholes y ácidos suaves conservando el
colorante fundamental, mientras que organismos que no posean esta característica son
rápidamente decolorados y pueden teñirse con el colorante de contraste en este caso azul de
metileno.
5. TINCIÓN DE AZUL ALGODÓN DE LACTOFENOL

El examen microscópico es de gran

importancia en micología para la
observación de las diferentes especies
de hongos de interés clínico. Se deben
utilizar tinciones que logren preservar
la integridad de las estructuras
fúngicas.

La tinción de azul algodón de

lactofenol no es considerada una tinción diferencial, sin embargo, posee características
tintoriales que permiten observar cada uno de los componentes fúngicos y apreciar
fácilmente las estructuras para una adecuada identificación.

Principio: El fenol inactiva las enzimas líticas de la célula e impide que ésta se rompa; de
igual forma, destruye la flora acompañante e inactiva a la célula, quitándole el grado de
patogenicidad; además, actúa como mordiente cuando se usa en combinación con
colorantes. El ácido láctico preserva las estructuras fúngicas al provocar un cambio de
gradiente osmótico con relación al interior fúngico, lo que genera una película protectora.
El azul de algodón es un colorante ácido, que tiñe el citoplasma y la quitina presente en las
células fúngicas, mientras que el glicerol mantiene húmeda la preparación. Una vez
preparado el colorante, se debe colocar la muestra microbiológica en un portaobjetos por
medio de una impronta (proceso en el cual se coloca una impresión de la muestra sobre una
estructura utilizando una cinta adhesiva transparente).

Preparación de la impronta

a. Colocar el material necesario en la campana de seguridad tipo 2A.

b. Seleccionar las colonias para realizar las improntas.

c. Cortar segmentos de cinta adhesiva transparente aproximadamente de 1 cm.

d. Pegar los segmentos de cinta en un asa micológica.

e. Poner una gota de azul de algodón en el portaobjetos.

f. Con el lado adhesivo de la cinta, tocar la parte superior de hongo.

g. Colocar la cinta sobre la gota de azul de algodón y poner otra gota de azul de algodón.

h. Poner un cubreobjetos sobre la preparación.

i. Observar en 40x.

Las estructuras fúngicas se observarán de color azul sobre un fondo blanco.

TINCIÓN NEGATIVA

No se trata de una tinción propiamente dicha ya que no se utilizan colorantes con

cromóforos, ni se lleva a cabo ninguna reacción entre estructuras celulares y los colorantes.
En este caso el frotis se hace con una gota de una solución de nigrosina o tinta china, ambos
son productos particulados, insolubles, que formarán una película opaca a la luz. En este
tipo de tinción se prescinde de la fijación por calor, se deja secar la preparación y se
observan los microorganismos brillantes sobre un fondo oscuro.
TINCIÓN SIMPLE

La mayoría de los colorantes utilizados

en las tinciones positivas son colorantes
derivados de las anilinas, sales orgánicas
intensamente pigmentadas que proceden
del alquitrán.

Se denominan colorantes básicos si el

cromóforo (porción coloreada) de la
molécula está cargada positivamente, por
ejemplo, cristal violeta y azul de metileno
son colorantes básicos. Otros colorantes de esta categoría utilizados con frecuencia en
bacteriología son safranina, fuchina básica y verde malaquita. Bajo condiciones normales
de crecimiento, la mayor parte de los procariotas tienen un pH interno próximo a la
neutralidad (pH 7.0) y una superficie celular cargada negativamente, así los colorantes
básicos son los más eficaces. Colorantes ácidos con rojo Congo, rosa de bengala, eosina y
fuchina ácida tiene un cromóforo cargado negativamente y son utilizados para teñir
positivamente ciertos componentes como las proteínas.

Material necesario
 Cultivos bacterianos de Staphylococcus aureus y Micrococcus luteus, frasco lavador,
cristalizador, soporte y colorantes (safranina y cristal violeta), asa de siembra, aceite de
inmersión.

Procedimiento

 Poner sobre un portaobjetos una gota de agua y una pequeña alícuota de un cultivo
bacteriano con el asa de siembra estéril.

 Hacer el frotis, formando una película homogénea sobre el portaobjetos con el asa de
siembra. Dejar secar.

 Fijar la preparación, pasando a través de la llama del mechero el portaobjetos.

 Cubrir con una película de colorante (cristal violeta o safranina) durante 1 minuto.

 Lavar el exceso de colorante con agua.

 Dejar secar al aire.

 Añadir una gota de aceite de inmersión.

 Observar con objetivo de inmersión (100 x). La tinción simple nos proporciona
exclusivamente información acerca de la forma, tamaño y tipo de agrupación de los
microorganismos. Sin embargo tiene la ventaja de ser un método muy sencillo y rápido.

TINCIÓN DIFERENCIAL

Las tinciones diferenciales se utilizan

ampliamente en microbiología; consisten en la
aplicación de dos colorantes que contrastan en
su intensidad o color y un paso intermedio que
provoca una respuesta diferente entre
microorganismos distintos o entre
determinadas células dentro de una población.
La diferenciación puede ser provocada por un agente químico o físico, permitiendo
observar dos tipos de respuestas diferentes a la tinción en una misma muestra. Las dos
tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología son la tinción de gram y la tinción de
ácido-alcohol resistencia.

TINCIONES ESTRUCTURALES

Son tinciones para la observación al microscopio

óptico de determinadas estructuras de los
microorganismos, estas tinciones incluyen la
visualización de cápsulas, endosporas, flagelos
etc. Describiremos las más frecuentes en un
laboratorio de microbiología.

TINCIÓN DE CÁPSULAS

La cápsula es una estructura que rodea externamente la pared de algunos microorganismos

y constituye una barrera física que protege a la célula del ambiente externo, proporcionando
numerosas ventajas a los microorganismos que son capaces de sintetizarla, por ejemplo, en
las bacterias patógenas la cápsula permite la adhesión al hospedador o protege de la
fagocitosis, en otros casos incrementa las posibilidades de sobrevivir en condiciones de
desecación en bacterias que colonizan ambientes naturales, o bien previenen el ataque de
algunos virus, en otras ocasiones son importantes factores de virulencia en algunas especies
clínicamente relevantes como es el caso de Streptococcus pneumoniae y también
proporcionan importantes ventajas al facilitar la adhesión a superficies sólidas. El
procedimiento para la realización de la tinción de cápsulas es el mismo que se ha explicado
para la tinción negativa. Las cápsulas aparecen rodeando a las células como estructuras sin
teñir sobre un fondo oscuro.

TINCIÓN DE ESPORAS

Esta tinción permite poner de manifiesto la endospora

bacteriana, una forma de resistencia producida por
algunos géneros de bacterias gram positivas. Las
endosporas aseguran la supervivencia de estas
bacterias en condiciones desfavorables (altas
temperaturas, desecación, radiaciones ultravioletas,
gamma y agentes químicos), durante largos periodos
de tiempo.

Se conocen como endosporas bacterianas porque se

originan en el interior de los microorganismos. Varios géneros son capaces de producir
estas estructuras: Clostridium, Bacillus, Sporosarcina, entre otros. La morfología y
disposición de la endospora en el interior del microorganismos tiene valor taxonómico (Fig.
13), la mayoría presentan una disposición central o subterminal. En el caso de Clostridium
tetani , agente responsable del tétanos produce una espora terminal más grande que el
diámetro de la bacteria (espora deformante) dando lugar a una espora que se reconoce
fácilmente conocida como “palillo de tambor”.
La endospora, debido a las características de sus envueltas no se tiñe con procedimientos
habituales. El método más empleado es el de Schaeffer Fulton donde la suspensión de
microorganismos se tiñe en caliente con el colorante verde malaquita, un colorante soluble
en agua por cuya razón no se utiliza habitualmente en tinciones convencionales. El calor
modifica la permeabilidad de la endospora y permite la entrada del colorante a través de las
capas externas de la endospora. A continuación, el lavado con abundante agua produce la
decoloración de las formas vegetativas así como de los extremos de las bacterias
esporuladas, que se tiñen por último con un colorante de contraste, la safranina.

Material necesario

Cultivos de Bacillus subtilis, vaso lavador, cristalizador, soporte, portaobjetos, asa de

siembra, verde malaquita y safranina, hisopo de lana de vidrio, alcohol de 96, aceite de
inmersión.

Procedimiento

 Poner sobre un portaobjetos una gota de agua y una pequeña porción de un cultivo
bacteriano con el asa de siembra estéril.

 Hacer el frotis, formando una película homogénea sobre el portaobjetos con el asa de
siembra. Dejar secar.

 Fijar la preparación, pasando a través de la llama del mechero el portaobjetos.

 Cubrir con unas gotas de verde malaquita y aplicar calor con un hisopo de lana de vidrio,
mantener 5 minutos desde el comienzo de la emisión de vapores.

 Lavar el exceso de colorante con agua.

 Cubrir con el colorante de contraste, safranina durante 1 minuto.

 Lavar el exceso de colorante con agua.

 Dejar secar al aire.

 Añadir una gota de aceite de inmersión.

 Observar con objetivo de inmersión (100 x).

REACTIVOS Y COLORANTES

AZUL DE METILENO

El azul de metileno se usa como tintura para teñir ciertas partes del cuerpo antes o durante
la cirugía. Su uso es principalmente como antiséptico y cicatrizante interno. También se
utiliza como colorante en las tinciones para la observación en el microscopio, y para teñir
resultados en los laboratorios.

Se prepara con: Solución de hidróxido potásico al 1%......................................… ml Azul

de metileno, sol. Saturada en etanol al 95%...............................30 ml Agua
destilada...............................… ml.

SOLUCIÓN DE LUGOL

Este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antiséptico, para la

desinfección de agua en emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en
análisis médicos y de laboratorio.

Se prepara con: yodo molecular………….. 5 g yoduro potásico………….. 10 g agua

destilada…………… 85 ml.
FORMALINA O FORMOL

La formalina es una solución acuosa del formaldehido o aldehído fórmico gas, es un

líquido cristalino, incoloro y de olor picante característico, también conocido como
formalina. Se dispone en forma desinhibida e inhibida con metanol. En la actualidad se
utiliza para la conservación de muestras biológicas y cadáveres frescos, generalmente en
una dilución al 5% en agua.

Se prepara con: Agua 48 - 53% Formaldehido 37% Metanol 10 – 15%

NITRATO DE PLATA

Es una sal inorgánica, de formula AgNO3, comercialmente se vende en polvo, se trata de

un polvo blanco amarillento, pero normalmente se utiliza en disolución. Se utiliza como
antiséptico y desinfectante aplicado por vía tópica. También se utiliza como cauterizante en
hemorragias superficiales o para refrescar úlceras encallecidas.

Se prepara con: Preparación de la solución de AgNO3 aproximadamente 0.1N -Pesamos

entre 8.6 gramos de Nitrato de plata (previamente seco a 150°) con una exactitud de
decimas de miligramo. - Después transferimos la sal del Nitrato de Plata (AgNO3) a un
matraz volumétrico de 500 ml.

Disolvimos la sal con un aproximado de 200 ml de agua destilada. Luego pasamos a afore
hasta la marca con agua destilada y mezcle perfectamente. - Luego pasamos a guardar la
solución de nitrato de plata en un frasco.

CRISTAL VIOLETA: Es un grupo de compuestos químicos empleados como indicadores

de pH y colorantes. Es el ingrediente activo en el colorante de Gram, usado para clasificar
bacterias. El Cristal Violeta destruye células, y es usado en desinfectante de intensidad
moderada externo.

Se prepara con: Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g

Agua destilada.................................................................................100 ml.

ACETO CARMÍN
Es uno de los colorantes más utilizados para la tinción de los cromosomas.

Se prepara con: se prepara calentando, hasta ebullición, una disolución de carmín en polvo
en exceso, en ácido acético al 45 por IOO en agua destilada. La solución, una vez fría, se
filtra.

PINTURA DE YODO:

Es un desinfectante de uso topical muy utilizado para la aplicación en la piel antes de la

incisión quirúrgica o de inyecciones hipodérmicas. También se usa en heridas y afecciones
de la piel causadas por bacterias, hongos o parásitos. Desinfección de ombligo.
Desinflamante en el tratamiento de cojeras y otros estados similares.

Se prepara con: yodo………………. 7g yoduro de potasio…..5g alcohol 96°…………..95

ml agua destilada………5 ml

Eosina: La eosina es un alcohol sintético a base de colorante. Tiñe las células rojas de la
sangre, el material citoplásmico, es la técnica de tinción primaria utilizada en el estudio de
tejidos y células y se utiliza para observar la forma y estructura de las células.

Se prepara con: Eosina...............................................................................................0,3 g

Ácido acético glacial......................................................................0,025 ml Agua
destilada...................................................................................100 ml

SAFRANINA

La safranina se utiliza como una de las manchas en la técnica de tinción de Gram y tiñe los
núcleos de la célula en un color rojo. También se utiliza para la coloración del cartílago. El
cartílago se volverá de color amarillo cuando se tiñe con tinte de safranina.

Se prepara con: Safranina.........................................................................................0,25 g

Agua destilada..................................................................................100 m.
HEMATOXILINA

Colorea los núcleos celulares de color azul-violeta o marrón. La hematoxilina es un

colorante natural que se realiza mediante el árbol de palo de Campeche (Haematoxylum
campechianum).

Se prepara con: Hematoxilina.........................................................................................2 g

Agua destilada................................................................................. .....1.

VERDE DE MALAQUITA

Es un colorante verde activo frente a una gran variedad de parásitos externos y agentes
patógenos como hongos, bacterias, etc. Su principal aplicación es para el tratamiento contra
parásitos protozoos de agua dulce.

Se prepara con: Verde de Malaquita Oxalato (C.I. 42000)

AZUL DE ALGODÓN: Es colorante para el examen directo o para teñir hongos de un

medio de cultivo. Se prepara con: Sol. Saturada de azul algodón (azul anilina
soluble).......10 ml Glicerol..............10ml Agua...................80 ml

SUDÁN III: usado para manchar de triglicéridos en secciones congeladas, y algunos

lípidos y lipoproteínas encuadernados de la proteína en secciones de la parafina.

Se prepara con: Alcohol etílico.......................................................................100 ml Sudán

III...............................................................................hasta saturación

MAY GRUNWALD: se utiliza principalmente para el coloreo de muestras de frotis

sanguíneos o extendidos de médula ósea.

Se prepara con: Se Combina la eosina (colorante ácido) con el azul de metileno (colorante
básico)
 GIEMSA: se utiliza en el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de
muestras biológicas. Este método tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las
rickettsias localizadas dentro de las células huéspedes. La coloración de giemsa se emplea
también para teñir frotis de sangre en el examen para protozoos.

Se prepara con: azul II-eosina 3 g, azul II 0.8 g, glicerina, 250 ml, alcohol metílico: 250
ml. La preparación se seca al aire y se fija con alcohol absoluto. Se añade una gota del
colorante a 1 ml de agua y se cubre la preparación durante 10 minutos. Se lava, se seca al
aire y se monta sobre bálsamo

ALBERT: es una mezcla acidificada de colorantes azul de toluidina “o” y verde de metilo
en solución hidroalcoholica, en donde el azul de toluidina tiñe los grandulos
metacromaticos y el verde de metilo tiñe preferencialmente el citoplasma.

Se prepara con: Azul de toluidina “o”……………1.5g/l Verde Metilo……………………

2g/l Acido Acético R.A……………...10 ml Alcohol Etílico ABS……………..20 ml Agua
desmineralizada tipo II……970 ml.

LEIFSON: Es utilizada para lograr observar flagelos de bacterias. Es usada en

laboratorios.

Se prepara con: Fucsina básica en Alcohol etílico al 95%, en 1.27%; ácido tánico en agua
destilada, en 3%; Cloruro de sodio en agua destilada, 1.5% 19.

FUCSINA: Se utiliza en el teñido de tejidos, así como en la tinción para la histología y la

citología, la tinción de las bacterias y como un desinfectante. También se utiliza en sus
variaciones, como un reactivo analítico.

Se prepara con: Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen......................................................10 ml

Agua destilada.................................................................................100 ml.

LACTOFENOL: Usado para la observación de hongos. El fenol destruye la flora

acompañante, el ácido láctico conserva las estructuras fúngicas al provocar un cambio de
gradiente osmótico.
Se prepara con: Ácido láctico.....................................................................................100 ml
Fenol................................................................................................100 g
Glicerol.............................................................................................200 ml
Agua.................................................................................................100 ml.

CITRATO DE SODIO: El citrato de sodio se usa también como un anticoagulante en los

tubos usados para tomar sangre en ciertos exámenes de laboratorio que miden el tiempo de
coagulación sanguínea entre ellas el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado y el
tiempo de protrombina.

Se prepara con: Citrato de Sodio entre 90 - 100%.

AZUL BRILLANTE CRESIL: Se utiliza para la Tinción de Siderocito y reticulocitos.

Se prepara con: Agua…….……..90% Brilliant Glue…..10% 23.

FUCSINA BÁSICA: Solución colorante utilizada para el diagnóstico de la tuberculosis.

Se prepara con: fucsina básica………100% 24.

ROJO CONGO: se usa para teñir preparaciones microscópicas, especialmente en

tinciones para el citoplasma y los eritrocitos.

Se prepara con: Rojo Congo (certificado)…….. 0,2% Alcohol SD

3ª……………………..80% saturado con Cloruro Sodico

NARANJA DE ACRIDINA: es un colorante catiónico selectivo para los ácidos nucleicos

y útil para realizar determinaciones sobre el ciclo celular. Interacciona con el ADN y el
ARN por intercalación dentro de la molécula o por atracción electrostática,
respectivamente.

Se prepara con: Naranja de acridina*---6.25 g Agua destilada---------200 ml NaOH (0.1

N) --------- 50 ml.
 CONCLUSIÓN

En conclusión las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan
en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Desde hace más de un
siglo han ayudado a resolver problemas de etiología microbiana. Hay una gran variedad de
tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes
infecciosos –en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos.

GLOSARIO

ACTINOMICOSIS: es una enfermedad causada por una bacteria anaerobia, llamada

Actinomyces israelii, la cual es un organismo común, que normalmente no causa
enfermedad (no patógeno) y que se encuentra en la nariz y en la garganta.

ETIOLOGÍA: La etiología es la ciencia centrada en el estudio de la causalidad de la

enfermedad. En medicina se refiere al origen de la enfermedad.

PARASITOLOGÍA: La parasitología expedición de la biología que estudia el fenómeno

del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivos parásitos, y la relación de ellos
con sus hospedadores y el medio ambiente.

SAFRANINA: La safranina, es un colorante biológico, de contraste que se utiliza en la

Tinción de Gram para proporcionar un color violeta más intenso a las bacterias Gram+ y
tiñe de rosa a las bacterias G-; en histología y en citología.
 FUENTES BIBLIOGRÁFICAS

1. Guzmán, M. (2016). Tinciones en la microbiología. [Online] telmeds.org. Editorial

Facultad de Medicina de la Universidad de Panamá. [Accessed 14 Jul. 2018].Disponible en:

http://www.telmeds.org/wp-content/uploads/2016/11/Tinciones-en-Microbiolog%C3%ADa.pdf

2. Tortora, G. J., Funke, B. R. y Case, C. L. 2007. Introducción a la Microbiología, 9ª Ed.

Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires. Argentina. (Acceso 14 jul.2018) Disponible

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http://starcentral.mbl.edu/microscope/ portal.php?pagetitle=azorganism.

3. PAGUA, R. (2014). REACTIVOS Y COLORANTES. [Online] es.slideshare.net.

Available at: https://es.slideshare.net/rosaedithpuga/reactivos-y-colorantes [Accessed 14
Jul. 2018].Disponible en :

https://es.slideshare.net/rosaedithpuga/reactivos-y-colorantes