Joel Alberto Parra Rivera ID: 00000165678

Cuestionario y cepas
Ingeniería de Bioprocesos
Septiembre de 2020

Cuestionario
1. ¿Cómo se agrupan los diferentes métodos de conservación de
microorganismos?
Se agrupan atendiendo a los factores tiempo y características fisiológicas de la
cepa en tres grandes grupos: Métodos a largo y corto plazo y métodos
alternativos.
2. ¿Métodos garantizan al máximo la estabilidad genética?
Métodos de conservación a largo plazo. Ya que estos evitan la generaciones
sucesivas. Entre estos métodos se encuentran la congelación y la liofilización,
siendo los más aplicables en cualquier laboratorio.
3. Los cuatro factores que influyen en la viabilidad y estabilidad de las
células conservadas por congelación.
Edad de las células, velocidad en la congelación y descongelación, temperatura
de congelamiento y el empleo de agentes crioprotectores.
4. Temperatura mínima para conservar cepas por medio de congelación.
Temperaturas por debajo de –70ºC.
5. Qué son los crioprotectores y ejemplos.
Son sustancias que protegen del daño que se pueda producir en las células
microbianas en el momento de la congelación. Ejemplos el glicerol, el
dimetilsulfóxido, la leche descremada y carbohidratos (glucosa, lactosa, sacarosa,
inositol).
6. Diferencia entre congelación y liofilización.
La liofilización es la eliminación del agua de una sustancia congelada por
sublimación, mientras que la congelación requiere que el agua este congelada
para evitar el crecimiento.
7. Las tres etapas de la liofilización.
1. Precongelación del producto para asegurar una estructura completamente
congelada.
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2. Secado primario con el que se elimina la mayor parte del agua por sublimación.
3. Secado secundario con el que se remueve el agua líquida que queda ligada.
8. Factores que influyen en el éxito de la conservación por liofilización.

 Tipo de microorganismo.
 Concentración celular: concentración del orden de 10 8 -10 9 células/ml en
el caso de las bacterias y en hongos filamentosos alrededor de 10 2.
 Temperatura durante la sublimación: sin subir por encima de –50ºC.
 Grado de deshidratación alcanzado: debe de ser lo más alto posible.
 Atmósfera de oxígeno en el tubo.
 Condiciones de almacenamiento: La temperatura debe ser constante,
preferentemente a 18ºC y sin bajar de los 0ºC. Los liófilos se deben guardar
en la oscuridad.

9. Método de conservación celular preferida para enviar cepas por

mensajería.
Método de liofilización.
10. Que microorganismos no se pueden conservar por medio de la
liofilización.
Microorganismos que contengan más agua en su interior como los hongos
filamentosos, especialmente los no esporulados.
11. Menciona por qué se utiliza la conservación a corto plazo.
Cuando no se puede utilizar los métodos de elección, fundamentalmente por
carecer de los equipos necesarios, ya que la cepa microbiana no resiste los
tratamientos de la conservación por estos métodos o porque las cepas contengan
construcciones genéticas trayendo consigo que estas pierdan elementos.
12. Peor método para conseguir la estabilidad genética.
Conservación por transferencia periódica o subcultivo.
13. Cómo se retarda el envejecimiento celular en el método de conservación
de subcultivo.
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Al estar las células creciendo hay una alternancia de generaciones, y al paso del
tiempo las células que se están guardando serán descendientes lejanas de las
células iniciales y esto provoca que ya no conserven algunas de sus
características.
14. Cuál debe ser la concentración celular cuando se utiliza el método
Conservación por suspensión en agua destilada o en agua de mar estéril.
No debe ser superior a 10 4 -10 5 células/ml en el caso de bacterias.
15. Para qué tipo de m.o. se utiliza el método de conservación celular de
desecación.
Los microorganismos productores de esporas.
16. Cuantos tipos de conservación celular de desecación existen.

 Desecación en papel filtro

 Desecación en suelo, arena, silica gel, etc.
 Desecación en bolitas de arginato
 Desecación en sal gorda para halobacterias

17. Ventajas de la desecación.

Son particularmente útiles para conservar microorganismos productores de
esporas y su acción se debe a la reducción drásticamente el metabolismo de los
mismos.
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CEPAS
Nacionales
Bacillus amyloliquefaciens CDBB 978 : Cepa nacional, es un anfitrión
ampliamente utilizado para la producción de enzimas industriales.
Saccharomyces cereviciae CDBB 1982: Cepa nacional, usada en la industria
alimentaria para la producción de bebidas alcohólicas.

Internacionales
Escherichia coli ATCC 10536: Cepa internacional, utilizado por la industria
farmacéutica.
Staphylococcus aureus ATCC 6538: Cepa internacional, utilizado por la
industrial de alimentos como control de calidad.
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Referencias:
- Vehmaanperä, J. (2000). Bacillus amyloliquefaciens—Production Host for
Industrial Enzymes. In Electrotransformation of Bacteria. Springer, Berlin,
Heidelberg.
- CINVESTAV. (2020). Colección Nacional de Cepas Microbianas y Cultivos
Celulares.