UNIVERSIDAD NACIONAL DE FRONTERA

FACULTAD DE INGENIERÍA DE
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

“IDENTIFICACIÓN MESÓFILOS AEROBIOS (MA) EN

ALIMENTOS”

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 07

AUTORES:
Ponce Gonzales Mirella Paola
Tinoco Juárez Rosita Ariana
Zamorano Escalante Delia Varinia
Zapata Palacios Luz Stephanie
Zapata Zapata Maria del Carmen

ASIGNATURA:
Microbiología de los Alimentos

SULLANA - PERÚ

2020
 INDICE
Contenido Pág.
I. RESUMEN..........................................................................................................................2
II. INTRODUCCIÓN...............................................................................................................3
III. OBJETIVO......................................................................................................................4
IV. FUNDAMENTO TEÓRICO..........................................................................................5
4.1. Bases Teóricas..............................................................................................................5
4.2. Bases Conceptuales......................................................................................................5
V. METODOLOGÍA Y MATERIALES.................................................................................6
5.1. Metodología.................................................................................................................6
5.1.1. Método..................................................................................................................6
5.1.2. Materiales..............................................................................................................6
VI. RESULTADOS................................................................................................................8
VII. ANÁLISIS Y DISCUSIONES........................................................................................9
VIII. CONCLUSIONES.........................................................................................................10
IX. CUESTIONARIO..........................................................................................................11
X. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS................................................................................12

1
 I. RESUMEN

En un párrafo se informa de manera precisa y concisa sobre le practica realizada.

Responde a las preguntas:
 ¿De qué se trató la práctica?
 ¿Qué se hizo?
 ¿Cómo se hizo?
 ¿A qué se llegó?

2
 II. INTRODUCCIÓN

Una breve descripción del tema de trabajo. Máximo media página. Informando un
breve concepto del tema tratado y luego, en forma precisa el contenido del documento
(informe), decir se detalla los títulos que presenta el informe (resumen, introducción,
objetivo, fundamento teórico,…)

3
 III. OBJETIVO

III.1. Objetivo General:

 Reconocer las técnicas de identificación de Mesófilos Aerobios (MA)
en alimentos.

III.2. Objetivos Específicos:

 Identificar y esquematizar los procedimientos para identificar los

mesófilos aerobios (ma) en alimentos.
 Determinar las UFC, forma, elevación, borde, superficie, tamaño,
consistencia, cromogénesis, grado de transparencia de las colonias 24 y
48 horas después de la inoculación.

4
 IV. FUNDAMENTO TEÓRICO

IV.1. Bases Teóricas

Teorías científicas que fundamenten el desarrollo de la práctica.

Descripción de las técnicas utilizas durante las prácticas de laboratorio.

IV.2. Bases Conceptuales

Dar el concepto de términos científicos, utilizados en la práctica. Como mínimo 5

términos, señalando el autor que lo dice y el año de publicación.

5
 V. METODOLOGÍA Y MATERIALES

V.1. Metodología

V.1.1. Método

V.1.1.1. Preparación de la zona aséptica

1. Desinfectar la zona de trabajo con disolución comercial de hipoclorito
de sodio.
2. Encender el mechero.

V.1.1.2. Dilución de la Muestra de Alimentos

1. Mantener en refrigeración hasta 24 horas después de tomada la muestra.
2. Antes de abrir los envases se debe desinfectar con alcohol al 70% y
agitarse para homogenizar. Si es un material sólido se debe utilizar un
mortero estéril para fragmentar el alimento.
3. Se preparan diluciones del alimento de 10-1 hasta 10-3
4. La dilución 10-1 se prepara midiendo 1 gramos (sólido) o 1 ml (líquido)
de la muestra en un frasco que contenga 9 ml de diluyente (agua
peptona da o agua destilada).
5. Transferir 1 ml. de la dilución 10-1 a un tubo que contenga 9 ml del
diluyente (agua peptonada o agua destilada) para obtener la dilución 10-
2 y así sucesivamente hasta formar la dilución 10-3. Cada dilución
sucesiva disminuirá 10 veces la concentración anterior. Los tubos deben
estar bien rotulados.

5.1.1.3. Técnica de vaciado en placa

1. Homogenizar la dilución, agitando vigorosamente el tubo (Tubo 1, 2, y
3).
2. Inocular 1 ml. en una caja de Petri, previamente marcada, indicando la
dilución correspondiente.
3. Agregar a cada caja de Petri 15 ml. (en forma aproximada) de agar
nutritivo o agar cuenta gérmenes, fundido y enfriado a 37 °C aprox.
4. El incorporado del medio de cultivo, se realiza por rotación de la caja
sobre la mesa, procurando levantar ligeramente la tapa.
5. Dejar solidificar las cajas.
6. Incubar las cajas a 37 °C por 48 horas.

6
5.1.1.4. Técnica de inoculación en superficie
1. A partir de las 3 diluciones que se hicieron anteriormente se siembran 5
cajas de Petri conteniendo agar nutritivo o agar cuenta gérmenes,
adicionando 0.5 ml. de cada dilución en el contorno de la placa
correspondiente.
2. Introducir en alcohol la varilla de vidrio o asa de siembra y flamearla,
dejarla enfriar en un extremo de la caja.
3. Extender con la varilla o asa, el inóculo en toda la superficie de la placa
pasando la varilla repetidas veces. Utilizar la varilla o asa flameada
(esterilizada) para cada dilución.
4. Dejar secar la superficie de las cajas, aproximadamente 15 min.
5. Invertir e introducir a 37°C por 48 horas., en el caso de levaduras,
incubar a 28°C 24 horas.

5.1.1.5. Tratamiento de residuos

Los cultivos deben esterilizarse usando la autoclave, los medios sólidos pueden
ser desechados con los residuos orgánicos y los líquidos a la tarja.

5.1.1.6. NMP en alimentos

5.1.1.6.1. Prueba presuntiva

1. Sembrar 1 ml de la muestra por quintuplicado en caldo laurel sulfato
triptosa (C.L.S.T.)
2. Incubar a 37ºC por 24 horas
3. Observar si hubo una reacción positiva (producción de gas en los tubos
de fermentación que se encuentran en el medio de cultivo)
4. Anotar resultados.

5.1.1.6.2. Prueba confirmativa

1. Agitar cada tubo de C.L.S.T presunto positivo y con un asa de Kole
previamente esterilizada extraer una asada del material.
2. Inocular en el tubo de caldo lactosado verde brillante bilis.
3. Incubar a 37 ºC por 24 horas.
4. Pasadas las 24 horas proceder a la lectura, poniendo como positivos los
tubos donde se formó gas.
5. Anotar resultados

7
V.1.2. Materiales

V.1.2.1. Equipos
 Balanza analítica.
 Homogenizador de alimentos -STOMACHER
 Autoclave.
 pH metro.
 Baño María.
 Mechero Bunsen.
 Incubadora.
 Estufa.
 Termómetro.

V.1.2.2. Instrumentos
 Probeta de 250 ml (1 por grupo de mesa).
 Bagueta o agitador de cristal (1 por grupo de mesa).
 Espátula (1 por grupo de mesa)
 Pipeta de 1 y 10 ml (1 por grupo de mesa)
 Placas Petri (3 por grupo de mesa).
 Mortero (1 por grupo).
 Tubos de ensayo (6 por grupo de mesa).
 Vaso Beaker de 1000 ml (1 por grupo de mesa).
 Matraz de 250 ml (1 por grupo de mesa).
 Embudo de cristal (1 por grupo de mesa).
 Lupa Científica.

V.1.2.3. Materiales
 Plumón de tinta indeleble de punta fina. (Estudiante)
 Bolsas para descarte de basura. (Estudiante)
 Fósforos (Estudiante).
 Toalla o tela de secado (que no desprenda pelusas) (Estudiante)
 Detergente. (Estudiante).
 Esponja o tela para el lavado de los materiales de vidrio.
 Torundas.
 Tabla de cortar.
 Cuchillo de corte.

8
V.1.2.4. Reactivos

 Agar Nutritivo Estándar MERCK.

 Agua CuentaGérmenes (ACG) MERCK.
 Agua Destilada Estéril.
 Alcohol 96° (Estudiante).
 Solución clorada al 5%.

V.1.2.4.1. Material biológico

La muestra y/o analito a estudiar.

V.1.2.5. Material de escritorio

 Laptop
 USB
 Internet
 Agenda
 Lapicero
 Escritorio
 Cable USB
 Agenda de apuntes

9
 VI. RESULTADOS
VI.1.

DETERMINACIÓN
DE MESOFILOS 1. Dilución de la
AEROBIOS (MA) muestra de
EN ALIMENTOS alimentos.

MUESTRA

1 ml

1 1
ml. 9 ml 9 ml
ml.
9 ml

1 gr de la
-2
10 muestra + 9
ml del
10-1 diluyente

1 ml

9 ml

10
-3
10
 1 ml
TÉCNICA DE 9 ml
VACIADO
EN PLACA MUESTRA

1 gr de la Depositar 1
ml de cada
muestra + 9 ml
del diluyente
dilución en 10-1
caja Petri
estériles por
duplicado

1 ml

9 ml

1 ml 9 ml
1 ml

Depositar 1
ml de cada Depositar 1
Adicionar el agar dilución en ml de cada
caja Petri dilución en
nutritivo a cada
caja Petri
estériles por
duplicado
10-3 caja Petri
10-2
estériles por
duplicado

Se homogeniza el
medio de cultivo
con la muestra

37ºC Incubar las

placas en
forma
invertida
Hacer lectura e
interpretación de las
colonias

11
TÉCNICA DE
VACIADO
La muestra se
EN PLACA pipetea (1ml) Se añade el
medio estéril y
se mezcla con el
inoculó

Incubar las cajas en

posición invertida a
37ºC Muestra diluida
Se homogeniza
el medio de
cultivo con la
muestra

Hacer lectura e
interpretación
de colonias
después de 24
horas y 48 horas

12
VI.2. Determinacion de las UFC, forma, elevación, borde, superficie, tamaño, consistencia,
cromogénesis, grado de transparencia de las colonias 24 y 48 horas después de la
inoculación en alimento líquido y sólido.

Tabla N°1 Características morfológicas de mesófilos aerobios en jugo de naranja

en muestra de jugo de naranja Arévalo, F. et al, (2018)
CARACTERÍSTICAS 24h 48h

UFC Se reportan 20 UFC/ml Se reportaron 18 UNF/ml

Forma circulares y elípticas se encontraron circulares y

elípticas

Elevación plana Plana

Borde entero Entero

Superficie lisa lisa

tamaño la mayoría oscilaba entre los la mayoría oscilaba entre los

5milímetros de diámetro 5milímetros de diámetro

Consistencia mucosa mucosa

Cromogenesis Pigmentación amarilla Pigmentación amarilla

Grado de transparencia translucido Translucido

INTERPRETACIÓN:

En esta tabla se muestra el estudio que realizo Arévalo, F. et al,

(2018) sobre las características morfologías de las colonias de
mesófilos aerobios después de 24 horas desde su cultivo y luego
de 48 horas desde su cultivo en una muestra liquida que es el
jugo de naranja, donde se determina la cantidad de UFC, forma,
tamaño, borde, cromogenesis, etc.

13
 VII. ANÁLISIS Y DISCUSIONES

VII.1. Analisis
VII.1.1.
VII.1.2. Análisis de la Determinacion de las UFC, forma, elevación, borde, superficie,
tamaño, consistencia, cromogénesis, grado de transparencia de las colonias 24 y
48 horas después de la inoculación en alimento líquido y sólido.

En la tabla N°1, Arévalo, F. et al, (2018) en la muestra de jugo de naranja se obtienen

resultados positivos ya que si hubo crecimiento de mesófilos aerobios en las placas
Petri, el estudio de las características morfológicas de las colonias de estos
microorganismos se realizó después de 24 horas y después de 48 horas donde el
análisis de las palcas a 24 horas obtuvo 20 UNF/ml lo que indica que este alimento no
es apto para el consumo humano, posteriormente la toma de datos que se hizo a las 48
horas tuvo un cambio ya que las cantidad de UFC/ml disminuyó, las concentraciones
de mesófilos era mayor a la anterior, cabe decir que el alimento era perjudicial para la
salud.

Tabla N°2

VII.2. Discuciones

VII.2.1.1.

14
 VIII. CONCLUSIONES

De acuerdo a los objetivos de la práctica. Son conclusiones precisas, breves, deben ser
coherentes y tener lógica con los objetivos específicos de la práctica.

15
 IX. CUESTIONARIO

1. ¿Cómo define a la sigla UFC?

 Las unidades formadoras de colonias definen la reproducción bacteriana,
además determina el número de células separadas de la superficie.
 Según [ CITATION mer20 \l 10250 ].S.f. Unidades Formadoras de Colonias –
describe las actividades microbiológicas en un líquido. Muy simplificada es la
reproducción bacteriana o fúngica en agua durante un tiempo. Todos los organismos
son capaces de multiplicarse bajo ciertas condiciones. Así que en teoría una célula es
suficiente para empezar a multiplicarse y poblar un sistema de agua. Como las
bacterias u hongos en el agua pueden ser peligrosos para la salud del consumidor del
agua, se controlan de cerca. Esto no sólo es cierto para el agua potable, sino también
para el agua de refrigeración.

2. ¿Cómo entiende o define a las bacterias Mesófilos?

 Bacterias mesofilas son aquellas que se reproducen rápidamente a temperaturas
de 25 a 40°C, se desarrollan en el cuerpo humano y animales de sangre caliente
(Salmonella, Straphylococcus aereus). Pueden ser patógenas o saprofitas.

3. Señala que bacterias representan a las bacterias mesófilas.

 Las bacterias que representan a las mesófilas para su identificación son:
 Escherichia Coli, es un indicador de contaminación fecal en el
agua, en los productos lácteos y en otros alimentos crudos.
 Coliformes, determinación de presencia.
 Enterobacteriaceae, igual que las Coliformes se someten a estudios
para su determinación de presencia del E. Coli.

4. Señala la importancia de determinar las bacterias mesófilas en los alimentos.

 Indican materias primas contaminadas o procedimiento mal elaborado
desde el punto de vista sanitario para identificar si es apto para el consumo
humano, tener presente que estas bacterias crecen a temperatura corporal lo
que genera microorganismos patógenos en el cuerpo y en animales de
sangre caliente. Además es importante saber determinar las bacterias
mesofilas aerobias para conocer el número de viables de microorganismos
el cual se hace mediante el método de recuento de placas aeróbicas.

16
5. Señale el procedimiento o pasos para determinar el número de UFC en 1
gramo o 1 ml de muestra de alimento.

17
 X. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS

Información consultada para la elaboración del informe de la práctica. Deben de

consultar los textos de la biblioteca de la UNF.

Las referencias deben de escribirse de acuerdo al estilo APA.

1. LIBRO EN FISICO:

 PRIMER APELLIDO DEL AUTOR EN MAYUSCULAS INICIAL DEL ,

.
PRIMER NOMBRE DEL AUTOR ENTRE PARENTESIS ( ) EL AÑO DE
PUBLICACIÓN. TÍTULO DE LA OBRA. EDICIÓN SI LO TUVIERA.

LUGAR DE PUBLICACIÓN: EDITORIAL.

2. LIBRO CONSULTADO EN LA WEB:

 PRIMER APELLIDO DEL AUTOR EN MAYUSCULAS INICIAL DEL ,

.
PRIMER NOMBRE DEL AUTOR ENTRE PARENTESIS ( ) EL AÑO DE
PUBLICACIÓN. TÍTULO DE LA OBRA. EDICIÓN SI LO TUVIERA.

LUGAR DE PUBLICACIÓN: EDITORIAL. Recuperado de

htpp/www……….

Ojo: Tener en cuenta los signos de puntuación.

18