UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CENTRO DE BIOLOGÍA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA-MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA 2
TEMA:
ACONDICIONAMIENTO, MEDIOS Y TÉCNICAS DE CULTIVO

GRUPO: 3
PARALELO: IQ2-001
NOMBRES:
Chancusi Montoya Dayana Salomé
Criollo Arcos Joffre Leandro
Hidalgo Cuásquer Cristian Patricio
Morillo Arellano Lizbeth Mayerli
Palacios Salazar Byron Michael
DOCENTE:
Dra. Magdalena Díaz
TÉCNICO DEL CENTRO DE BIOLOGIA:
Quim. Juan Carlos Ochoa Ganchala
AYUDANTE:
Jefferson Fonseca
Quito, 28 de noviembre del 2022
ECUADOR
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

RESUMEN
Preparación y limpieza de materiales de laboratorio para
posteriormente esterilizarlos en máquinas de calor, buscando
eliminar todo rastro de microorganismos, con el objetivo de
utilizarlos como recipientes que servirán para elaborar medios de
cultivo en los que se realizará siembras bacterianas. Para ello se
utilizó un tipo de papel especializado con el que se envolvió a los
equipos de laboratorio y a continuación estos fueron llevados a los
equipos esterilizadores. Después se elaboró los medios de cultivo
en los cuales se observará el crecimiento de bacterias. Para esto se
preparó una disolución con una sustancia específica para cada
microorganismo que se desea cultivar, luego se calentó la mezcla
y en el transcurso de algunos minutos se observó un cambió en su
coloración, lo que indicó que el medio de cultivo estaba listo.
Finalmente se distribuyó este medio en recipientes especializados
para almacenar la mezcla y conservarla hasta el momento de
sembrar la bacteria.

PALABRAS CLAVE
ACONDICIONAMIENTO/ESTERILIZACIÓN/MEDIO_DE_CULTIVO/MICROORGANI
SMO
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

PRÁCTICA 2
ACONDICIONAMIENTO, MEDIOS Y TÉCNICAS DE CULTIVO

1. INTRODUCCIÓN
Los laboratorios de microbiología tienen la función principal de realizar
determinaciones microbiológicas o parasitológicas con el fin de llevar a cabo
experimentos e investigaciones, por lo cual, es de obligatoriedad cumplir con la norma
UNE-EN-ISO 15189 establecida por el Organismo Internacional de Estandarización
que busca el cumplimiento de un buen funcionamiento del laboratorio, además de,
conservar la seguridad e integridad de todo el personal ante posibles situaciones de
riesgo. (Alados, 2010) Por lo tanto al trabajar con medios de cultivo es necesario
considerar las enmiendas descritas para la preparación de los mismos, a consecuencia,
el laboratorio debe de asegurarse del funcionamiento adecuado de los medios de
cultivo determinando su esterilidad, que permita el crecimiento de microorganismos
específicos, si inhiben el crecimiento de otros y que proporcionen una adecuada
respuesta bioquímica. (Aguiar, Cercenado, Manchón, Rojo & Fraile, 2009)
Los medios de cultivo son conjunto de nutrientes que permiten el crecimiento de
microorganismos, los mismos que dependiendo de su naturaleza requieren de
condiciones físicas óptimas y concentraciones adecuadas que se controlan en su
fabricación, preparación, conservación y uso, dado que, de estas variables depende la
exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos, es necesario su
rigurosidad. (Gutiérrez de Gamboa, Garcés & Saravia, 2008)
Por lo que el proceso de acondicionamiento del material previo a la preparación del
medio de cultivo es de fundamental praxis, dado que, se busca evitar la contaminación
y la entrada de vapores de agua en el proceso de esterilización mediante el empaque
de los instrumentos a usar.

2. OBJETIVOS
2.1. Conocer la importancia del acondicionamiento de material y cómo se relaciona
con el deterioro de microorganismos.
2.2. Analizar el funcionamiento de la esterilización en la práctica y sus métodos.
2.3. Observar la influencia de la preparación de medios de cultivo utilizando medios
nutritivos.
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiales y Equipos
Rango Apreciación
1 balanza 0 - 2 [kg] ±1 [g]
3 pipetas 0- 4,5 [ml]
1 vaso de precipitación 0- 1000 [ml] ±5[ml]
15 caja Petri
1 probeta 0-500 [ml] ±5[ml]
1 frasco de Vidrio 0-500 [ml]
3.2. Sustancias y Reactivos
Fórmula Molecular
Agua H2O(l)
HPC Agar

3.3. Procedimiento
3.3.1. Acondicionamiento del material
❖ PIPETAS
- Tapar con algodón el cuello de la pipeta.
- Envolverlas con tiras de papel de aproximadamente 2cm, comenzar por la
punta y en forma de espiral girar hasta el final.
- Pegar con cinta al final y rotular el rango
-
❖ CAJAS DE PETRI:
- Corta el papel Kraft, en forma de rectángulos tres dedos más arriba del
tamaño de un cuaderno
- Coloca las cajas Petri en la parte central
- Se toman los extremos de Papel y se unen se doblan en forma triangular se
doblan hacia atrás quedando listas para esterilizar.
3.3.2. Preparación de medios de cultivo
- Pesar el Agar m-HPC según los requerimientos del frasco.
- Añadir en una probeta 400 mL de agua para posteriormente pasar la mitad
al frasco de vidrio, añadir el Agar pesado y por las paredes tirar el restante
de agua.
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

- Llevar la solución a calentamiento en agitación constante hasta que la

solución empiece a ebullir.
- Agitar hasta que la solución sea transparente y se haya diluido todo el
Agar, para luego dejar que se enfrie.
- Posteriormente alistar las cajas Petri para vertter la solución y dejar
enfriar.
- Llevar la solución a estufa.
4. PROCESAMIENTO DE DATOS

4.1. Observaciones y Resultados

Tabla 1. Resultados de la preparación del medio de cultivo

Tipo de agar Observación Imagen

Se observo que la solución

al someterse a

calentamiento hidrató el

HPC Agar material liofilizado y al

colocarse en la caja Petri y

esperar varios minutos se

solidifico.

Fuente: Grupo 3 (2022) Facultad de Ingeniería Química, Laboratorio de

Bioquímica y Microbiología. Universidad Central del Ecuador.

5. DISCUSIÓN

Tras la realización de la práctica se pudo decir que el método aplicado para el análisis fue

el cualitativo ya que, se toma en cuenta la composición y reacción del agar destinado para

cada grupo luego de la fase de calentamiento, en la que sin tomar mucho en cuenta la

cantidad qué se colocan las cajas petri, se hace énfasis en la transformación de la sustancia

conforme disminuye la temperatura. Uno de los errores aleatorios que estuvieron presentes
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

en la práctica fue no calentar completamente la sustancia ya que el compuesto debe estar

disuelto correctamente. También se tuvo un error al momento de la colocación de las cajas

petri, al colocar de manera desigual o también fuera de la caja. Cómo recomendación se

puede realizar con las mismas concentraciones, pero no con la misma disolución, todo esto

con la finalidad de analizar que sucede si se coloca el líquido en las diferentes cajas petri

a diferentes temperaturas, de manera que se puede identificar el medio adecuado de cultivo

para los microorganismos.

6. CONLUSIONES

6.1.En base a la práctica al acondicionar la pipeta, matraz Erlenmeyer y cajas Petri se

selló completamente para evitar contaminación-impurezas. Se debe a que el papel

Kraft y algodón soportan la tracción/manipulación sin sufrir deterioro y que se

pueda llevar a una esterilización para eliminar todo tipo de impurezas existentes.

6.2. La esterilización se entendió que es un proceso mediante el cual elimina todo tipo

de microorganismo mediante métodos físicos y químicos. Como la autoclave, el

cual destruye microorganismos por desnaturalización de proteínas y enzimas, y

desestabilización de membranas.

6.3. Basándose en las observaciones de la tabla 1, se entiende que los medios de cultivo

son un conjunto de nutrientes para el crecimiento de microorganismos. Para al

momento de preparar el medio saber que nos va ayudar a identificar, conocer el

metabolismo y su conservación a corto o largo plazo.

7. BIBLIOGRAFÍA

Alados, J. C. (2010, 1 agosto). Diseño de un laboratorio de microbiología clínica |

Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. https://www.elsevier.es/es-

revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-diseno-un-

laboratorio-microbiologia-clinica-S0213005X0900408X
 UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
CENTRO DE BIOLOGÍA

Gutiérrez de Gamboa, S., Garcés, A. & Saravia, K. (2008). LABORATORIO DE

MICROBIOLOGÍA-PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO [ARCHIVO

PDF].

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Pr

eparaci%C3%B3n_de_medios_de_cultivo.pdf

Aguiar, J., Cercenado, E., Manchón. F., Rojo, M. & Fraile, M. (2009). Recomendaciones

para la implantación de la normativa de calidad ISO 15189 en el Laboratorio de

Microbiología Clínica: bacteriología y serología [ARCHIVO PDF]. EIMC.

https://seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/

seimc-procedimientomicrobiologia32.pdf

8. ANEXOS
8.1.Preparación de medios de cultivo (Ver Anexo 1)
8.2.Frasco con contenido de HPC agar (Ver Anexo 2)
8.3.Acondicionamiento de material (Ver Anexo 3)
ANEXO 1
Figura 9.1-1. Preparación de medios de cultivo

Fuente: Grupo 3 (2022). Laboratorio de Biología. Facultad de Ingeniería Química.

Universidad Central del Ecuador.
ANEXO 2
Figura 9.2-1. Frasco con contenido de HPC agar

Fuente: Grupo 3 (2022). Laboratorio de Biología. Facultad de Ingeniería Química.

Universidad Central del Ecuador.
ANEXO 3
Figura 9.3-1. Acondicionamiento del material

Fuente: Grupo 3 (2022). Laboratorio de Biología. Facultad de Ingeniería Química.

Universidad Central del Ecuador.