UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE TEHUACÁN

ORGANISMO PÚBLICO DESCENTRALIZADO DEL GOBIERNO DEL ESTADO

DE PUEBLA
PROGRAMA EDUCATIVO DE MAESTRÍA EN AGRICULTURA
SUSTENTABLE Y DE PRECISIÓN

TEMA:
REPORTE DE PRÁCTICA

MATERIA:
MICROPROPAGACIÓN

PRESENTA:
CORTÉS ÁNGELES IBETH

DOCENTE:
MTRO. ISIDRO LÓPEZ SÁNCHEZ

VILLA SOLA DE VEGA, OAXACA, FEBRERO DE 2023.

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 Capítulo I. Introducción

La propagación de plantas in-vitro es una técnica muy utilizada en cultivos de

importancia económica. Permitiendo cultivar desde células, tejidos, órganos y
plantas completas. Mediante esta técnica y otras más es posible obtener plantas
libres de microorganismos pátogenos en un medio nutritivo aséptico (estéril) en
condiciones ambientales controladas. Para esta práctica se desarrollo la
multiplicación de explantes de agave, que ya fueron con anterioridad seleccionados,
preparados,desinfectados e introducidos el material in vitro.

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I. Objetivo de la práctica.

Multiplicación de explantes de agave, que sobrevivieron a las fases

anteriores.

II. Metodología.

La práctica se desarrolló en las instalaciones de la Universidad

Tecnológica de Tehuacán, en el edificio B, el dia 03 de febrero del presente
año, dando incio a las 9:00 am.

• Materiales.

Nombre Cantidad Nombre Cantidad

Matraz de 3 Balanza 1
Erlenmeyer analítica
Probeta graduada 1 Hot plate 1

Vaso precipitado 1 Agitador 1

magnético
Espátula 2 Gotero 1

Medidor de pH 1 Soluciones 2
buffer
Autoclave 1 Frascos de 20
vidrio con tapa
Guantes 2 Sacarosa 30 mg

MS 4.40 BA..ml 180

IAA..ml 20 Agar gr 7.8

Agua destilada 1L Alcohol 96° 500 ml

Aluminio 1 Parafilm 1

Hidróxido de sodio 1 Bisturí 1

Pinza 1 Mechero 1

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A) Preparación del medio de cultivo.

Se inicia por pesar las cantidades correspondientes del medio, iniciando

con todo lo sólido. Para ello se pesaron con ayuda de una balanza
analítica, primero se cortó un pedazo de aluminio y se calibro la balanza,
con ayuda de una espátula se colocaron cuidadosamente para lograr el
peso correspondiente; una vez pesados se vertieron en un matraz.

B) Integración de medios líquidos.

Se continúo añadiendo agua destilada, con BA. E IAA. Y MS, se
mezcló suavemente.

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C) Medición de pH
Con ayuda de un medidor de pH, se verifico que la preparación
obtuviera un valor de 5.7 y para proceder a realizarse el equipo tuvo
que calibrarse con soluciones buffer. Una vez calibrado se insertó el
sensor para brindarnos la lectura, en este caso de ajusto con Hidróxido
de sodio.

D) Integración del Agar.

Una vez obtenido nuestro pH, se continuo con la integración de Agar,

este se incorpora al final por detalles con el potenciómetro, mismo que
puede dañar a los sensores debido a las características del agar. Se
incorporaron 7.8 mg de este medio en nuestra preparación.Una vez
rehidratado del medio en un litro de agua destilada. Se calento agitando
frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para
disolverlo por completo. En el hot plate con ayuda de un agitador
magnetico.

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E) Autoclave.
Una vez que se alcanzó el punto de ebullición, se vacio el medio listo
a vasos de vidrio, mismo que solo fueron tapados, sin sellarse en su
totalidad, para acomodarlos dentro de bolsas de plástico, mismas que
fueron introducidas a la autoclave a una presión de 120° C durante 30
minutos. Una vez pasado este tiempo se dejó liberar la presión durante
una hora aproximadamente.

F) Sellado de medios.
Una vez esterilizados los medios de cultivo, se procedió a sellar los
botes con su respectiva tapa, para asegurar la inocuidad del mismo
de hizo uso de una campana, misma que fue desinfectada
previamente, posterior a esto, se sellaron con Parafilm, esto brindara
mayor seguridad evitando que el medio se contamine.

G) Multiplicación de explantes.
Está fase de desarrollo con la intención de poder conocer las técnicas
de multiplicación, esta fase de desarrollo dentro de la campana
previamente desinfectada con alcohol al 70%, un mechero, papel
esterilizado, pinzas y bisturí, iniciando por tomar el explante y

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 comenzar a tomar nuevas plantas ya formadas para continuar su
multiplicación y se les permita un mejor desarrollo.

III. Resultado
• Se logro la multiplicación (repique) de explantes ya previamente
establecidos, para continuar su desarrollo, cada uno logro un
contenedor con medio de cultivo con 10 explantes aproximadamente.
• De los medios de cultivo preparados, se dejaron bajo observación con
la intención de permitir el desarrollo de algún microorganismo que
pudieron ingresar y generar una contaminación.
IV. Conclusiones

La técnica de in-vitro, permite la producción de material vegetativo que

presenta principalmente una gran demanda, significando un valor
económico, pero también representa un conocimiento más
especializado como:
• Conocimiento de material y equipo de laboratorio.
• Practica de técnicas de siembra y preparación de medios.
• Medidas de inocuidad para evitar contaminación.